In order to know the effects of Calculus $Bovis{\cdot}F디$ Ursi aqua-acupuncture ($C{\cdot}F$ aqua-acupuncture) to the liver damage, we carried out the treatment of $C{\cdot}F$ aqua-acupuncture and injection of Kam-Du-Tang on the liver damaged rat which is induced by aconitine, and then ultrastructural study has been to the liver tissue. The results were as follows: 1. In the hepatic cell of normal group, the nuclear envelope is round and electro-density of nucleoplasm is relatively low, and have one or two large nucleolus. Cell organelle is developed rough endoplasmic reticulum(RER) and many mitochondria, glycogen granules, smooth endoplasmic reticulum(SER) and Golgi apparatus. 2. In 24 hours control group, nuclear envelope is very irregular, RER and most of cell organell is shown that destroyed by aconitine. This is similar to the 48 hours control group. In 72 hours control group, RER is recovered somewhat but cristae of mitochondria is not seen the shape 3.In 24 hours $C{\cdot}F$ aqua-acupuncture group, nuclear envelope is very irregular and cristernae is very dilatable and many mitochondria is dilationed and the cristae is not definite like the control group. In 48 hours $C{\cdot}F$ aqua-acupuncture group, nuclear envelope is relatively round and chromatin is regular. Cristernae of RER and ribosme is somewhat imperfect but is similar the normal group, and the cristae of mitchondria is shown definitely like the normal group. In 72 hours $C{\cdot}F$ aqua-acupuncture group, nuclear envelope is round and cell organell is similar to normal group. 4. In 24 hours Kam-Du-Tang group, nuclear envlope is very irregular and cell organelles are destroyed by the effects of aconitine. In 48 hours Kam-Du-Tang group, nuclear envelope is somewhat irregular but chromatin is relatively regular. RER is seperated regularly through the cytoplasm, but cannot make the structure of lamina, and cistennae is very dilationed. many of glycogen granules is seperated regularly. In 72 hours Kam-Du-Tang group, RER makes the lamina. Mitochondria is a little but inner space is dilationed so the shape of is not definite and a lot of glycogen granules are accumulated in several places. It see the above result, hepatic cell that is damaged by aconitine is effected chiefly by the $C{\cdot}F$ acupuncture and effect of acupuncture is similar to the detoxicated effect of Kam-Du-Tang.
솔잎 EtOAc획분을 하루 25, 50, 100 mg/kg체중으로서 SD계 랫트에 45일동안 투여하여 간장획분의 세포막 유동성(membrane fluidity MF), 기초 및 유도활성산소(BOR 및 IOR), 산화적 스트레스로서 과산화지질(lipid peroxide : LPO) 및 산화단백질(oxidized protein : OP), 그리고 리포푸신(lipofuscin : LF)의 축적에 미치는 영향을 평가하여 보았다. 솔잎 EtOAc획분의 투여에 의하여 간장의 mitochondria 및 microsome획분에서 어느 정도 MF가 증가하였지만, 유의성은 EtOAc-100 투여그룹의 mitochondria획분에서만 인정되었다. 기초 및 유도활성산소로서 BOR 및 IOR의 생성 억제효과는 간장의 두 획분의 EtOAc-50 및 EtOAc-100투여그룹에서 유의적인 활성산소의 생성 억제 효과가 인정되었다. 산화적 스트레스에 미치는 영향에서는 mitochondria획 분에서 는 EtOAc-100투여그룹에서, 그리고 microsome획분에서는 EtOAc-50 및 EtOAc-100투여그룹에서 유의적인 LPO의 생성 억제효과가 인정되었고, mitochondria 획분에서는 EtOAc-50 및 EtOAc-100투여그룹에서 유의적인 OP의 생성 억제효과가 인정되었지만, microsome 획분에서는 아무런 유의성도 인정할 수 없었다. 그렇지만, 간장의 클로로포름층에서 측정한 LF의 축적은 EtOAc-25, EtOAc-50 및 EtOAc-100 투여그룹에서 다같이 유의적인 LF의 축적 억제효과가 인정되었다. 이상의 결과에서 평가하여 볼 때 솔잎 EtOAc획분의 투여는 간장의 유동성을 촉진하고 산화적 스트레스를 효과적으로 억제할 수 있을 것으로 기대된다.
In order to investigate the effect of riboflavin on cholesterol and MLHP (methyl linoleate hydroperoxide) -induced fatty liver electron microscopically, riboflavin was given to rate receiving high cholestero and MLHP diet for 4 weeks, 8 week old male Sprague-Dawley rats were administrated diets daily, as following group ; usual diet (control ), riboflavin 910 ug/20gm BW), cholesterol (50mg/gm BW), MLHP(0.1ml/20gm BW), cholesterol plus MLHP, cholesterol plus riboflavin, cholesterol plus MLHP plus riboflavin, by means of intubation into the stomach for 4 weeks. Each group consisted of 10 rats, The liver of the animals were examined ultrstructurally by transmission electronmicroscope. The results wee as follows ; 1) The three group including cholesterol, MLHP, cholesterol plus MLHP feeding resulted in fatty liver. 2) The main finding of the fatty liver were swelling and vacuolation of mitochondria, a lot of lipid droplets, disarrangements and loss of rough endoplamic reticulums. 3) the most striking features in the group of cholesterol plus riboflavin, cholesterol plus MLHP plus riboflavin feeding were decrease of size and number of lipid droplets, mitochondrial swelling and vesiculation, with restortion of rough endoplasmic retriculums. It is postulated with above findings that riboflavin was effective in prevention of cholesterol and MLHP -induced fatty liver.
시판 목초액 A (원액 35%)을 사용하여 음용수에 0%, 1.0%, 25.0%, 50.0%, 75.0%가 되도록 조제한 다음, CD계 수컷 흰쥐 (150 ${\pm}$ 10 g)에 2개월 동안 조제사료와 함께 자유 음용케 하여 간조직 중의 활성산소로서 수퍼옥시드 라디칼(O$_{2}\;^-$), 히디록시 라디칼, 과산화수소 및 제거효소로서 수퍼옥시드 디스무타아제 (SOD), 글루타치온 퍼옥시다아제 (GPx) 및 카탈라아제 (CAT)에 미치는 영향을 평가하였다. 목초액 PL-25 및 PL-50 투여군의 간조직의 미토콘드리아 획분에서는 O$_{2}\;^-$의 생성량은 대조군 대비 12${\sim}$14%의 O$_{2}\;^-$의 생성량 억제효과가 나타났고, 간조직의 마이크로솜획분에서는 대조군 대비 각각 11.0${\sim}$15.0의 O$_{2}\;^-$의 생성량 억제효과가 나타났다. 간조직 미토콘드리아획분에서 ${\cdot}$OH 생성량이 목초액 PL-25 및 PL-50 투여군에서 대조군 대비 12${\sim}$20%의 ${\cdot}$OH 생성 억제효과가 나타났고, 간조직의 마이크로솜획분에서는 대조군 대비 17${\sim}$20%의 ${\cdot}$OH 생성 억제효과가 나타났다. 목초액 PL-25 및 PL-50 투여군의 간조직의 미토콘드리아획분에서는 대조군 대비 12${\sim}$15%의 유의적인 H$_{2}$O$_{2}$의 생성 억제효과가 나타났고, 간조직의 마이크로솜획분에서는 대조군 대비 20${\sim}$22%의 상당히 유의적인 H$_{2}$O$_{2}$의 생성 억제효과가 나타났다. 목초액 PL-25 및 PL-50 투여군의 간조직의 Mn-SOD 활성은 대조군 대비 15${\sim}$25%나 유의적인 활성 증가효과가 인정되었고, 간조직의 Cu/Zn-SOD 활성은 대조군 대비 11${\sim}$16%의 유의적인 SOD활성 증가효과가 인정되었다. 목초액 PL-25 및 PL-50 투여군의 간조직의 미토콘드리아획분의 GPx 활성은 대조군 대비 10${\sim}$17%의 GPx 활성 증가효과가 인정되었고, 간조직의 마이크로솜획분의 GPx 활성 증가효과가 인정되었다. 목초액 PL-25 및 PL-50 투여군의 간조직의 미트콘드리아획분의 CAT 활성은 대조군 대비 12${\sim}$14%의 유의적인 CAT 활성 증가효과가 나타났고, 간조직의 시토졸 1획분에서는 대조군 대비 15${\sim}$27%의 CAT 활성 증가효과가 인정되었다. 이상의 결과에서 목초액의 장기간 투여는 간조직 중의 활성산소의 억제효과뿐만 아니라 방어시스템으로서 활성산소 제거효소의 역할도 충실히 수행하여 노화를 효과적으로 예방하고 억제할 수 있을 것으로 기대된다.
The present experiment was performed to investigate the acute effects of cadmium on ultrastructural and biochemical changes in mouse kidney and compare these changes with liver damage. Mouse were injected with cadmium chloride at a dose of 5 mg/kg body weight. After treatment, mouse were sacrificed at time intervals of 6, 12, 24 and 48 hours. It was observed that ultrastructural changes in mouse kidney were composed of swelling of mitochondria, dilation in endoplasmic reticulum, wrinkling at basal infolded membrane, formation of autophagosome and partial loss of microvilli in brush. border, and that ultrastructural changes in liver were mitochondrial change, dilation and deterioration of rough endoplasmic reticulum and proliferation of smooth endoplasmic reticulum. Biochemical effects of cadmium were more severe on liver than kidney. Therefore, acutely injected cadmium caused not only liver damage, but also kidney damage.
SD계 흰쥐를 사용하여 평균적으로 하루에 솔잎 추출물의 BuOH 획분을 25, 50, 100mg/kg BW가 섭취하도록 사료에 첨가하여 45일 동안 투여하였다. BuOH-25 투여그룹을 제외한 BuOH-5- 및 BuOH-100 투여그룹의 mitochondria 및 microsomes은 대조그룹 대비 11.6%, 20.1% 및 10.5%, 13.5%의 매우 유의적인 간장 내 콜레스테롤 침착 억제효과가 인정되었다. BuOH-25, BuOH-50, BuOH-100 투여그룹의 mitochondria에서는 대조그룹 대비 2.9%, 13.3%, 18.5%의 .OH 라디칼 억제효과로서 BuOH-5- 및 Bu-OH-100 투여그룹에서 높은 유의성이 인정되었으며, microsome에서는 대조그룹 대비 15.7%, 20.0%, 20.6%의 매우 효과적인 .OH 라디칼의 생성 억제효과가 인정되었다. 또한 BuOH-25, BuOH-50, BuOH-100 투여그룹의 간장 cytosol 획분에서는 대조그룹 대비 5.2%, 8.0%, 11.1%의 $O_2$라디칼의 생성 억제효과로서 BuOH-50 및 BuOH-100 투여 그룹에서 유의성이 인정되었다. 간장 mitochondria 획분에서 BuOH-25, BuOH-50, BuOH-100 투여그룹의 Cu/Zn-SOD 활성은 대조그룹 대비 각각 4.6%, 10.3%, 15.9%의 Cu/Zn-SOD 활성 증가효과로서 BuOH-50 및 BuOH-100 투여그룹에서 유의성이 인정되었지만, Mn-SOD 활성은 세가지 BuOH 투여그룹의 유의성은 나타나지 않았다. BuOH-25, BuOH-50, BuOH-100 투여그룹의 간장 cytosol 획분에서는 대조그룹 대비 각각 9.0%, 19.4%, 25.6%의 매우 유의적인 GPx 활성 증가효과가 인정되었다. 따라서 솔잎의 BuOH 획분은 조직의 콜레스테롤의 침착을 효과적으로 억제효과할 뿐만 아니라 활성산소의 생성을 유의적으로 억제하고 제거 효소의 활성을 증가시킴으로써 노화과정을 효과적으로 억제할 수 있을 것으로 기대된다.
In order to prepare an experimental model on the basis of morphological changes of liver, 90 rabbits were allocated into four groups and 5, 15, 30 and 50% of ethanol (5ml/day) were dosed to each group for 5, 10, 20, 30, 60 and 90 days, and observed the livers with light and electron microscope. The results obtained are summarized as follows: 1. Light microscopically, the hydropic changes were found in the liver from 10th day after 5% and 15% ethanol ingestion, and these findings were remarkable as time goes by. Necrosis of hepatocytes, however, was most remarkable on 60th and 90th day after ingestion. The proliferation of interlobular connective tissue was found from 30th day in this group. 2. The hydropic necrosis of liver cells was found from 5th day in 30% and 50% ethanol dosing groups. The proliferation of interlobular connective tissues and infiltration of the lymphocytes were observed from 30th day in 30% ethanol ingestion group, however, it was found from 20th day in 50% ethanol ingestion group. 3. Electron microscopically, the appearance of various lipid droplets and dilated rER, slightly increased sER and glycogen field, dense mitochondria with scanty cristae and hydropic change were observed on 5th day after 5% ethanol ingestion. These findings were more remarkable on 30th and 90th day. Especially, disorganized outer and inner membrane of mitochondria and autophagic vacuoles were appeared on 90th day. The similar findings were also found in 15%, 30% and 50% ethanol ingestion groups, however, the appearance of fibrillar and myelin-like structures were observed from 30th day after 15% ethanol ingestion. The severe hydropic change and increased sER were observed on 90th day after 15% ethanol ingestion. From 5th day after 30% and 50% ethanol ingestion these findings were more remarkable.
成體 albino 흰쥐를 實驗群과 對照群으로 나누어 對照群에는 0.9% 生理食鹽水를, 實驗群에는 methylene blue(38mg/kg, pH 7.4)를 各各 腹腔에 注射한 後 約 30 分後에 總線量 360 rads의 $^{60}Co-\gamma$ 線을 一時全身照射하였다. 照射後 64時間區 와 212時間區로 나누어서 肝 및 心臟組織을 觀察하였다. 照射直後 肝 및 心臟組織을 6% glutaraldehyde (pH 7.4)와 1% osmium tetroxide (pH 7.4)로 冷室에서 二重固定하였으며 脫水한 後 Epon 812로 胞埋하여 MT-2 Porter Blum ultramicrotome 으로 超薄切斷하여 切片을 만들었다. 이를 uranyl acetate 와 lead citrate 로 二重染色한후 Hi9tachi HU-11 E型 電子顯微鏡으로 觀察하였다. 64時間區의 methylene blue 處理群과 對照群에서 肝組織은 顯著한 組織學的 變化의 差를 나타냈다. 다시 말하면 methylene blue 處理群에 比하여 對照群에서는 mitochondria 의 膨大, cristae 의 切斷, endoplasmic reticulum 의 破壞를 觀察할 수 있었으며 또한 endoplasmic reticulum 에 glycogen 粒子의 蓄積을 觀察할수 있었다. 한편 methylene blue 處理群에 比하여 對照群의 212時間區에서도 같은 變化樣相을 나타냈으나 endoplasmic reticulum 에 많은 vacuole 이 形成되었음을 觀察할 수가 있었다. 그러나 methylene blue 處理群은 正當群($\gamma$ 線의 照射와 methylene blue를 處理하지 않음)에 比하여 若干의 差가 觀察되었을 뿐 顯著한 組織學的變化는 나타나지 않았다. 心臟組織에서는 兩群 卽 實驗群과 正當群사이에 顯著한 差는 別로 觀察할 수 없었으나 methylene blue 群에 比하여 對照群에 若干의 變化가 觀察되었다. 다시말하면 methylene blue 處理群에 比하여 64時間區의 對照群에서는 mitochondria의 若干의 膨大, cristae 에 若干의 切斷을 觀察할수 있었고 212時間區의 對照群에서는 sarcoplasmic reticulum에서 若干의 液胞와 glycogen 粒子의 若干의 增加를 觀察할수 있었다. 이로 미루어 보아 methylene blue 가 放射線에 對하여 防禦 果가 있는 것으로 思料된다.
생쥐 간세포(肝細胞)의 미세구조(微細構造)에 미치는 메틸수은(水銀)의 독성적(毒性的) 영향(影響)과 이에 대한 홍삼(紅蔘) 추출물(抽出物)의 해독효과를 전자현미경적(電子顯微鏡的)으로 연구하였다. 대조군(對照群)의 간세포(肝細胞)에 비하여 메틸수은(水銀)만을 투여(投與)한 군(群)에서는 핵(核)의 일부가 붕괴(崩壞)되고, mitochondria의 팽대(膨大), cristae의 수축(收縮) 내지 손실(損失) 및 다수의 대형 강포(腔胞)의 출현(出現)이 일어나고 glycogen의 양(量)이 감소되었다. 메틸수은(水銀)과 홍삼(紅蔘) 추출물(抽出物)을 병행(倂行) 투여(投與)한 군(群)에서는 메틸수은(水銀)만을 투여(投與)한 군(群)에서보다 mitochondria의 팽대(膨大) 정도(程度)가 적고 강포(腔胞)의 크기와 수가 감소되었으며 정상(正常) 세포(細胞)와 비슷한 상태로 나타났다.
The objective of the present study was to investigate the cytotoxicity of adriamycin in liver cells (group A), and the protective effect of squalene to the hepatocytes to which adriamycin-induced cytotcxicity (group B) was examined by transmission electron micro-scope. In the group A, The cisternae of rough endoplasmic reitculum and smooth endoplasmic reticulum are dilated/disoriented at 24 hours and 48 hours. The inner and outer membrane of mitochondria are detached or destructed , and attached ribosomes of rough endoplasmic reticulum are diminished in number. The cisternae of the smooth endoplasmic reticulum are dilated, and the cristae of mitochondria are disrupted at 72 hours and 96 hours. In the group B, the cisternae of the rough endoplasmic reticulum and smooth endoplasmic resticulum are dilated at 24 hours. The cisternae of the smooth endoplasmic reticulum are dilated at 48 hours. The cell organelles of hepatocytes are recovered from cytotoxicity at 72 hours. These results suggest that 50 is not only concerned with composition of the membrane system of the cell organelles but also decreased the cytotoxicity of the hepatocytes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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