Acetoin and ammonia, the precursors of tetramethylpyrazine (TMP) having "meaty" or "roasted" flavors, were produced by the culture of Lactococcus lactis ssp. lactis biovar. diacetilactis FC1 in free and immobilized cell systems. Cells were immobilized using k-carrageenan and then were incubated at $34^{\circ}C$. The TMP productivity (0.34 g/l) and the conversion ratio (9.3%) of acetoin to TMP of the immobilized cell system were higher than those (0.24 g/l, 7.0%) of the free cell system. When the beads were activated for 12 h, the productivity of acetoin and TMP increased slightly.
Acetoin and ammonia, the precursors of tetramethylpyrazine (TMP) having "nutty " or "roasted" flavors, were produced by cultivating Lactococcus lactis ssp. lactis biovar. diacetilactis FC1. The effects of the volume concentration ratio (VCR) of cell-free medium on the formation of TMP were investigated using a rotary evaporator at $70^{\circ}C than at 80^{\circ}C$. As the VCR increased, the formation of TMP and the conversion ratio of acetoin to TMP increased. More TMP were formed at $70^{\circ}C than at 80^{\circ}C$. As the VCR increased, the concentration of acetoin decreased implying the formation of TMP from acetoin and ammonia.
The structural $\beta$-galactosidase gene (lacZ) from Lactococcus lactis ssp. lactis 7962 was cloned into plamid vector pKF18, which was designated as pKF-gal. Expression of the lacZ from L. lactis 7962 was found to be higher when cells were grown at 3$0^{\circ}C$ than 37$^{\circ}C$. Maximum $\beta$-galactosidase activity was obtained when E. coli/pKF-gal was cultivated for 6hr at 3$0^{\circ}C$ and for 3hr at 37$^{\circ}C$, and L. lactis 7962 was grown for 8hr at 3$0^{\circ}C$. Enzyme induction was achieved by the addition of lactose, galactose, or lactose+IPTG to growing culture. The addition of glucose had no effect on enzyme induction.
Bacteriocin J105 is a proteinaceous inhibitory substance produced by Latococcus latis subsp. lactis j105 isolated from Kimchi. Bacteriocin J105 was purified to homogeneity by the pH-dependent adsorption-desorption method and reverse-phase HPLC from the culture broth of Lactococcus lactis subsp. lactis J105. Purification of bacteriocin J105 resulted in a 1.47-fold increase in the specific activity and the recovery was 1.5%. Its molecular mass measured by the electrophoretic pattern in the sodium, dodecyl sulfate polyacrylamide gel was about 3.4 kDa. It was stable at $121^{\circ}C$ for 15 min at pH between 2 and 4. However, at pH above 5, bacteriocin was rapidly inactivated. Twenty-one residues from the N-terminal portion of bacteriocin J105 were sequenced using sequence analysis of lantibiotics. Bacteriocin J105 showed significant homology with known nisin A from lactic acid bacteria.
To produce acetoin as a precursor of the tetramethylpyrazine flavor compound from citrate by Lactococcus lactis ssp. lactis biovar. diacetilactis FC1, fermentation factors such as inital pH of culture media, temperature, concentration of Na-citrate, thiamin-HC1 and sugars were examined. The best acetoin production was achieved with initial pH in the culture media of 5.5, fermentation temperature of $34^{\circ}C$, Na-citrate concentration of 3%, addition of thiamin-HC1 at 2 mg/l and galactose as a carbon source. When fermentation was carried out under the optimum conditions, the exhaustion of Na-citrate and the production of acetoin took simultaneously and acetoin reached the maximum content, 80 mmole/l after 20 hours.
The anticancer and anti-inflammatory activities of probiotic Lactococcus lactis NK34 were demonstrated. Treatment of cancer cells such as SK-MES-1, DLD-1, HT-29, LoVo, AGS, and MCF-7 cells with 106 CFU/well of L. lactis NK34 resulted in strong inhibition of proliferation (>77% cytotoxicity, p < 0.05). The anti-inflammatory activity of L. lactis NK34 was also demonstrated in lipopolysaccharide-induced RAW 264.7 cells, where the production of nitric oxide and proinflammatory cytokines (tumor necrosis factor-α, interleukin-18, and cyclooxygenase-2) was reduced. These results suggest that L. lactis NK34 could be used as a probiotic microorganism to inhibit the proliferation of cancer cells and production of proinflammatory cytokines.
To investigate the optimum conditions for the production of ammonia as a precursor of tetramethylpyrazine flavor compound from arginine by Lactococcus lactis ssp. lactis biovar. diacetilactis FC1, fermentation factors such as initial pH of culture media, fermentation temperature, concentration of arginine-HC1, and sugars were examined. The optimum conditions were initial pH 5.5 of the culture media, fermentation temperature of $34^{\circ}C$, 6% (w/v) of arginine-HC1, and 1% (w/v) of galactose as a carbon source. Under the optimum fermentation conditions, 40 mmole/l of ammonia was produced after 40 h.
Kim, Hyeri;Guevarra, Robin B.;Cho, Jae Hyoung;Kim, Hyeun Bum;Lee, Ju-Hoon
Journal of Animal Science and Technology
/
v.63
no.1
/
pp.191-193
/
2021
Lactococcus lactis is a fermentative lactic acid bacterium that is used extensively in food fermentations. The L. lactis strain K_LL005 was isolated from the grasshopper (Oxya chinensis sinuosa) gut in Korea. In this study, we reported the complete genome sequence of Lactococcus lactis K_LL005. The final complete genome assembly consist of one circular chromosome (2,375,093 bp) with an overall guanine + cytosine (G + C) content of 35.0%. Annotation results revealed 2,281 protein-coding sequences (CDSs), 19 rRNAs, and 68 tRNA genes. Lactococcus lactis K_LL005 has a gene encoding xylose metabolism such as xylR, xylA, and xylB (xylRAB).
In order to develop an oral vaccine to prevent H. pylori infection, we have expressed the hpaA gene of H. pylori K51 isolated from Korean patients, encoding 29-kDa HpaA that is known to be localized on the cell surface and flagella sheath, in a live delivery vector system, Lactococcus lactis. The hpaA gene, amplified by PCR using the genomic DNA of H. pylori K51, was cloned in the pGEX-2T vector, and the DNA sequence analysis revealed that the hpaA gene of H. pylori K51 had 99.7% and 94.8% identity with individual hpaA genes of the H. pylori 26695 strain (U.K) and the J99 strain (U.S.A). A polyclonal anti-HpaA antibody was raised in rats using GST-HpaA fusion protein as the antigen. The hpaA gene was inserted in an E. coli-L. lactis-shuttle vector (pMG36e) to express in L. lactis. Western blot analysis showed that the expression level of HpaA in the L. lactis transformant remained constant from the exponential phase to the stationary phase, without extracelluar secretion. These results indicate that the HpaA of H. pylori K51 was successfully expressed in L. lactis, and suggest that the recombinant L. lactis expressing HpaA may be applicable as an oral vaccine to induce a protective immune response against H. pylori.
Glucansucrase is an enzyme classified as a glycoside hydrolase (GH) 70 family, which catalyzes the synthesis of glucooligosaccharides with a low molecular weight using sucrose as a donor of D-glucopyranose and maltose as a carbohydrate acceptor. In this study, glucansucrase-producing lactic acid bacteria strain was isolated from the fermented foods collected in traditional markets, and the optimum conditions for the oligosaccharide production were investigated. The strain CCK940 isolated from Chinese cabbage kimchi was selected as an oligosaccharide-producing strain due to its high glucansucrase activity, with 918.2 mU/mL, and identified as Leuconostoc lactis. The optimum conditions for the production of oligosaccharides using Leu. lactis CCK940 were to adjust the initial pH to 6.0, add 5% (w/v) sucrose and 10% (w/v) maltose as a donor and acceptor molecules, respectively, and feed 5% (w/v) sucrose at 4 and 8 h of cultivation. When Leu. lactis CCK940 was cultured for 12 h at optimum conditions, at least four oligosaccharides with a polymerization degree of 2-4 were produced.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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