• 미생물학회지
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• 제50권1호
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• pp.73-83
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• 2014

단백질이 풍부한 식품을 고온 하에서 조리하는 과정 중에 주로 발생되는 돌연변이원 heterocyclic amines (HCAs)에 대한 유산균의 결합력 및 제거능을 조사하였다. 당 발효능 및 16S rRNA 염기서열 분석을 통해 동정된 19종의 유산균 중 Lactobacillus acidophilus D11, Enterococcus faecium D12, Pediococcus acidilactici D19, L. acidophilus D38, Lactobacillus sakei D44, Enterococcus faecalis D66 및 Lactobacillus plantarum D70의 세포이나 배양 상등액은 3-amino-1,4-dimethyl-5H-pyrido[4,3-b]indole (Trp-P-1)과 3-amino-1-methyl-5Hpyrido[4,3-b] indole (Trp-P-2)에 의한 Salmonella typhimurium TA98 및 TA100의 돌연변이 유발을 억제할 수 있었다. HCAs에 대한 유산균 세포의 결합력은 cell wall, exopolysaccharide 및 peptidoglycan 보다 높게 나타났다. 한편, 이들의 결합력은 단백질 분해효소, 가열, sodium metaperiodate 및 산 처리에 의해 유의하게 감소되었으므로 세포벽에 존재하는 당이나 단백질 성분이 이들 HCAs을 결합시키는데 중요한 역할을 하는 것으로 확인되었다. 또한 E. faecium D12, L. acidophilus D38 및 E. faecalis D66의 결합력은 SDS나 금속이온에 의해 감소되었으므로 이들세포와 돌연변이원 사이에는 이온 결합이나 소수성 결합이 작용하는 것으로 추정되었다. 한편, HCAs 결합력이 높은 L. acidophilus D38과 L. plantarum D70은 장관 상피세포에 대한 부착력이 낮으므로 돌연변이원을 세포에 결합시켜 체외로 배출함으로써 독성물질을 제거하는데 효과적인 것으로 확인되었다.

• 방사선산업학회지
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• 제4권1호
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• pp.65-71
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• 2010

Two chitinase producing strains CHI2 and CHI4 were isolated from soybean rhizosphere soil. Both the strains belonged to Lysobacter enzymogenes as indicated by 16S rDNA sequence analysis. Though strain CHI2 and CHI4 produced extracellular chitinase, they differ in their chitinolytic activity. CHI4 produced approximately three times the higher amounts of enzyme than that of CHI2 under specified conditions. CHI2 produced $535.67U\;l^{-1}$ of chitinase after 48 h incubation with a specific activity of $3.91U\;mg^{-1}$ of protein while strain CHI4 produced $1584.13U\;l^{-1}$ of chitinase with a specific activity of $10.88U\;mg^{-1}$ protein. SDS-PAGE analysis indicated that the molecular weight of chitinase enzyme was approximately 45 kDa. A faint band with a molecular weight of 55 kDa reveals the possibility for the presence of another kind of chitin binding protein. Mutant library was developed by exposing the isolates to gamma rays at their $LD_{99}$ value (0.23 kGy). Totally, 11 mutants of CHI2 and CHI4 are reported to have enhanced chitinase activity. Several leaky mutant clones with decreased enzyme activity and a defective mutant (CHI2-M16) with complete loss of chitinase activity were also identified. CHI4-M18, CHI4-M8 and CHI4-M29 showed 78.8, 41.5, and 31.9% increased chitinase activity over wild type CHI4.

• 한국식품과학회지
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• 제31권4호
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• pp.957-963
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• 1999

두부의 냉동저장중에 일어나는 단백질 변성과 이로 인하여 일어나는 조직감 열화현상을 완화하기 위하여 항냉동제 첨가 두부의 제조 공정을 개발하고 항냉동제 최적 배합비율과 첨가량을 조사하였다. 여러 가지 항냉동제를 첨가하여 비압착 두부를 제조하여 냉동저장한 후 다시 해동한 냉동저장 두부의 조직감 변화를 반응표면분석법(RSM)으로 분석하고 관능검사 결과와 비교하였다. 냉동으로 인한 두부의 조직감 변화를 최소화하는데는 glucose, glycerol, sorbitol, sodium tripolyphosphate가 단일 항냉동제로서 효과가 있었으며, glycerol과 sodium tripolyphosphate 사이에서는 상호작용도 있는 것으로 나타났다. 결론적으로 냉동두부에 항냉동제를 단독으로 첨가하는 것보다는 여러 가지를 혼합하여 첨가하는 것이 두부조직의 열화방지에 더 효과적인 것으로 나타났다. 조직감 변화만을 고려한 절단시험의 RSM을 통하여 계산된 냉동두부의 항냉동제 최적 첨가량은 glucose 2.1%, glycerol 6.9%. sorbitol 2.1%, propylene glycol 0.4%, sodium tripolyphosphate 0.3% 이었으며, 조직감과 함께 맛과 향까지 고려한 전체 기호도 조사에 의한 항냉동제 최적 첨가량은 glucose 1%, glycerol 2%, sor-bitol 1%, propylene glycol 0.2%, sodium tripolyphosphate 0.5% 이었다.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제7권1호
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• pp.28-32
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• 2002

A Micrococcus sp. producing catalase was isolated from soil, and a commercial-scathe cultivation and purification of catalase were conducted. The maximum catalase activity was about 103 BU/mL obtained after 46 hr of cultivation in a 30 L fermenter containing 2% glucose, 2% peptone, 4% yeast extract, and 0.5% NaCl. Soybean sauce, CSL (corn steep liquor), and yeast extract were also studied as media substitutes in the media 30 L fermenter. The optimum medium components for the production catalase were found to be 2% glucose, 4% soybean sauce, and 16% CSL. In a 18 kL fermenter, the stationary phase in the cell growth and maximum catalase activity (112 BU/mL) were reached after 46 hr of cultivation, which was the same result as in the 30 L fermenter. The catalase activity was purified with over 17 folds in four steps with a 33.6% yield. From 104,250 mg of protein after cell lysis, 1,966 mg of the purified enzyme with a specific activity of 192.7 kBU/mg was obtained. The residual activity with the addition of 10% NaCl exhibited more than 100%. The use of just NaCl produced a higher residual activity than combination of bencol (benzyldimethyl ammoniumchloride) and PG (propyleneglycol).

• 한국축산식품학회지
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• 제29권4호
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• pp.475-481
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• 2009

본 연구는 밀 식이섬유(Wheat fiber)와 분리대두단백(Isolated soybean protein)을 첨가한 프랑크푸르터의 이화학적 및 관능적 특성에 미치는 영향을 조사하였다. 밀 식이섬유와 분리대두단백의 첨가는 pH의 변화에 영향을 주지 않았으며, 최종제품에 있어 명도의 증가를 가져왔다. 2% 밀 식이섬유 처리구는 다른 처리구들과 유의적 차이가 없었으나 대조구에 비해 가열감량의 감소와 유화안정성의 향상을 보였으며, 특히 경도, 응집성 및 검성에서 유의적인 향상을 나타냈다. 관능적 특성에서 2% 밀 식이섬유를 첨가한 처리구는 대조구에 비하여 풍미, 다즙성, 전체적인 기호도의 향상을 보였다(p<0.05). 본 연구결과, 밀식이섬유는 분리대두단백과 비교하여 유사하거나 우수한 이화학적 및 관능적 특성을 보였으며, 따라서 밀 식이섬유는 분리대두단백의 대체재로서 활용성이 높다고 사료된다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제20권1호
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• pp.26-32
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• 1977

대두(大豆)(Glycine max cultivar Gwang-gyo)의 각 성숙시기(成熟時期)에 나타나는 7S globulin을 분리하여 Davis 방법(方法)에 의한 전기영동과 PAWU용매에 의해서 유리(遊離)되는 그들의 subunit를 전기영동한 결과 7S globulin중의 복합단백질간(複合蛋白質間)에는 그 구성(構成) subunit에 유사성(類似性)이 있음을 시사하였다. 7S globulin의 복합단백질(複合蛋白質)을 DEAE-Sephadex A-50으로 크로마토그라피하여 분리하였다. 이때 pH 7.6의 인산완충액(燐酸緩衝液)에서 NaCl의 농도구배(濃度句配)가 0.28M부터 0.40M 사이에서 두 개의 분획(分劃)으로 분리되었다. 이들 명(名) 단백질(蛋白質)의 subunit를 5M urea와 1% SDS로 유리(遊離)시켜 7.5% acrylamide-PAWU gel과 5.6% acrylamide-SDS gel에서 전기영동하였다. 그 결과 subunit의 하전량(荷電量)에 의해서 분리되는 PAWU gel전기영동에서 7S globulin이 5개의 주 분리대로 분리되고 그중 2개의 분리대가 7S-A globulin과 7S-B globulin에 공유(共有)되어 있었다. 또 subunit의 분자량(分子量)에 따라서 분리되는 SDS gel 전기영동에서는 7S globulin이 7개의 주 분리대를 나타내는데 그 중에서 3개의 분리대가 7S-A와 7S-B 분획에 공유(共有)되어 있었다. 따라서 7S globulin의 복합단백질간(複合蛋白質間)에는 구성(構成) subunit간(間)에 유사성(類似性)이 있는 것으로 나타났다.

• 한국식품영양과학회:학술대회논문집
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• 한국식품영양과학회 2001년도 International Symposium on Food,Nutrition and Health for 21st Century
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• pp.69-73
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• 2001

Two opioid peptides, YPLDL and YPLDLF, were isolated from enzymatic digests of spinach ribulose-1, 5-bisphosphate carboxylase/oxygenase (RuBisCO) and named rubiscolin-5 and -6, respectively. These peptides were selective for delta-receptor and the latter was about 3 times more potent than the former. After oral administration in mice at the dose of 100 mg/kg, rubiscolin-6 showed analgesic activity in tail pinch test. It also stimutated learning performance at the same dose in passive avoidance experiment using step-through apparatus. An immunostimulating peptide, MITLAIPVNKPGR, was isolated from a trypsin digest of soybean protein and named soymetide. Immunostimulating activy of soymetide was mediated by fMLP receptor. Interestingly, after oral administration in rats at a dose of 300 mg/kg (po.), soymetide-4 (MITL) protected alopecia (hair-loss) induced by etoposide, a cancer chemotherapy agent. Stimulation of IL-1 release by the peptide was involved in the mechanism. Ovokinin(2-7), RADHPF, is a vasorelaxing peptide released from ovalbumin by the action of chymotrypsin. It lowered blood pressure of spontaneously hypersensive rats (SHR) after oral administration at a dose of 10 mg/kg. RPLKPW, which was designed by replacing 4 amino acid residues in ovokinin(2-7), exhibited hypotensive activity at a dose of 0.1 mg/kg (po.). This peptides was introduced into 3 homologous sites in soybean beta-conglycinin alpha' subunit by site-directed mutagenesis of the cDNA and expressed in E. coli. The minimum effective dose for hypotensive activity of the genetically modified beta-conglycinin alpha' subunit was 10 mg/kg (po.), which is about 1/200 that of ovalbumin.

• 한국토양비료학회지
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• 제20권3호
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• pp.275-283
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• 1987

전보(前報)에 이어 토양(土壤)의 특성(特性)이 상이(相異)한 대두재배지(大豆栽培地)로 부터 토착대두근류균(土着大豆根瘤菌)을 분리(分離)하여 유리(遊離) 상태(狀態)에서 질소환원작용(窒素還元作用)과 균체단백질(菌體蛋白質)의 전기영동(電氣泳動) pattern 상의 차이(差異)를 1차원(次元) 및 2차원(次元) 전기영동상(電氣泳動像)으로 분석(分析)한 결과(結果)는 다음과 같다. 1. 토착대두류균(土着大豆瘤菌)의 생육형(生育型) 및 이화적(異化的) 질산환원작용(窒酸還元作用)을 조사(調査)한 결과(結果) 4개군(個群)으로 구분(區分)되었다. 즉(卽) 총(總) 87개(個) 검정균주(檢定菌株)중 fast-grower는 38.7%, slow-grower는 61.3%로서 fast grower 보다 많았다. 2. 이들 각(各) 생육형간(生育型間)에는 탈질형(脫窒型)과 비탈질형(非脫窒型)(질산호흡형(窒酸呼吸型))으로 구분(區分)되었으나, 질산환원효소결여형(窒酸還元酵素缺如型)은 나타나지 않았다. fast-grower와 slow-grower 간(間)에 탈질형(脫窒型)은 전자(前者) 31%, 후자(後者)에서 89%, 그리고 비탈질형(非脫窒型)은 전자(前者) 69%, 후자(後者)에서 11%로 나타났다. 3. 토착대두근류균(土着大豆根瘤菌)의 균체단백질(菌體蛋白質)의 특성(特性)은 1차원(次元) 및 2차원(次元) 전기영동상(電氣泳動像)에서 fast-grower와 slow-grower의 양생육형간(兩生育型間)에는 차이(差異)를 볼수 있었으나, 탈질형(脫窒型)과 비탈질형간(非脫窒型間)에는 현저(顯著)한 차이(差異)를 나타내지 않았다.

• 한국생명과학회:학술대회논문집
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• 한국생명과학회 2001년도 제32회 학술심포지움
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• pp.67-86
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• 2001

A strain producing strongly fibrinolytic enzyme was isolated from soil and was identified to be Bacillus subtilis by biochemical and physiological characterization. The optimal culture conditions for the production of fibrinolytic enzyme was determined to be 1.0% tryptone, 1.5% soluble starch, 0.5% Peptone, 0.5% NaCl, $(NH_{4})_{3}PO_4.3H_{2}O, and MgSO_{4}.7H_{2}O.$ Initial pH and temperature were pH 8.0 and $30^{\circ}C$ , respectively, The highest enzyme production was observed at 30 hours of cultivation at $30^{\circ}C$ The fibrinolytic enzyme was purified to homogeneity by DEAE Sephadex A-50 ion exchange column chromatography, 70% ammonium sulfate precipitation, Sephadex G-200 and G-75 gel filtration column chromatography. The molecular weight of the purified enzyme was 28,000 as determined by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. A gene encoding the fibrinolytic enzyme was cloned into a plasmid vector pBluescript, transforming E.coli XL-1 Blue. The clone was able to degrade fibrin, This indicated that the gene could encode a fibrinolytic enzyme. The nucleotide sequence of the 2.7 kb insert was determined in both direction. One open reading frame composed of 1023 nucleotides was found to be a potential protein coding region. There was the putative Shine-Dalgano sequence and TATA box upstream of the open reading frame. The homology search data in the genome database showed that both the 2.7 kb insert and 1 kb open reading frame carried no significance in the nucleotide sequence of known fibrinolytic enzyme from Bacillus serovars. The recombinant cell harboring the novel gene involved in fibrinolysis was subjected to protein purification. The molecular mass of the purified fibrinolytic enzyme was determined to be 31864 Dalton, which was highly in accordance with the molecular mass(33 kDa) of the fibrinolytic gene deduced from the insert. The fibrinolytic enzyme was Purified 50.5 folds to homogeneity in overall yield of 10.7% by DEAE Sephadex A-50 ion exchange, 85% ammonium sulfate precipitation, Sephadex G-50, Superdex 75 HR FPLC gel filtration. In conclusion, a novel fibrinolytic gene from Bacillus subtilis was identified and characterized by cloning a genomic library of Bacillus subtilis into pBleuscript. For the soybean fermented by this strain, it is found that there increased assistant protein about 20% compared to the soybean not fermented and increased about 30% according to amino acid analysis and, in particular, essential amino acid increased about 40%. When keeping this fermented soybean powder at room temperature for about 70days, it showed very high stability maintaining almost perfect activity and, therefore, it gave us great suggestion its possibility of development as a new functional food.

• Applied Biological Chemistry
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• 제22권1호
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• pp.1-9
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• 1979

대두(大豆)의 ${\gamma}-conglycinin$을 정제(精製)하고 그의 물리일(物理一) 화학적(化學的) 성질(性質)을 연구(硏究)하여 다음의 결과(結果)를 얻었다. Gamma-conglycinin은 대두(大豆)의 pH 4.5, 0.2M Nacl 추출액을 Sephadex G-150으로 분리하여 얻은 7S globulin을 DEAE-Sephadex A-50으로 column chromatography하여 정제(精製)하였다. 정제된 ${\gamma}-conglycinin$은 면역전기영동(免疫電氣泳動), polyacrylamide gel 전기영동(電氣泳動)과 gel isoelectric focusing 상으로 순수(純粹)하였다. 등전점(等電點)은 pH 5.4이었으며 질소(窒素) 16.21%, mannose 4.18, glucosamine 1.21%의 함량(含量)이었다. 아미노산 조성(組成)은 일반적(一般的)으로 lysine, dicarboxylic acid와 암모니아태(態) 질소(窒素)의 함량(含量)이 높았고 함황(含黃)아미노산과 tryptophane의 함량(含量)은 낮은 편이었다. Subunit의 등전점(等電點)은 pH $4.5{\sim}5.5$에 분희(分希)하였는데 그중 pH $4.6{\sim}5.0$에 위치(位置)한 것은 분자량(分子量) 38,000의 당(糖) peptide이었으며 pH $5.0{\sim}5.5$의 것은 분자량(分子量) 32,000의 단순(單純) peptide이었다.