It is known that temperature during solid fermentation using rice bran is increased upto 60-70 degree. To investigate the major microflora regarding temperature maintenance of rice bran bathing, we first isolated predominant microbes using various media by a limiting dilution method. The RNA of isolated strains were purified and sequenced. The rRNA sequencing revealed that the selected strains were similar to Bacillus coagulans according to their taxonomical relationships. Together, these results indicate that Bacillus coagulans is a major kind of microflora during solid fermentation using rice bran.
Oyster (Crassostrea virginica) and Weakfish (Cynoscion regalis) were stored at 6, 0, -4 and -20$^{\circ}C$ for up to 45 days and examined for changes in microflora. Aerobic plate counts (incubated at 21$^{\circ}C$) were performed at selected times during storage and 495 isolates (255 isolates from oyster and 240 isolates from Weakfish) were randomly selected from the plates during the storage. Before the storage of the fishes, viable counts of oyster were 4.9${\times}$10$\^$5/ CFU/g of meat and those of Weakfish were 1.5${\times}$10$^4$ CFU/cm$^2$of skin. Microflora of oyster before storage, the major isolates identified as Pseudomonas spp. (67%) and Vibrio spp. (20%). Pseudomonas ll1/1V-H and Flavobacterium/Cytophaga were predominant genus in the microflora of oyster during cold storage at 6, 0, -4 and -20$^{\circ}C$. The composition of the microflora of Weakfish before storage, Acinetobacter (40%) and Moraxella (33%) were the major species, with Pseudomonas and Vibrio constituting a small percentage of the total isolates. The microflora shifted to predominantly Pseudomonas spp. during storage at 6. 0 and -4$^{\circ}C$, making up from 60 to 100% of isolated strains. During frozen storage, the percentage of isolates identified as Mnraxella increased to 40-60% of the total isolates. During cold storage, halophilic bacteria (Pseudomonas lII/IV-H and Vibrio) were predominant in oyster while nonhalophilic bacteria (Pseudomonas III/IV-NH and Moraxella) were predominant in Weakfish. Vibrio spp. were higher in oyster than in Weak fish. Listeria spp. were not isolated but unidentified ${\beta}$-hemolytic bacteria were islolated from both of the fishes during cold storage.
The effects of Bifidobacterium longum HY8001 supplement intake on the fecal microflora and fecal bacterial enzyme activity were studied in ten healthy human volunteers, before, during and after intake (respectively for 3 weeks). During intake of B. longum HY8001 supplement, fecal, $\beta$-glucuronidase and nitroreductase activities significantly decreased 44.6%(p<0.005) and 32.3%(p<0.01), respectively. Although numbers of major bacterial groups of fecal microflora were not affected by B. longum HY8001 intake for 3 weeks, the number of Bifidobacterium was significantly increased (p<0.05). This result indicates that intake of B. longum HY8001 might be potentially beneficial for the prevention and inhibition of colon cancer and improvement of human intestinal microflora composition.
In order to study ecology of microorganisms during Takju brewing, microflora changes were examined fromm the start to the sixth day of Takju fermentation in 24 hours intervals. Takju made from rice, flour and dried sweet potato in a liter volume open container at the laboratory and a sanple of Takju brewing factory were studied for their microflora and their changes during fermentationl together with a sample of Kokja. Results obtained were as follows ; 1. The followings were the identified microorganisms in Kokja. The molds ; Absidia spinosa, Aspergillus parasiticus. The yeasts ; Candida melinii, Candida Solani, Hansenula anomala. The bacteria ; Luctobacillus casei, Leuconostoc mesenteroides, Bacillus subtilis, Bacillus pumilus. 2. Torulopsis inconspicua, Lactobacillus casei, Leuconotoc mesenteroides, Bacillus subtilis, Bacillus pumilus were isolated from main mash of laboratory-made Takju samples. The yeast, Torupsis inconspicua which was not present in Kokja and, probably of a contaminant yeast, dominated the yeast flora of Takju mash of rice, flour and sweet potato of labotatory brewing. The laboratory brewing lost also always showed large population of lactic acid bacteria flora. 3. None of the wild yeasts which were present in Kokja appeared in Takju mashes. The Kokja appears to be of no use as the yeast source for Takju fermentation. Also the Kokja appears to be of not so effective amylolytic and proteolytic enzyme sources considering the microflora characteristics. Probably the major role of Kokja in Takju fermentation may be to contribute in taste formation. 4. Inoculation of Sacharomyces cerevisiae into the mash to the level of $10^7$ ml at the start of fermentation greatly changed the ecological aspects eliminating conditions of rather slow rising of natural contaminant yeast populaiton and fermentation which might give rise to prosperity of lactic acid and Bacillus bacteria that would be avoidable. 5. Examination of microflora of the large factory scale Takju fermentation showed the quite similar pattern of microflora and their changes to that of the cultured yeast-inoculated laboratory batch Takju fermentation. The cultured yeast dominated as the only predominant microflora, and the lactic acid bacteria flora were completely suppressed and aerobic bacteria, greatly. Probably this may be the regular microflora pattern of normal Takju fermentation. The role of lactic acid bacteria and aerobic bacteria in Takju fermentation may not be clear yet from this experiment alone.
For the study of human intestinal environments with the intestinal bacteria producing ${\beta}-glucuronidase\;and \;7{\alpha}-dehydroxylase$, genus Clostridium, known as the producer, were isolated from the fecal microflora. Through screening twice for one person, fecal microflora without major bacterial group seemed to be changed, which indicated the microflora would be changeable by the diet factors. With using Neomycin-Nagler selective medium during the screening, 14 Clostridium spp. were isolated and then the harmful enzyme activities were determined. Isolate-11 among them produced strongly ${\beta}-glucuronidase$ and its activity was 0.021 unit/mg Protein. However, the strain producing $7{\alpha}-dehydroxylase$ was not isolated. The Isolate-11 was tentatively identified as Clostridium scatologenes through cultural and physiological characteristic.
This study was conducted to investigate the effects of steeping periods and temperatures of waxy rice on the microflora and enzyme activities of steeping water and waxy rice, as well as on the microscopic structures of waxy rice during the preparation of gangjung. When the steeping water was 15 and $35^{\circ}C$, yeast and lactic acid bacteria were the major microflora after 1 day. After 11 days, Lactobacillus spp. were the major bacteria, while Bacillus spp. were the primary microflora after 21 days. At $25^{\circ}C$ the primary species were Bacillus spp., Leuconostoc spp., and Bacillus spp. after 1, 11 and 21 days, respectively. The $\alpha$-amylase activity of steeping water increased proportionally with the increase of temperature and period, while the protease activity tended to increase for 11 days, but decreased at 21 days. The enzyme activities of the steeped waxy rice, especially the $\alpha$-amylase activity, decreased with higher steeping temperature, while the $\beta$-amylase and glucoamylase activity remained constant for up to 21 days. Observation using scanning electron microscopy indicated that intracellular cleavage of steeped waxy rice endosperm resulted in a rough surface morphology due to the exposure of polygonal starch granules. Tiny pinholes on the surface of waxy rice starch granules were also observed after steeping for 11 days.
Fecal microflora of 12 breast-fed(BF) and 15 formula-fed(FF) infants were investigated at 1 year after birth and the results were compared to those that had previously been obtained from the same subjects at 1 week after birth, and before and after weaning. At 1 year the two lactation groups showed no significant differences both in frequencies and numbers of each major bacterical species, except eubacteria, which showed higher frequency in FF infants. Bifidobacteria appeared as dominant species in 50% BF infants, heres bacteroides in 73.3% FF infants. Fecal pH was lower, though insignificant, in BF infants(6.5$\pm$0.4) than in FF infants(6.8$\pm$0.5). In BF infants, the number of bifidobacteria, clostridia, and E. coli deceased from birth up to 1 year, whereas the number of bacteroides similar trends to BF infants except that the number of bifidobacteria increased, but insignificantly. This research showed that the floral differences resulted not from the age, but from the types of feeding and that breast feeding and that breast feeding could be better than formula feeding in the BF infants had more stable floral composition and bowels with lower pH, which can play a protection role against pathogen infection.
As a result of screening the medicinal herbs which selectively control human intestinal microflora, water extract of Akebia quinata Decaisne was proved to have a strong inhibitory activity against the growth of Clostridium pefringens, a major harmful intestinal bacterium. The anti-bacte-rial activity was stable under the thermal treatment at 100$\circ$C for 120 min and in a range of pH 1 to 11. In addition, the water extract of Akebia quinata Decaisne showed the antibacterial activities against five different strains of Clostridia including C. perfringens. On the contrary, the extract did not inhibit the growths of Bifidobacterium, Lactobacillus, Escherichia coli, Enterococcus faecalis. The extract, however, suppressed markedly the growth of Bacteroides fragilis and Staphylococcus aureus in vitro. Alike in the mixed culture inoculated with human feces as starter, in vivo tests using rats showed that the extract tends to increase the numbers of Bifidobacteria and Lactobacilli in the intestinal microflora of rats, whereas those of Clostridia were attenuated.
As a basic study for quality improvement of Korean soybean paste and soybean sauce, we investigated on microflora of soybean paste and soybean sauce fermentation. Major Microorganisms were isolated from the sample pastes and sauces, and identified systematically. Selected Microorganisms were identified by MIS whole cell fatty acid analysis by gas chromatography. Identification results showed that Bacillus licheniformis, bacillus pumilis and Bacillus subtilis were dominant in soybean paste and Staphylococcus vitulus, Bacillus subtilis, Bacillus pumilus, and Lactobacillus fermentum were dominant in soybean sauce. It seemed that these Microorganisms played an important role in soybean paste and soybean sauce fermentation and could be used for the further studies such as protease and amylase activities.
Major hazards existed in slaughterhouse are pathogenic microorganisms originated from intestinal microflora of slaughtered animals. This study was intended for the identification of microbial contamination sources during pork slaughtering in small plants. Total aerobic bacteria, Coliform group, Salmonella spp, Listeria monocytogenes, and Campylobacter jejuni/coli were isolated from the surface sample of pork carcasses. Contamination level among different sampling points of ham, belly and neck did not showed statistical differences. Therefore, the mixed sampling from belly and neck of carcass could be effective for microbiological monitoring. Isolation rates of pathogenic microorganisms showed Salmonella spp 20.9%, Listeria monocytogenes 10.5%, and Campylobacter jejuni/coli 8.1% from 296 sampling points. High prevalence rate of Salmonella spp indicated that the contamination of intestinal microflora occurred due to unsanitary processing control, which required HACCP system in small plants. It was recommended that the prerequisite program should be a key factor for a successful HACCP system implementation especially in small size slaughterhouse.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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