During slaughtering, animal blood is typically discarded, resulting in water pollution. However, this discarded blood has valuable components, such as immunoglobulin (Ig). Although several studies have been conducted to develop methods for effective recycling of slaughterhouse blood, they have not been commercially utilized in Korea. Here, we extracted an Ig-rich fraction from porcine blood that was then subjected to various in vitro tests, including pathogen growth inhibition, antigenic cross-reactivity, and anti-toxin activity. The porcine immunoglobulin concentrate (PIC) was effectively purified by eliminating other components, such as albumin, and consisted of approximately $63.2{\pm}2.9%$ IgG and $7.2{\pm}0.4%$ IgM on a protein basis. The results showed that it significantly suppressed the growth of pathogenic bacteria, and bound to all tested pathogens, including both gram-positive and gram-negative species, although the degree of activity differed according to strain. The PIC bound to two types of lipopolysaccharide (LPS) obtained from Escherichia coli O111:B4 and Salmonella enterica serotype typhimurium in a concentration-dependent manner. In addition, the PIC restored the proliferation activity of the lymphoblast K-562 cells when co-incubated with pathogenic LPS. These results confirm that the PIC prepared in this study is a potentially valuable functional food material or diet supplement as an alternative to antibiotics that can protect animals from pathogenic bacteria.
Kim, Joo-Hwan;Koo, Ye-Mo;Lee, Woo-Sun;Suh, Soo-Kyung;Kang, Jin-Seok;Han, Eui-Sik;Kim, Seung-Hee;Park, Sue-N.
Molecular & Cellular Toxicology
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v.3
no.3
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pp.165-171
/
2007
Mitomycin C (MMC), an antitumor antibiotic isolated from Streptomyces caespitosus, is used in chemotherapy of gastric, bladder and colorectal cancer. MMC is activated in vivo to alkylate and crosslink DNA, via G-G interstrand bonds, thereby inhibiting DNA synthesis and transcription. This study investigates gene expression changes in response to MMC treatment in order to elucidate the mechanisms of MMC-induced toxicity. MMC was admistered with single dose (0.32 and 1.6 ${\mu}M$) to TK6 cells. Applied Biosystem's DNA chips were used for identifying the gene expression profile by MMC-induced toxicity. We identified up- or down-regulated 90 genes including cyclin M2, cyclin-dependent kinase inhibitor 1A (p21, cip1), programmed cell death 1, tumor necrosis factor (ligand) superfamily, member 9, et al. The regulated genes by MMC associated with the biological pathways apoptosis signaling pathway. Further characterization of these candidate markers related to the toxicity will be useful to understand the detailed mechanism of action of MMC.
To establish the effective ways to prevent bovine mastitis, the study has been performed to investigate the attributable factors causing down-regulation of immune responses in mammary gland of non-lactating cows. Lymphocytes from peripheral blood and mammary gland secretions(MGS) were obtained from normal healthy cows and mastitic cows, respectively. Lymphoblastogenesis were investigated carefully by adding different concentrations of supernatants collected from pure-cultures of neutrophils seperated from peripheral blood and MGS, respectively. The results obtained are as follows ; 1. Lymphoblastogenesis activity stimulated by Con A, PWM and PHA were significantly reduced in MGS from mastitic cows. 2. Supernatants collected from pure-culture of neutrophils separated both from peripheral blood and MGS showed inhibitory effect on mitogenic lymphoblastogenesis. 3. Supernatants from mammary gland neutrophils have shown 7 times more inhibitory activity than those from peripheral blood and this inhibitory effect was increased in proportion to increasing concentrations of supernatants when those were added to lymphoblast cells in culture.
Recent clinical studies have shown that a high proportion of patients with acute promyelocytic leukemia (APL) achieve complete remission after treatment with all-trans retinoic acid (ATRA). However, most patients who receive continuous treatment with ATRA relapse and develop ATRA-resistant leukemia. Dendritic cells (DCs) are important antigen-presenting cells in the development of antileukemic T-cell responses. In this study, we investigated the strategies to overcome ATRA resistance of APL cells by inducing the differentiation of DCs from human leukemic cell lines for the developtment of adoptive immunotherapy. CD83 was used as a mature DC marker in this study and the expression of CD83 mRNA was determined by RT-PCR method. The promyelocytic leukemic cell line HL-60, B lymphoblast cell lines RPMI 7666 and NC-37 could be induced to dendritic cells in vitro. Treatment of HL-60 with phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) resulted in the expression of myeloid-related DC phenotypes, while treatment of RPMI 7666 with fms-like tyrosine kinase 3 ligand (Flt3-ligand, FL) and treatment of NC-37 with PMA and FL led to the expression of lymphoid-related DC phenotypes. In conclusion, myeloid-related DC phenotypes and lymphoid-related DC phenotypes could be generated from HL-60, NC-37 and RPMI 7666 cell lines, respectively. These DC phenotypes can potentially be used to generate antileukemic T cells in vitro for adoptive immunotherapy.
To investigate the possible enhancement of genotoxicity in stress environment, we examined the of effect of genotoxic material in oxidative stress-induced condition using human tell line. Human lymphoblast cell line, TK6 was treated with hydrogen peroxide ($H_2O_2$) for induction of oxidative stress, and treated with N'-methyl-N'-nitroguanidine (MNNG), af a genetoxic material. We carried out MTS assay to set treatment doses. TK6 was treated with $H_2O_2$ at 6.75 (low dote) or $13.5\;{\mu}M$ (high dose) for 2 h, and treated with MNNG af 0.117 (low dose), 0.234 (middle dose), $0.468\;{\mu}M$ (high dose) for 2 h. As results, a treatment of MNNG induced DNA dam age as dose dependently. And TK6 treated with $H_2O_2$ at low as well as high dose followed by MNNG treatment showed higher DNA damage compared to MNNG alone treated groups. Malondialdehyde, as a marker of lipid peroxidation was increased in $H_2O_2$ and MNNG treated groups. Real-time RT-PCR analyses for expression of several antioxidative enzymes showed that catalase mRNA and glutathione peroxidase 1 mRNA expression were decreased in $H_2O_2$ and MNNG treated groups. Taken together, we conclude that genotoxicity induced by MNNG is enhanced in a condition of oxidative stress induced by $H_2O_2$ and it suggests that it should be associated with induction of lipid peroxidation and decrease of antioxidant enzymes.
Purpose: The green tea polyphenol (GTPP) has been known to exert antioxidant activity as a radical scavenger as well as cancer preventive and cancer growth inhibition effect. The aim of this study was to identify whether GTPP not only potentiate the growth inhibition effect in ${\gamma}-irradiated$ human cancer cell but also exert protection action for irradiated human normal cell. Materials and Methods: GTPP (80% catechin including >45% EGCG) added in the HL60, human leukemia, and NC37, human lymphoblast, before irradiation. After establishing the amount of GTPP and the dose of radiation, the cells were treated with the GTPP for 6 hours and irradiated with the determined doses. Results: Viability when $10{\mu}g/ml$ GTPP added before ${\gamma}-irradiation$ with 1 Gy to NC37 cells was not different in comparison with control but it when was irradiated with 3 Gy significantly different (1 Gy;P=0.126, 3 Gy;P=0.010). $20{\mu}g/ml$ GTPP did not show significant difference in both NC37 cells irradiated with 1 Gy and 3 Gy (1 Gy;P=0.946, 3 Gy;P=0.096). Viabilities were significantly decreased with concentration of additional GTPP in HL60 with 1 or 3 Gy (1 Gy $69.0{\pm}1.7%\;vs\;42.4{\pm}1.3%,\;3\;Gy;\;66.9{\pm}3.9%\;vs\;44.2{\pm}1.6%$). Conclusion: In vitro study, we certified that when the cells were irradiated with dose below 3 Gy, GTPP provide not only anticancerous effect against cancer cells but also radioprotective effect in normal cells simultaneously. Theses results suggest the possibility that consumption of green tea could give the radioprotective effect and maximize the effect on internal radiation such as radioiodine therapy concomitantly.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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