한국, 중국, 러시아에서 자생하고 있는 가시오갈피에 대한 유전적 유연관계를 파악하기 위해 ITS (internal transcribed spacer)의 염기서열을 분석하였다. Universal primer를 사용하여 PCR로 증폭시킨 후 염기서열을 결정한 결과 ITS의 길이는 162 bp의 5.8S rRNA 유전자를 포함하여 한국산과 중국산은 608 bp 그리고 러시아산은 611 bp로 나타났다. ITS영역의 G+C 함량은 한국산과 중국산이 60.20%이고 러시아산이 60.06%였다. 한국산과 중국산의 ITS영역은 100% 동일하였으며, 러시아산은 한국산과 비교했을 때 3 bp의 염기삽입과 2 bp의 염기치환이 존재하여 99.2%의 상동성을 나타내었다. 따라서 한국산 가시오갈피는 러시아산보다 중국산과 유전적 유연관계가 더 가까운 것으로 추정된다. 또한 동일 속내에서는 오갈피나무보다는 음나무와 ITS 염기서열이 유사한 것으로 나타났다.
The medicinal herb Oldenlandia diffusa is known as a folk medicine for the treatment of hepatitis, sore throat, appendicitis, malignant tumors and urethral infection in Southern China and Korea. Another species O. corymbosa, is also used for the therapy of the similar conditions, however, only O. diffusa is referred to the medicinal herb by Chinese Pharmacopoeia. Due to their similar morphology, O. diffusa and O. corymbosa are often misidentified. To easily identify O. diffusa from O. corymbosa, the phylogenetic utility of nuclear ribosomal DNA (nrDNA) internal transcribed spacers (ITS) were investigated among different O. diffusa and O. corymbosa populations in Korea. The nrDNA ITS sequence of O. diffusa contained 791 bp, with GenBank accession number of JF837601-JF837602. The nrDNA ITS sequence of O. corymbosa was 785-786 bp, with GenBank accession number of JF837603-JF837611. The results showed that there are some certain divergences in the ITS region sequence between both species, even among different populations of the same species. Particularly, O. corymbosa ST-4 population showed the highest dissimilarity of the ITS region sequence with other nine populations of O. corymbosa and two populations of O. diffusa. This consequence makes us further understand the molecular diversification between O. corymbosa and O. diffusa, and help to promote the correct use and safety.
Lee, Seung-Yeol;Ten, Leonid N.;Back, Chang-Gi;Jung, Hee-Young
한국균학회지
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제49권3호
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pp.417-423
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2021
Apple decline symptoms were frequently observed on cv. Fuji apple orchards located in Gyeonggi, Gyeongbuk, and Gangwon provinces during surveys conducted from May until the end of September 2020. Three fungal strains were isolated from the margins of internal lesions of diseased apple trees, and their morphological characteristics were considered similar to Botryosphaeria sinensis. Phylogenetic analysis using internal transcribed spacer (ITS) regions, translation elongation factor 1-alpha (tef1), beta-tubulin (tub2), and the second largest subunit of RNA polymerase II (rpb2) gene sequences confirmed the closest relationship of isolates with B. sinensis at the species level. According to a pathogenicity test, the appearance of dark-brown discolorations and vascular necrosis on apple branches inoculated with the isolated strain KNUF-20-014 was observed. To the best of our knowledge, this is the first report of B. sinensis as the causal agent of apple disease in Korea.
PCR 기법을 응용한 RAPD 방법은 대상 생물의 유전정보를 전혀 모르는 상태에도 arbitrary primer를 이용하여 증폭함으로써 생물 종간의 유전적 표식자를 확인할 수 있는 간편하고 유익한 유전분석 방법이다. 이같은 RAPD 방법을 이용하여 해조류 방사무늬 김, 미역, 구멍갈파래에 대하여 DNA를 추출하지 않고 직접 생 엽체 및 생 사상체, 생 배우체를 PCR template로 사용하여 PCR product를 생산하였다. 그러나 specific primer를 이용한 nulear r DNA의 internal trancribed spacer (ITS) 부위는 생성물을 만들지 못하였다. 간편한 LiCl 방법에 의하여 추출된 DNA를 사용하였을 때는 IST 및 RAPD 모두 PCR product를 생산하였다. 방사무늬 김의 엽체 (haploid)와 사상체 (dip-loid)로 부터의 ITS 생성물은 동일하였으나 RAPD 생성물은 사용한 arbitrary primer에 따라 36-50$\%$의 다른 band가 만들어졌다. 또한 직접 생 조직을 사용하였을때와 추출 DNA를 사용하였을 때도 53-57$\%$의 다른 band가 만들어 줬다. 그러므로 RAPD 방법으로 유전분석 실험에는 동일한 ploidy의 조직을 template로서 사용하는 것이 중요하다.
Objectives : Due to the morphological similarity of the pericarp and description of multi-species in National Pharmacopoeia of Korea and China, the Zanthoxylum Pericarpium is difficult to authenticate adulterant in species levels. Therefore, we introduced the sequence analysis of DNA barcode and identification of single nucleotide polymorphism(SNP) to establish a reliable tool for the distinction of Zanthoxylum Pericarpium from its adulterants. Methods : To analyze DNA barcode region, genomic DNA was extracted from twenty-four specimens of authentic Zanthoxylum species and inauthentic adulterant and the individual internal transcribed spacer regions (rDNA-ITS and ITS2) of nuclear ribosomal RNA gene were amplified using ITS1, ITS2-S2F, and ITS4 primer. For identification of species-specific sequences, a comparative analysis was performed using entire DNA barcode sequences. Results : In comparison of four Zanthoxylum ITS2 sequences, we identified 16, 4, 6, and 4 distinct species-specific nucleotides enough to distinguish Z. schinifolium, Z. bungeanum, Z. piperitum, and Z. simulans, respectively. The sequence differences were available genetic marker to discriminate four species. Futhermore, phylogenetic relationship revealed a clear classification between different Zanthoxylum species showing 4 different clusters. These results indicated that comparative analysis of ITS2 DNA barcode was an useful genetic marker to authenticate Zanthoxylum Pericarpium in species levels. Conclusions : The marker nucleotides, enough to distinguish Z. schinifolium, Z. piperitum, Z. bungeanum, and Z. simulans, were obtained at 30 SNP marker nucleotides from ITS2 sequences. These differences could be used to authenticate official Zanthoxylum Pericarpium from its adulterants as well as discriminating each four species.
마가목 속(genus Sorbus)은 목본류로 아시아와 유럽에 분포되어 있다. 마가목 속 식물은 한국과 중국에서 약용으로 쓰인다. 한국내 마가목 속 식물에 대해 ITS에 의한 계통관계를 조사하였다 마가목 속 전체 종에서 5.8S exon은 165 핵산서열이었다. ITS1은 유럽마가목(S. aucuparia)에서 218 핵산서열인 반면 한국 내 마가목 종은 219 핵산서열이었다. ITS2 핵산서 열은 다양하였는데 S. sambucifolia var. pseudogricilisto에서 는 240 핵산서 열로 가장 적은 반면 S. aucuparia에서는 245 핵산서열이었다. ITS 전체 서열은 625개로 35개는 절약법에 정보적이었다. ITS 서 열로 한국내 분류군과 유럽종간 구분이 잘 되었다. RNA 2차 구조 추정 분석에서 도메인 I과 II는 마가목 속에 잘 보전되어 있는 반면 도메인 III에서는 많은 차이를 나타내었다. ITS 서열로 종 동정에 이용할 수 있었으며, 종의 보전이나 생식질 보전에 기초로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
Three Synechococcus strains were isolated from seawater near the Ieodo Ocean Research Station (IORS), and their 16S rDNA genes and the internal transcribed spacer (ITS) between the 16S and 23S rRNA genes were sequenced to investigate their phylogenetic relationships. Phylogenetic trees based on the 16S rDNA and ITS sequences showed that they clustered in the main MC-A Synechococcus group (subcluster 5.1), but formed branches differentiating them from the described clades. As the IORS is located in an area affected by diverse water masses, high Synechococcus diversity is expected in the area. Therefore, the IORS might be a good site to study the diversity, physiology, and distribution of the Synechococcus group.
In June 2013, we collected leaf spot disease samples of Datura metel from Gangneung, Gangwon Province, Korea. The symptoms observed were small circular to oval dark brown spots with irregular in shape or remained circular with concentric rings. We isolated the pathogen from infected leaves and cultured the fungus on potato dextrose agar. We examined the fungus morphologically and confirmed its pathogenicity according to Koch's postulates. The results of morphological examinations, pathogenicity tests, and the rDNA sequences of the internal transcribed spacer regions (ITS1 and ITS4), glycerol-3-phosphate dehydrogenase (G3PDH) and the RNA polymerase II second largest subunit (RPB2) gene sequence revealed that the causal agent was Alternaria tenuissima. To the best of our knowledge, this is the first report of leaf spot of D. metel caused by A. tenuissima in Korea as well as worldwide.
We compared patterns of intraspecific polymorphism of two markers with contrasting modes of evolution, nuclear ribosomal DNA (rDNA) and mitochondrial DNA (mtDNA), in the lung fluke, diploid and triploid Paragonimus westermani from three geographical regions of Korea. The genetic distances between three populations of Korean diploid and triploid P. westermani showed no significant difference in the nucleotide sequences of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (mtCOI) and ribosomaal second internal transcribed spacer (ITS2) genes. A highly resolved strict-consensus tree was obtained that illustrated phylogenetically useful information of the ITS2 and mtCOI sequences from diploid and triploid P. westermani.
Adhikari, Mahesh;Kim, Sang Woo;Gwon, Byeong Heon;Ju, Han Jun;Lee, Hyang Burm;Lee, Youn Su
한국균학회지
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제48권1호
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pp.47-53
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2020
During a survey of fungal diversity in different provinces of South Korea in 2017, a new fungal isolate was discovered. This fungal isolate was identified as Westerdykella reniformis, based on its morphological characteristics and phylogenetic analysis, using internal transcribed spacer (ITS) and 28S ribosomal DNA (28S rDNA) sequence data. To our knowledge, W. reniformis has not previously been reported in South Korea. Thus, in this study, we report a new record of a species from the Dothideomycetes class in Korea, and provide a detailed description with morphological illustrations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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