This study was conducted to establish an in vitro maturation (IVM) system by selection of efficient macromolecule in the porcine in vitro production (IVP) technology. To choose the efficient macromolecules in the development of porcine embryos, the effects of 3 kinds of macromolecules (porcine serum; PS, porcine follicular fluid; pFF, and polyvinyl alcohol; PVA) supplemented in IVM media on the maturation, cleavage, and development rates to blastocyst of parthenogenetic activation (PA) and in vitro fertilization (IVF) embryos were examined. The maturation rates of porcine oocytes in media supplemented with PS were significantly higher than those with pFF and PVA (92.4% vs. 85.4%, 77.1%; p<0.05). In the cleavage and development to blastocyst rates, supplement with PS or pFF in the IVM media was more effective than PA. However, there were no significant differences in cleavage and development to blastocyst between PS and pFF group. From the results of this study, it was demonstrated that PS was optimal macromolecule in the porcine IVM media.
The purpose of this study is to analysis the effects of the organizational characteristics(firm size and fitness of business) and the level of information system usage(maturation of system and user's participation) to the EDI performance(level of usage and satisfaction). The sample used in this research consists of 101 EDI users. The results of this study can be summarized as follows: First, the fitness of business in organization have considerable effect to the satisfaction in the EDI system. Second, the user's participation have a positive effects to both the level of usage and the satisfaction in the EDI system. And the maturation of system have effect only to the level of usage in the EDI system. Those results are useful in the EDI management and operational policy.
Background: The IGF system plays important roles in controlling growth, development, reproduction, and aging of organisms. Methods: To estimate maturation of the Pacific oyster Crassostrea gigas, we investigated the expression of insulin-like growth factor (IGF) system components and sex-specific genes. To determine the role of the IGF system in the growth and spawning period of female and male oysters, we examined mRNA expression levels of the C. gigas insulin receptor-related receptor (CIR), IGF binding protein complex acid labile subunit (IGFBP_ALS), and molluscan insulin-related peptide (MIP), as well as those of vitellogenin (Vg) and receptor-type guanylate cyclase (Gyc76C) in gonads of C. gigas collected between April and October, when sex can be determined visually in this species. Results: We found that MIP, IGFBP_ALS, and CIR mRNA expression levels were dependent on sex and month and were greater in males than in females. CIR and Vg mRNA expression levels were very similar among females, whereas IGF system components and Gyc76C were very similarly expressed among males. The highest expression values were observed in May, when oysters are mature; CIR and Vg mRNA expression levels were highest in females, and those of MIP, IGFBP_ALS, CIR, and Gyc76C were highest in males. Interestingly, we observed a 1:1 proportion of females to males during this period. Conclusion: Our results suggest that IGF system components, as well as Vg and Gyc76C, are associated with sexual maturation in C. gigas.
Kim, Jung-Hyun;Kim, Dae-Geun;Kim, Hyo-Won;Lee, Bae-Ik;Kim, Shin-Kwon;Jun, Je-cheon;Myeong, Jeong-In;Kim, Dae-Jung
Journal of Life Science
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v.27
no.10
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pp.1097-1103
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2017
For the artificial induction of the sexual maturation of Anguilla japonica, salmon pituitary extract (SPE) is continuously injected into females, and the eggs obtained from artificial sexual maturation are artificially fertilized with sperms and hatched. However, repeated injection of SPE in the abdominal cavity causes tremendous stress in females, which may prevent their complete sexual maturation and reduce the immune system function, ultimately resulting in death. In addition, the poor quality of the ovulated eggs can reduce the hatching and survival rate of larvae. In the present study, sexual maturation of females was induced by inserting an osmotic (OS) pump containing hormone analogs known to effectively induce sexual maturation into the abdominal cavity of female eels, and the effect of the OS pump on the induced sexual maturation was investigated. Our study results showed that the gonadosomatic index (GSI) was significantly higher in the fish subjected to SPE injection than those subjected to human chorionic gonadotropin (hCG), gonadotropin-releasing hormone analog (GnRHa), and methyl testosterone (MT) injections, either separately or in combination. In addition, a histological analysis showed that the oocytes in the SPE OS pump groups were more mature (entered the nuclear shift stage) than those in the other groups. These results suggest that an osmotic pump containing hormone analogs can be used to induce sexual maturation in female A. japonica artificially.
Sa, Soo-Jin;Park, Chun-Keun;Kim, In-Cheul;Lee, Seung-Hoon;Kwon, Oh-Sub;Kim, Myung-Jick;Cho, Kyu-Ho;Kim, Du-Wan;So, Kyoung-Min;Cheong, Hee-Tae;Webb, Bob
Journal of Embryo Transfer
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v.25
no.3
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pp.171-177
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2010
Plasminogen activators (PAs) are serine proteases that convert plasminogen to plasmin. The PA/plasmin system has been associated with a number of physiological processes such as fibrinolysis, ovulation and fertilization. Although correlations have been reported between reactive oxygen species (ROS) and oocyte maturation, the relationship between PA activity and ROS is unknown. The present study was undertaken to determine the effects of cumulus cells on PA activity in matured porcine oocytes under xanthine (X)-xanthine oxidase (XO) system. When oocytes were matured under the X-XO system, the proportion of oocytes remaining GV stage was higher (p<0.05) in oocytes without cumulus cells. The incidence of degenerated oocytes was higher (p<0.05) in the X+XO ($11.1{\pm}6.1$ and $21.6{\pm}3.4%$) than in the control group ($2.9{\pm}1.8$ and $4.0{\pm}1.6%$). The proportion of TUNEL-positive oocytes and activity of caspase-3 were higher (p<0.05) in cumulus-free oocytes and oocytes exposed to ROS. Tissue-type plasminogen activator-plasminogen activator inhibitor (tPA-PAI) and tissue-type plasminogen activator (tPA) activity were detected in oocytes that were separated from cumulus-oocytes complexs (COCs) at 44 h of maturation culture, and only tPA was produced in oocytes that were denuded before the onset of maturation culture. On the other hand, the activities of PA were increased (p<0.05) when oocytes were cultured under the X-XO system. The higher activity of tPA was observed in denuded oocytes (DOs) underwent apoptotic changes by oxidative stress. In COCs, however, tPA-PAI as well as tPA activity was detected and apoptotic changes such as DNA cleavage or caspase-3 activation were not observed. These results suggest that tP A may be relevant to apoptotic cell death in porcine oocytes by oxidative stress.
Gonad maturation of Manila clam, Ruditapes philippinarum was induced in this study using a recirculation system over 8 weeks in early spring. Clams used in the experiment were collected in $15^{th}$ April 2010 from the west coast of Korea, as the surface water temperature remained $11^{\circ}C$. To induce gametogenesis and subsequent maturation seawater temperature was elevated $1^{\circ}C$ per day over 10 days to reach $20^{\circ}C$. For the experiment, clams were raised in 120 L quadrangle tank maintained with re-circulated seawater system over 57 days. Water quality parameters including the water temperature, salinity dissolved oxygen, ammonium ion and nitrate levels in the tanks were monitored daily. Mixture of concentrated microalgae including Tetraselmis, Isochrysis, Pavlova and Thalassiosira weissflogii was supplied to clams twice a day, and quantity of the daily ration was adjusted as 3% of clam body dry weight. Histology was applied to examine gonad maturation. Daily monitoring of the water quality parameters indicated that the recirculation system supplied suitable environment to Manila clam; the nitrogenous components stayed below toxic levels (< 0.2 mg/L). At the beginning of the study, clams were mostly in early developing stage. As the seawater temperature reached $20^{\circ}C$, 10 days after the experiment, 20% of clams reached late development at 12 days. First ripe clams were observed at 42 days and 40% of clams were in ripe and ready for spawning at the end of study, 57 days after the experiment. In this study, gametogenesis of Manila clam was successfully induced by elevating water temperature and supplying commercially produced microalgae in a recirculation tank system.
In order to know the effects of PCB(Arochlor 1248) on the oocyte maturation and proges-terone(P$_4$) production by FPH(Frog pituitary homogenate: 0.01 p.e/$m\ell$) of frog in vitro, the oocytes were cultured for 20 hours in presence of the PCB at various concentrations and exam-ined their maturation(germinal vesicle breakdown: GVBD) rates and P$_4$ levels secreted by the oocyte in the culture medium. The results show that PCB concentration of 10 ppb suppressed the maturation of the oocytes and secretion of P$_4$. To examine the reversibility of the inhibitory effects, the oocytes were exposed to the PCB only for 3 hours, and then transferred to plain medium and cultured further for 17 hours. The oocytes were recovered from the toxic effect of the PCB when they were exposed to 2.5 ppb, but not to 5 ppb of the PCB. These results indi-cate that PCB suppress the maturation of oocytes and secretion of p, at low concentration, sug-gesting that the frog oocyte culture system can be used as a useful tool to evaluate the toxicity of the pollutants in the environment.
Kim, Young-Ju;Kang, Hye-Eun;Cho, Gyu-Tae;Suh, Young-Sang;Yoo, Myong-Suk;Kim, Hyun-Woo
Fisheries and Aquatic Sciences
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v.12
no.4
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pp.276-285
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2009
Despite great commercial interest, relatively little has been described about molecular mechanism of bivalve reproduction. We investigated genes involved in ovarian maturation of the Yesso scallop, Patinopecten yessoensis. GSI index and histological analysis revealed that maturation of ovary begin in February and spawning period is from April to June which is similar to the previous study in the East Sea. As result of combination analysis of differential display RTPCR (DDRT-PCR) and histological examination, vitellogenin (Vg), ferritin (Ft) and ADT/ATP carrier protein (ACC) were identified as differently expressed genes in maturating ovary. Endpoint RT-PCR results showed that Vg is ovary-specific genes whereas Ft and ACC are expressed ubiquitously suggesting that Vg can be good molecular markers for ovarian development and sex determination in bivalves. Quantitative PCR results revealed that Vg were expressed highest during growth stage and appears to play a major role in oocyte maturation. On the contrary, expression of Ft was highest after spawning stage, which suggests that up-regulation may be involved in spawning and inactive stages in which the scallops recover from spawning. In addition, high level of the mitochondrial gene, ACC, may play a role in energy metabolism in maturating oocytes. Isolation and molecular studies of these key genes will expand our knowledge of the physiological changes from various exogenous factors including temperature, salinity, pH, even or numerous endocrine disrupting chemicals (EDCs) during reproductive cycle. In addition, further study of these genes implicates various industrial applications including the stable seed production, increased food quality, or economic aquaculture system.
Journal of the Korea Academia-Industrial cooperation Society
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v.13
no.8
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pp.3532-3536
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2012
Understanding of the maternal transcriptome increased to elucidate the underlying molecular mechanism of normal oocyte maturation, which depends on a precise sequence of changes in maternal genes expression. Previous reports that the translational potential of a maternal mRNA is generally determined by the length of the poly(A) tail, and deadenylation is usually the first sign of mRNA degradation. However, in vitro cultured system has the underlying molecular mechanisms remain unclear. We determined whether the role of molecular basis, four important maternal genes, C-mos, cyclin-B1 (regulatory subunit of MPF), BMP15 and GDF9, were selected for detection of their precise mRNA expression patterns by real-time PCR and for determination of their polyadenylation status by poly(A) tail PCR during oocyte maturation. In the present study. the abnormal expression of maternal mRNAs prior to zygotic genome activation, which results in suppression of the corresponding protein level, may be responsible for, at least in part, a profound defect in further embryonic development. Reasonable expression of maternal gene is crucial for proper oocyte maturation and further embryonic development.
Experiments were disigned to define and optimize efficiency of a system whereby pig follicular oocytes could be matured and fertil ized in vitro. The pig oocytes removed from 1- 2 mm and 3-7 mm follicles were cultured in vitro in the mKRB(-BSA) solution containing estrous sow serum (ESS), FCS or dialyzed pig follicular fluid for 24 to 48 hr at 37$^{\circ}C$. The oocytes matured in vitro were evaluated after epididymal spermatozoa-oocyte incubation for 24 hr for pronucleus formation. 50-60% of the oocytes reached metaphase II during 36 to 48 hr of culture. There was no differernce in oocyte matura¬tion between two groups of follicular size but meiosis was slightly faster in the 3-7 mm follicular oocytes. The oocytes matured in mKRB (-BSA) plus 5% ESS, 15% FCS or dialyzed follicular fraction showed slightly higher maturation rates than the control mKRB. in vitro fertilization, pronucleus formation, tended to be increased when mKRBi-BSA) plus 5% ESS or 15% FCS was used for oocyte maturation and in vivo -capacitated spermatozoa were inseminated, respectively. It is concluded that ESS, FCS and dialyzed pig follicular fluid may be effective factors for in vitro maturation and fertilization of pig follicular oocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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