The aim of this study was to determine the effect of additional alpha-linolenic acid (ALA) supplementation during in vitro maturation (IVM) and culture (IVC) on nucleic maturation and embryo development of pigs. Cumulus-oocyte complexes (COCs) were incubated in IVM medium containing different concentration of ALA (25, 50 and $100{\mu}M$) for 44 h. After in vitro maturation, nuclear maturation of oocytes were evaluated by aceto-orcein stain. Mature oocytes with $50{\mu}M$ ALA were fertilized and cultured in IVC medium with ALA (25, 50 and $100{\mu}M$) during early-embryogenesis (48 hours after fertilization). Then, embryos were cultured with $25{\mu}M$ ALA during early embryogenesis and/or late embryogenesis (120 hours after early-embryogenesis). In results, oocyte maturation were significantly increased by $50{\mu}M$ ALA treatment groups compared with control groups (p<0.05). Treatment of $25{\mu}M$ ALA during early-embryogenesis enhanced cleavage rate of embryo compared with other groups (p<0.05), whereas formation and total cell number of blastocyst had no significant difference. Similarly, cleavage rate of embryos were increased by $25{\mu}M$ ALA supplement during early- or late-embryogenesis than ALA treatment both stage of embryogenesis (p<0.05), but did not influence to blastocyst formation. Interestingly, total cell number of blastocyst were enhanced in ALA treatment group during early-embryogenesis. These findings indicated that ALA supplement enhance the nuclear maturation of oocyte and embryo development, however, excessive ALA could negatively influence. Therefore, we suggest that ALA is used for improvement of in vitro production of mammalian embryo and further study regarding with functional mechanism of ALA is needed.
Sampath, Vetriselvi;Park, Jae Hong;Pineda, Lane;Han, Yanming;Cho, Sungbo;Kim, In Ho
Journal of Animal Science and Technology
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v.64
no.2
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pp.302-311
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2022
This study investigated the effect of a synergistic blend of free and buffered organic acid (FMP) on the performance of piglets born to sows supplemented with a blend of short- and medium-chain organic acids (SGG) during the late gestation and lactation period. A total of 150 multiparous sows (n = 50/treatment, Landrace × Yorkshire) were blocked (2.4 parity) and assigned to 1 of 3 dietary treatments: CON - corn-soybean meal-based basal diet, SGG-Low - CON+ 1.5 kg/ton SGG, and SGG-High - CON + 3kg/ton SGG. During weaning, 600 piglets (6.72 ± 0.5kg) which weaned from sows supplemented with 3 levels of SGG were allocated to 2 weaner diets (Control and FMP - 3kg/ton) following 3 × 2 factorial arrangement. Supplemental effects on performance were measured at d0-d21 and d 21-42, and the entire period. Pigs fed with FMP and born to sows supplemented with SGG-High gained more weight and ate more (p < 0.05) compared with those in the CON group in both phases, and with SGG-Low in the second phase. Over the entire post-weaning period, piglets born to sows supplemented with SGG-Low and SGG-High had a higher average daily gain (ADG) and body weight (BW) (p < 0.05). Regardless of sow treatment, pigs fed with an FMP diet had higher ADG (p < 0.001), BW (p = 0.045), and a lower feed conversion ratio (p = 0.033). Also, feeding FMP diets reduced the fecal Escherichia coli and Clostridium perfringens counts at d42. The current study indicates that sows fed SGG supplement had a positive carry-over effect on the post-weaning growth rate, and FMP supplement enhances the growth performance and reduced the number of C. perfringens and E. coli. Thus, the application of 3 kg/ton of SGG in sows' diet and subsequent feeding of piglets with FMP would be an effective strategy to improve growth rate and reduce pathogenic bacteria in post-weaned piglets.
In this study, the cultural medium used for the efficient production of $\gamma$-PGA with a newly isolated Bacillus sp. RKY3 was optimized. It was necessary to supplement the culture medium with L-glutamic acid and an additional carbon source in order to induce the effective production of $\gamma$-PGA. The amount of $\gamma$-PGA increased with the addition of L-glutamic acid to the medium. The addition of 90 g/L L-glutamic acid to the medium resulted in the maximal yield of $\gamma$-PGA (83.2 g/L). The optimum nitrogen source was determined to be peptone, but corn steep liquor, a cheap nutrient, was also found to be effective for $\gamma$-PGA production. Both the $\gamma$-PGA production and cell growth increased rapidly with the addition of small amounts of $K_2HPO_4$ and $MgSO_4\cdot7H_{2}O$. Bacillus sp. RKY3 appears to require $Mg^{2+}$, rather than $Mn^{2+}$, for $\gamma$-PGA production, which is distinct from the production protocols associated with other, previously reported bacteria. Bacillus sp. RKY3 may also have contributed some minor $\gamma$-PGA depolymerase activity, resulting in the reduction of the molecular weight of the produced $\gamma$-PGA at the end of fermentation.
The role of each supplement in serum-free medium KM3 for the growth of hybridoma and the production of monoclonal antibody was investigated. Transferrin, ethanolamine and bovine serum albumin were shown to be indispensable for the growth of four kinds of hybridoma tested in this work, especially transferrin for Alps 25-3, and ethanolamine for A4W and KW hybridoma. The addition of $\beta$-mercaptoethanol to the culture medium of HCGK showed a good influence of both the cell growth and the production of monoclonal antibody. Upon the experimental results, we suggested a serum-free medium containing a minimum composition for the culture of hybridoma.
This study was performed to investigate the effects of concentration and degree of unsaturation of fatty acids on cellular proliferation and lipid peroxide production, using primary skin fibroblasts from neonate rats Fibroblasts (CPD : 2.8-5.4). Cells were cultured either in control medium (Dulbecco's modified Eagle's medium supplement with 10% fetal bovine serum) or in media supplemented with various kinds (stearic, oleic, linoleic, arachidonic, linolenic, eicosapentaenoic acid) and amounts (5, 10, 25, 50, 100, 150uM)of fatty acids. Cellular proliferation ratio and lipid peroxice production were measured and morphological changes were observed. Cellular proliferation was inhibited and morphological changes were observed. Cellular proliferation was inhibited and morphological changes were observed in cells grown in stearic containing media. Oleic, arachidonic, and eicosapentaenoic aicd tend to stimulate cellualar proliferation, and linolenic acid had no effects. Lipid peroxide concentrations in fibroblasts increased in proportion to the contents and unsaturation of fatty acids in media. Especially supplementation of arachidonic acid accelerated cellualr lipid peroxidation. Free radicals may cause severs damage to biological molecules, so lipid peroxidation probably contributes cellular membrane damages. However there were little relationship between lipid peroxide production and cellular proliferation in this study. (Korean J Nutrition 29(2) : 159~165, 1996)
Jun Ren;Junhao Shen;Thi Duc Thai;Min-gyun Kim;Seung Ho Lee;Wonseop Lim;Dokyun Na
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.33
no.7
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pp.973-979
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2023
Lycopene is a carotenoid widely used as a food and feed supplement due to its antioxidant, anti-inflammatory, and anti-cancer functions. Various metabolic engineering strategies have been implemented for high lycopene production in Escherichia coli, and for this purpose it was essential to select and develop an E. coli strain with the highest potency. In this study, we evaluated 16 E. coli strains to determine the best lycopene production host by introducing a lycopene biosynthetic pathway (crtE, crtB, and crtI genes cloned from Deinococcus wulumuqiensis R12 and dxs, dxr, ispA, and idi genes cloned from E. coli). The 16 lycopene strain titers diverged from 0 to 0.141 g/l, with MG1655 demonstrating the highest titer (0.141 g/l), while the SURE and W strains expressed the lowest (0 g/l) in an LB medium. When a 2 × YTg medium replaced the MG1655 culture medium, the titer further escalated to 1.595 g/l. These results substantiate that strain selection is vital in metabolic engineering, and further, that MG1655 is a potent host for producing lycopene and other carotenoids with the same lycopene biosynthetic pathway.
Kim Y. S.;Song S. H.;Cho S. K.;Kwack D. O.;Kim C. W.;Park C. S.;Chung K. H.
Reproductive and Developmental Biology
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v.29
no.3
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pp.201-205
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2005
The objective of this study was to investigative the effects of amino acids supplementation on maturation, fertilization and embryo development of pig oocytes. Essential amino acids (EA), non-essential amino acids (NA) or both amino acids (EA + NA) were supple-mented to North Carolina State University (NCSU) 23 medium containing porcine follicular fluid (pFF). When the amino acids were supplemented to the maturation medium, the maturation rates were higher (p<0.05) in the NA group than control ($83.3{\pm}0.04\%\;versus\;70.0{\pm}0.05\%$, but the subsequent cleavage rates and development to morula and blstocyst stage between aminoacid supplement groups and control were not different. The developmental rates to morula and blastocysts stage were not significantly different regardless of amino acid supplementation to culture medium. In addition, supplementation of amino acids did not significantly affect the rate of fertilization and polyspermy. When the amino acids were supplement to culture medium, the number of trophectodermal (TE) cells was significantly (p<0.05) higher in amino acid supplement group than that of control ($18.6{\pm}0.5\;versus\;16.1{\pm}0.6$), whereas the numbers of inner cell mass (ICM) cells were not different among the treaonent groups and control ($29.0{\pm}0.9\~31.5{\pm}1.2$). Total cell number was also significantly (p<0.05) higher in EANA group ($50.0{\pm}1.0$) than that of control group ($44.2{\pm}1.1$). These results indicate that the amino acid supplementation to maturation and culture medium may not significantly stimulate early embryo development, but may improve the TE cell number of blastocyst stage in the pig.
Jung, Ji-Young;Hong, Seong-Cheol;Rinker, Danny Lee;Choi, Myung-Suk;Lee, Byung-Hyun;Yang, Jae-Kyung
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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v.38
no.2
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pp.124-134
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2010
This study was performed to evaluate the efficiency of using softwood as the sawdust medium for Lentinula edodes cultivation, effect of nutrient on the mycelial growth, spawning, the mushroom yield, and quality. The nitrogen nutrition significantly enhanced the mycelial growth of L. edodes. The glutamic acid in the L. leptolepis and P. koraiensis, and asparagine in the P. densiflora were appeared to slight increase in the mycelial growth. The vegetable oil showed very effective on the mycelial growth in the P. koraiensis sawdust medium. Carbon/nitrogen ratio of all the test was reduced after mycelial growth. The mycelial growth was exclusively dependent on reduction of carbon. The mushroom yield (32.7%) of the P. densiflora sawdust medium (carbon source: 3% active carbon, nitrogen source: 0.4% asparagines) was the best in mushroom production of L. edodes, followed by the Q. variabilis sawdust (35.4%) of the control medium. The diameter of mushroom cap was obtained from the P. densiflora sawdust (carbon source: 3% sucrose, nitrogen source: 0.4% potassium nitrate) and P. koraiensis sawdust (carbon source: 3% sucrose, nitrogen source: 0.4% potassium nitrate), and the P. koraiensis sawdust (carbon source: 3% xylose, nitrogen source: 0.4% glutamic acid, supplement: 0.05% amino acid), with values 71.5 mm, 71.5 mm and 72.1 mm, respectively. In the polypropylene bag cultivation, the weight losses of the block medium gradually increased for 80 days in the dark (13.8~16.8%) and then became stable in the range of 20.7~25.8%.
Four Suffolk ewes were used in Latin Square switch over design to study the effects of varying levels and sources of protein on heat production and thermoregulatory responses at daytime high ($33^{\circ}C$ temperature. They were fed Italian ryegrass hay supplemented with fishmeal and/or urea, providing three different levels of crude protein (CP) (low/unsupplemented: 7.9, medium: 11.6, and high: 15.8%) at $1.5{\times}maintenance$. Feeds were distributed at 0900 (30%) and 1700 (70%). Urea diet caused higher heat production and increased vaginal temperature compared to fishmeal and fishmeal-urea mix diets. Time spent standing, skin temperature and respiration rate of sheep fed urea were similar with those of sheep fed fishmeal. Sheep fed diet with low CP level had higher heat production, increased vaginal and skin temperature than sheep fed diet with medium CP content. Sheep on high CP diet produced significantly more heat than sheep fed medium CP diets. Their vaginal temperatures were similar with those of sheep fed medium CP diet but lower than those of sheep fed low CP diet. Respiration rates of sheep and time spent by them for standing on all diets did not differ significantly. These results suggest that urea is inferior protein supplement for thermoregulation of animal at hot environment, as it induced higher heat production than fishmeal and fishmeal-urea mix. Thermoregulatory response on fishmeal-urea mix diet was similar to fishmeal diet. Increasing CP of the diet from low to medium gives advantage for thermoregulation of animal. Increasing CP further to high level was not beneficial as it resulted in the responses of sheep similar to those on low protein diet.
This study was carried out to investigate the effect of morphology of oocytes, kinds of media, cysteine and myo-inositol supplementation on IVM rate of porcine oocytes. Cumulus- enclosed oocytes were incubated in maturation NCSU-23 and TCM-199 medium with supplementation with 3, 5, 10, 20 mM myo-inositol and 0.05, 0.1, 0.5, 1.0 mM cysteine. 1. When classified by morphology, excellent, good and fair of cumulus-enclosed oocytes were incubated for 48 hrs and the IVM rate were $14.2{\pm}3.7%{\sim}58.7{\pm}4.0%$, respectively. The rate were greater in oocytes with excellent cumulus cells than those without cumulus cells. 2. The IVM rate of oocytes cultured in TCM-199 and NCSU- 23 medium supplementation or non-supplementation with 1.0 mM myo-inositol were $7.5{\pm}4.5%,\;45.0{\pm}4.8%\;and\;4.4%,\;42.5{\pm}4.2%,\;18.0{\pm}5.2%$, respectively. Supplementation with myo-inositol significantly increased the IVM rate of oocytes. 3. The IVM rate of oocytes cultured in NCSU-23 medium supplementation of 3, 5, 10, 20 mM myo-inositol for 48 hrs were $47.5{\pm}4.5%,\;57.5{\pm}4.2%,\;62.5{\pm}4.9%,\;50.0{\pm}5.2%$, respectively. The IVM rate of oocytes in NCSU-23 medium supplemented with 10 mM myo-inositol were significantly increased compared to control ($42.5{\pm}4.0%$). 4. The IVM rate of oocytes cultured for 48 hrs in NCSU-23 media supplement with 0.3, 0.5, 1.0, 2.0 mM myo-inositol were $50.0{\pm}4.5%,\;62.5{\pm}4.2%,\;52.5{\pm}4.9%,\;45.0{\pm}4.2%$, respectively. The IVM rate of oocytes in NCSU-23 medium supplemented with 10 mM cysteine were significantly increased compared to control ($42.5{\pm}4.0%$).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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