메탄올, 에탄올, 아세톤 그리고 물을 이용하여 신선한 오만둥이의 추출물을 제조한 후, 추출물의 항산화능 및 $TNF-{\alpha}$ 유도능을 조사하였다. 아세톤 추출물을 제외한 대부분의 추출물은 malonedialdehyde 생성을 50% 이상 저해하는 항산화능을 보였으며, 메탄올 추출물은 가장 높은 값인 59.3%의 malonedialdehyde 생성 저해능을 나타내었다. 물과 아세톤 추출물은 각각 18.5와 $12.3\;{\mu}M$의 glutathione 함량을 보였지만 그 외의 추출물에서는 검출되지 않았다. 추출물들의 $TNF-{\alpha}$ 유도능을 RAW 264.7 세포주로 조사하였다. 오만둥이 물 추출물은 첨가량이 증가할수록 $TNF-{\alpha}$ 생성을 증가시켰다. 그러나 그 이외의 추출물들은 RAW 264.7 세포주에서의 증가할수록 $TNF-{\alpha}$ 생성을 유도하지 못하였다.
피부 노화를 예방할 수 있는 기능성 화장품은 지질과산화를 초래하는 활성산소종(ROS)의 생성 억제와 제거 또는 collagen과 elastin의 사슬 절단 및 교차결합의 변형을 억제하는 효능이 있어야 한다. 본 연구에서는 피부 조직 중 malonedialdehydt (MDA)와 collagen이 항노화 작용이 있는 기능성 화장품의 검색 지표로서의 사용 가능성을 알아보고자 10, 25 주령 랫드의 정상 피부와 창상을 유도한 피부를 7일간 관찰하였다. 육안적인 관찰에서는 10 주령군의 11마리 랫드 중 10마리에서, 노령 랫드군의 11마리 중 8마리에서 창상이 폐쇄되었다. 10 주령 랫드와 비교했을 때 노령 랫드에서 흉터의 길이는 긴 반면에 외피의 폐쇄, collagen 밀도, 외피의 두께, 총 hydroxyproline (hyp)과 MDA 농도가 유의적으로 낮게 나타났다( p〈0.05 ∼ p 〈 0.005). 10 주령에서 진피의 규칙적으로 배열된 collagen 섬유다발과 많은 섬유아세포의 관찰과는 반대로 25 주령 이상 랫드에서는 collagen 섬유다발 사이에 많은 낭포, 소와 및 섬유아세포 수의 감소, 느슨한 외피와 진피의 결합과 얇은 외피가 관찰됨으로서 25 주령 이상의 랫드에서 감소된 hyp 양은 감소된 collagen 밀도 및 형태학적 변화와 일치하였다. 따라서 collagen 합성과 축적의 지표인 hyp의 측정은 항 피부노화 예방 및 개선제의 모니터링 연구에서 매우 유용하며 또한 피부 노화의 검객 지표로 사용이 가능하다고 사료된다.
본 연구는 $CCl_4$로 간 손상이 유도된 흰 쥐에서 호박산의 간 보호 효과 정도를 알아보기 위하여 수행되었다. 실험을 하기 위해 정상군(NOR), $CCl_4$처리군(CON), 보석호박섭취군(PCON-CS)군으로 나누어 1주일 적응기간을 가진 SD계 흰 쥐에 보석호박산을 일정한 시간에 200 mg/kg으로 3주간 투여하였다. 21일째 되는 날 마지막 투여 5시간 후에 정상군을 제외한 다른 그룹의 쥐에게 $CCl_4$를 복강주사 하였다. 보석호박섭취군은 $CCl_4$처리군에 비해 AST, ALT 활성은 93.20%, 88.76% 각각 억제효과를 보였고 MDA는 $CCl_4$처리군에 비해 85.17% 억제효과를 보였다. 보석호박섭취군의 SOD와 CAT는 $CCl_4$처리군에 비해 38.65%, 47.99% 증가효과를 보였다, 결론적으로 AST, ALT 활성도와 MDA 수치는 보석호박섭취군이 $CCl_4$처리군에 비하여 유의적으로 감소하여 정상군과 비슷한 수치를 나타내었고 SOD와 CAT효소 활성은 보석호박섭취군이 $CCl_4$처리군에 비하여 증가하였다. 또한 조직학적 관찰은 사염화탄소로 유도된 간경변과 세포괴사가 호박산에 의해 예방된 것으로 나타났다. 이 데이터들로 확인해보면 $CCl_4$로 유도된 간 독성을 호박산이 간을 보호하는 결과를 나타냈으며, 이는 호박산이 간 손상에 대한 보호 효과를 가진 약물의 소재개발에 이용 될 수 있다고 본다.
We investigated the pathogenesis of liver tissue damage during the lipid peroxidation and fibrogenesis with the observation of correlations between the parameters of collagen synthesis (and deposition) and lipid peroxidation in liver fibrosis (cirrhosis) rats. Rats were randomly divided into two groups, normal and $CCl_4$-thiopental sod. intoxicated group. And the one group was treated intragastrically with the mixture of $CCl_4$-thiopental sod. 3 times per week for 3 weeks. The liver tissue and sera were used for the measurement of hydroxyproline (HYP), malonedialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD). Biochemical parameters such as aspartate transaminase (AST), alanine transaminase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), total-bilirubin and blood urea nitrogen (BUN) were measured. Additionally, the expression of collagen ${\alpha}1$(III) and $\beta$-actin mRNA was observed by RTPCR. The histological change in liver tissue was also observed by Masson's trichrome and H&E staining. Correlation analysis was carried by Spearman's rho method. All biochemical parameters except total-bilirubin were significantly higher in the $CCl_4$-thiopental sod. treated group than that of the normal group (p < 0.01). In the $CCl_4$-thiopental sod. treated group, Hyp as a parameter of collagen synthesis (deposition) and MDA as a metabolite of lipid peroxidation, were significantly elevated by 1.98 and 2.11 times higher than that of the normal group (p < 0.001) respectively. The activity of SOD in the $CCl_4$-thiopental sod. treated group is decreased significantly by 44.8% (p < 0.001). And collagen ${\alpha}1$(III) mRNA was more expressed in the $CCl_4$-thiopental sod. treated group than that of the normal group. However, the expression of $\beta$-actin mRNA is showed similar in both of groups. A good correlation was observed between the content of hyp and MDA concentration (r = 0.70, n = 40) in the two groups. And the correlation between the levels of hyp and SOD (r = -0.71, n = 25) is also reliable. However, no correlation were observed between MDA concentration and SOD (r = -0.40, n = 25) in the two groups. Elevated levels of MDA in $CCl_4$-thiopental sod. treated rats indicated enhancement of lipid peroxidation, which is accompanied by a decrease in SOD activity. Moreover, we could confirm that the parameters of collagen synthesis (and deposition) is in good correlation with the metabolite of lipid peroxidation (MDA) and the lipid peroxidation antagonizing enzyme (SOD). Hence, we propose that (1) lipid peroxidation and collagen synthesis (and deposition) could be enhanced by intragastrically application of $CCl_4$-thiopental sod. during a short terms. And (2) the intoxication of $CCl_4$-thiopental sod. could be used for monitoring of lipid peroxidation and collagen synthesis (and deposition) for test of antioxidant and antifibrotic agent.
In present study, we examined whether or not the pretreatment of Korean Red Ginseng (KRG) could protect hepatotoxicity induced by carbon tetrachloride (CCl$_4$) and D-galatosamine (GalN). For this study, we not only tested activity of various plasma enzymes (AST, ALT, SDH, LDH), which are used as indicators of liver disease, but also checked the change of liver components such as lipid, glutathione and cytochromes content, and several liver enzyme activity. Pretreatment of KRG for two weeks significantly reduced the elevated plasma enzyme activities induced by CCl$_4$ and GalN. Pretreatment of KRG also restored the hepatic enzymes, malonedialdehyde formation, and depletion of reduced glutathione content induced by CCl$_4$ and GalN to near normal level. However, ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase activity was lot affected by KRG. These results suggest that KRG shows the hepatoprotective effect by reducing lipid peroxidation, by reducing the activity of free radical generating enzymes, and by preserving the hepatic glutathione.
To investigate an effect of cyclohexanone (CHO) treatment on the serum levels of xanthine oxidase (XO) in liver damaged animals, the rats were intraperitoneally pretreated with 50% carbon tetrachloride ($CCl_4$) in olive oil (0.1 mL/ 100 g body weight) 14 times every other day. To the $CCl_4$-pretreated rats, CHO (1.56 g/kg body weight) was injected once and then the animals were sacrificed at 4 hours after CHO treatment. The increasing rate of serum and liver XO activities to the control was higher in CHO-treated animals pretreated with $CCl_4$ than the $CCl_4$-pretreated those. Concomitantly CHO injection to the $CCl_4$-pretreated animals showed somewhat higher Vmax and lower Km value in the kinetics of liver XO enzyme. Furthermore, increasing rate of hepatic malonedialdehyde content to the control was also higher in CHO-treated animals pretreated with $CCl_4$ than $CCl_4$-pretreated those. On the other hand, the injection of CHO to the $CCl_4$-pretreated animals showed the more enhanced liver damage on the basis of liver function finding; liver weight per body weight (%), serum levels of alanine aminotransferase activity and hepatic glucose-6-phosphatase activity. In conclusion, injection of CHO to the $CCl_4$-pretreated rats led to more increased activity of serum XO and it may be caused by acceleration of hepatocyte membrane permeability and induction of enzyme protein.
To investigate an effect of aging on the xylene metabolism in liver damaged animals, a study was conducted. 50% carbon tetrachloride ($CCl_4$) in olive oil (0.1 ml/100 g body weight) was intraperitoneally given to 5-week and 12-week rats 12 times every other day and then one dose of 50% xylene in olive oil (0.25 ml/100 g body weight) was intraperitoneally given to the rats, and after 24 hr, the animals were sacrificed. On the basis of the functional findings in rat liver, ie, serum levels of alanine aminotransferase activity, liver protein and malonedialdehyde contents, 5-week rats showed less liver damage than 12-week rats. The increasing rate of urinary methylhippuric acid concentration to the control was significantly higher in 5-week rats than 12-week rats in case of xylene treatment after induction of liver damage. On the other hand, liver damaged 5-week rats showed significant rise of hepatic cytochrome P45O content compared with the liver damaged 12-week rats by the xylene treatment. And increasing rate of hepatic alcohol or aldehyde dehydrogenase activities to each liver damaged animals was higher tendency in 5-week rats than 12-week rats by the xylene treatment. In conclusion, 5-week rat showed greater metabolic rate of xylene than 10-week rats in case of liver injury because 5-week rats led to a slight liver damaged compared with 12-week rats.
To evaluate the seasonal differences of nutrient intake and serum biochemical indices (total cholesterol, HDL-, LDL- cholesterol, TG, MDA : malondialdehyde, TAS : total antioxidant status, folate) in Korean college women with a mean age of 20.15y, this study was conducted twice: once in winter and a second time in summer. Anthropometric assessment was also measured in the two seasons. As a result body fat mass (p<0.05), body fat% (p<0.05), and abdominal fat% (p < 0.01) in the summer were significantly lower than those in winter. Intake of fat (p < 0.05), polyunsaturated fatty acid (p < 0.01), zinc (p < 0.05), and vitamin E (p < 0.05) were at significantly higher levels in the summer period compared with the winter period. In addition, nutrients with an intake level less than 75% RI of KDRIs were folate in winter and calcium, and folate in the summer. Total cholesterol (p < 0.05) and HDL-cholesterol in summer, according to lipid profiles, were significantly lower than those in winter. Although MDA, one of the products of lipid peroxidation, remained unchanged, TAS was significantly higher in summer than in winter. The level of folate in summer showed significantly lower than that in winter. The present study suggests that nutrient intake of college women women differs according to the seasons and anthropometric indices and serum biochemical indexes were associated with seasons. Thus nutritional education programs on the basis of season are needed for college women.
L. casei 균주를 이용하여 알로에를 발효한 결과 다당체의 분자량이 현저하게 저분자화 되었다. 사염화탄소로 유도된 흰쥐의 간과 혈청에서 간기능 활성, 항산화효소 활성 및 지질과산화에 미치는 발효알로에의 용량별 효과를 조사하였다. 14일 연속적으로 발효알로에(50, 100 mg/kg)을 경구투여 하였다. 알로에 투여군에서 SOD, CAT의 활성은 유의성있게 활성이 증가하였으며, AST, ALT, MDA 함량을 측정한 결과 용량 의존적으로 감소하였다. 이러한 결과로 미루어 볼때 발효알로에는 사염화탄소로 유발된 간독성에 대하여 항산화효소 활성을 증가시키며, 지질과산화를 억제하는 것으로 사료된다.
In the present study, the potential hepatoprotective effects of poly herbal formulation, Hepa-1000, against oxidative damages induced by t-BHP were evaluated in HepG2 cells in order to relate in vitro antioxidant activity with cytoprotective effects. The t-BHP induced considerable cell damage in HepG2 cells was shown by significant glutamic oxaloacetic transaminase (GOT) and lactate dehydrogenase (LDH) leakage, and increased lipid peroxidation. Hepa-1000-treated cells showed an increased resistance to oxidative challenge, as revealed by higher survival capacity than the one of control cells against t-BHP induced oxidative stress and hepatotoxicity. In addition, the Hepa-1000 had hepatoprotective effects lowering the activity of GOT and LDH, simultaneously. That is, it could inhibit the cell membrane damages resulting in the increased activities of GOT and LDH in the cell culture media. Furthermore, the Hepa-1000 could reduce t-BHP enhanced lipid peroxidation, which was evaluated by measuring the production of malonedialdehyde. Based on the data described above, it could be suggested that the Hepa-1000 has significant hepatoprotective effects and plays a protective role against lipid peroxidation by free radicals.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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