During the rapid phase of gonadal development of the freshwater teleost, the catfish (Silurus asotus), the influence of hCG upon the inducement of final oocyte maturation and spawning was investigated electrophoretically and ultrastructurally. The electrophoretic patterns obtained were different in the presence and absence of some of the major or minor zones, because of the hormone level in catfish. The vitellogenin of hormone-treated fish was stained more intensively than that of sham-treated fish. These proteins showed some minor or main bands of egg extracts which migrated at positions corresponding to molecular weights of approximately 90,000. However, the thickness of electrophoretic band in molecular weight for hCG-treated fish was slightly lower than that for saline control. It seemed the plasma protein with molecular weight of approximately 45,000 in hCG-treated fish disappeared. In contrast to the control fish, the ovaries in the catfish treated with hCG shows a marked ultrastructural change under the electron microscope. No dilated profiles were seen in the granulosa cells of the mature oocyte before ovulation. After germinal vesicle breakdown (GVBD), the zona radiata interna (ZRI) becomes more compact, and there is a loss of all the processes from the pore canals. There is a wide space between the vitelline membrane and zona radiata. Also, during final maturation, the microvillar processes from the oocyte are seen no longer to penetrate deeply into the extracellular spaces of the overlying granulosa cells, and the reticulate patterns of the zona radiata interna becomes occluded, giving the zona radiata a more solid appearance. It has been possible to initiate 100% oocyte maturation in yolk granules and follicles in vivo by treatment with hCG and a high water temperature ($27^{\circ}C$). In hCG-treated fish, the percentages of successful artificial fertilization and hatching were maximal at 15 h after a single injection. It seems clear that a long acting preparation containing hCG can be successfully used in prespawning fish to advance the final events of gonadal maturation and initiate spawning. Further studies are necessary to evaluate the potential of hCG to either stimulate or inhibit the reproductive development of fish at other stages of the seasonal reproductive cycle.
Moon, H.K.;Han, In K.;Gentry, J.L.;Parmentier, H.K.;Schrama, J.W.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제12권2호
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pp.174-179
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1999
The effect of a chronic inflammation (cell-mediated immune response) on energy metabolism and growth performance was assessed in weanling piglets. Twenty four barrows of 4 wk of age were assigned to one of two immunization treatments : Control group [CON: immunized with Incomplete Freund's Adjuvant (lFA)] or Immunization group [IMMU: immunized with Complete Freund's Adjuvant (CFA)]. On d0, piglets were weaned and subcutaneously immunized at the medial side of the femur with 2 ml of IFA or CFA, respectively. Energy and nitrogen balances were measured per group during 13-d balance period, and total $(HP_{tot})$, activity-related ($(HP_{act})$) and non-activity-related $(HP_{cor})$ heat production were determined every 9-min by indirect calorimetry. Ig total titers to Mycobacterium butyricum, which is present in CFA, were higher (p<0.01) in IMMU than in CON on d13 (2.5 vs 1.8) and d20 (2.9 vs 1.8) after immunization. There were no differences (p>0.10) between treatments in rectal temperature, performance, feed intake, and availability and partitioning of energy during the balance period. Average daily feed intake was numerically higher in IMMU than in CON (0.34 vs 0.32 kg/d), but there was no difference (p>0.10) in metabolizability of the dietary energy between treatments. $HP_{act}/HP_{tot}$ was 16.24 and 16.89%, and retained energy was 251 and 268 $268\;kJ{\cdot}kg^{0.75}{\cdot}d^{-1}$ for CON and IMMU, respectively. Numerically, maintenance requirement of IMMU was even lower than that of CON $(419\;vs\;427\;kJ{\cdot}kg^{0.75}{\cdot}d^{-1})$. The present study suggests that a chronic inflammation has no effect on energy metabolism and growth performance, in spite of the difference in systemic antibody responses. The reason was considered to be due to locally induced immune response, resulting from the possible encapsulation at the site of injection, and/or to a low systemic immune stress which is within a functionally acceptable physiological range for the piglets.
A rapid, selective and sensitive reversed-phase HPLC method for the determination of promethazine in human serum was developed, validated, and applied to the pharmacokinetic study of promethazine. Promethazine and internal standard, chlorpromazine, were extracted from human serum by liquid-liquid extraction with n-hexane containing 0.8% isopropanol and analyzed on a Capcell Pak CN column with the mobile phase of acetonitrile-0.2 M potassium dihydrogen phosphate (42:58, v/v, adjusted to pH 6.0 with 1 M NaOH). Detection wavelength of 251 nm and flow rate of 0.9 mL/min were fixed for the study. The assay robustness for the changes of mobile phase pH, organic solvent content, and flow rate was confirmed by $3^{3}$ factorial design using a fixed promethazine concentration (10 ng/mL) with respect to its peak area and retention time. In addition, the ruggedness of this method was investigated at three different laboratories using same quality control (QC) samples. This method showed linear response over the concentration range of 1-40 ng/mL with correlation coefficients greater than 0.999. The lower limit of quantification using 1 mL of serum was 1 ng/mL, which was sensitive enough for pharmacokinetic studies. The overall accuracy of the quality control samples ranged from 96.15 to 105.40% for promethazine with overall precision (% C.V.) being 6.70-11.22%. The relative mean recovery of promethazine for human serum was 63.54%. Stability (freeze-thaw and short-term) studies showed that promethazine was stable during storage, or during the assay procedure in human serum. However, the storage at $-80^{\circ}C$ for 4 weeks showed that promethazine was not stable. Extracted serum sample and stock solution were not allowed to stand at ambient temperature for 12 hr prior to injection. The peak area and retention time of promethazine were not significantly affected by the changes of mobile phase pH, organic solvent content, and flow rate under the conditions studied. This method showed good ruggedness (within 15% C.V.) and was successfully used for the analysis of promethazine in human serum samples for the pharmacokinetic studies of orally administered Himazin tablet (25 mg as promethazine hydrochloride) at three different laboratories, demonstrating the suitability of the method.
These study was to investigate the in vitro fertilization and viability of fresh and vitrified oocytes. Also, the developmental capacity of IVF and intracytoplasmic sperm injection (ICSI) oocytes were investigated. Then vitrification was performed with the use of 20% ethylene glycol + 20% DMSO + 0.5 M sucrose + 10% FCS + TCM-199 medium. Vitrification immature oocytes are cultured in vitrification solution for 10 min afterwards transferred to expose at room temperature for 5 min. and transferred to the ice water for 5 min. The oocytes were sealed in a 1.0 mm straw and placed in a $LN_2$ container. Frozen oocytes were rapidly thawed in a water bath at $30{\sim}35^{\circ}C$, and then placed in TCM-199 medium containing 0.5 M sucrose for 5 min each, respectively, at $38^{\circ}C$. After being washed for 2~3 times, using fresh medium the oocytes were cultured in TCM-l99 medium supplemented with 5% FCS at $38^{\circ}C$ in 5% $CO_2$ and air. The normal morphology of fresh and vitrified-thawed oocytes were $87.1{\pm}2.1%$ and $54.8{\pm}2.5%$, respectively. The viability rates of fresh and vitrified-thawed oocytes were $70.0{\pm}2.2%$ and $41.9{\pm}2.6%$, respectively. Viability rates of vitrified-thawed oocytes were lower than that of fresh follicular oocytes (p<0.05). The in vitro maturation rates of fresh and vitrified oocytes were $45.1{\pm}3.6%$ and $28.9{\pm}4.4%$, respectively. The IVF rates of fresh follicular and vitrified-thawed oocytes were 34.00.2% and $20.2{\pm}2.6%$, respectively. The in vitro maturation and fertilization rates of vitrified-thawed oocytes were lower than those of the fresh follicular oocytes (p<0.05). A total of 350 oocytes were fixed and stained after co-incubation with spermatozoa, of which 88 had identifiable nuclear material. After IVF for 20 hrs, $25.1{\pm}3.4%$ of the oocytes found to have been penetrated by spermatozoas. Oocytes were fixed and stained after ICSI, and 105 oocytes contained identifiable nuclear material. After IVF and ICSI for 20 hrs, $34.3{\pm}3.4%$ and $59.0{\pm}2.0%$ of the oocytes were found to have been penetrated by spermatozoas. The developmental rates upon ICSI were significantly higher than those of the IVF method (p<0.05).
흰쥐 뇌의 선조체로부터 catecholamine, indoleamine 및 대사산물을 동시분석할 수 있는 간편한 방법을 제시하였다. 기기는 ECD를 장착한 HPLC를 사용하였고, 고정상인 $C_{18}$ 컬럼에서, 이 동상은 10mM citric acid, 0.13mM $Na_4EDTA$, 0.58mM SOS를 함유하는 35mM sodium acetate buffer(pH 3.4) : MeOH=85:15가 최적이었다. 이 때 컬럼온도는 $30^{\circ}C$였다. 이 조건으로 dopamine(DA), 3, 4-dihydroxyphenyl acetic acid(DOPAC), homovanilic acid(HVA), 5-hydroxyindole acetic acid(5-HIAA), serotonin(5-HT) 및 noradrenaline(NA)을 미량까지 분석할 수 있었고, 검출한계는 각 성분에 대해 1회 주입당 2~10pg이었다. 이 방법으로 흰쥐의 주령 및 성별에 따른 선조 체내 생체아민과 대사산물의 함량을 비교하였다. 7주령 쥐에서 암컷은 수컷보다 DA와 5-HT의 함량이 유의성 있게 높은 것으로 나타났으며, 주령이 증가함에 따라 암컷에서 DOPAC의 함량이 유의적으로 증가하였다.
스트레스로 인한 위궤양형성에 중추성 교감신경의 영향여부를 추구하기 위하여 norepinephrine, epinephrine, dopamine, isoproterenol 및 clonidine을 흰쥐의 뇌실내로 투여 하고 한냉 환경 $(4^{\circ}C)$에서 4시간 구속방치하여 위 분비기능의 변동과 궤양 발생 정도를 검색하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Norepinephrine, epinephrine, dopamine및 소량의 clonidine 처치로 궤양 발생이 현저하게 감소하였다. 2. Norepinephrine또는 epinephrine 처치군에서는 위액분비, 산분비 및 펩신 분비의 감소와 궤양 발생 감소가 초래되었다. 3. Dopamine혹은 소량의 clonidine 처치군에서는 궤양 발생의 감소와 위액분비 및 산분비 감소가 초래되었으나 펩신 분비는 변동 없었다. 4. Isoproterenol처치군에서는 궤양 발생과 펩신 분비는 대조군과 차이 없고, 위액분비 및 산분비의 감소만 나타났다. 5. 대량의 clonidine 투여군에서는 궤양발생, 산분비 및 펩신분비 모두 변동없이 약간의 위액분비 감소가 나타났다 이상의 결과로 보아 중추성 교감신경자극은 궤양 형성을 억압하는 작용이 있고, 이에는 교감신경성 ${\alpha}$-수용체 및 도파민성 수용체가 관여된다고 믿어지며, 이 효과는 위액분비 감소 및 산 분비 감소작용과 아울러 또 다른 요인이 관여한다고 추측된다.
Chang, Young Soo;Lee, Yun-Sang;Kim, Young Ju;Jeong, Jae Min
대한방사성의약품학회지
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제1권1호
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pp.53-61
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2015
Lutetium-177 ($T_{1/2}=6.71day$) is an adequate radionuclide for therapy, which has both beta emission ($E_{max}=497keV$) for therapeutic effect and gamma emission (113 and 208 keV) for imaging. $^{177}Lu$ labeled ethylenediamine-N,N,N',N'-tetrakis (methylene phosphonic acid) (EDTMP) and 1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraaminomethylenephosphonate (DOTMP) have been proposed as radiopharmaceuticals for bone pain palliation. In this study, we compared radiochemistry and biodistribution of $^{177}Lu$-EDTMP and $^{177}Lu$-DOTMP. EDTMP and DOTMP were synthesized, and 1 mg of each was labeled with $^{177}Lu$ at pH 7~8 with high efficiency (>98%). For comparative biodistribution studies, $^{177}Lu$-EDTMP or $^{177}Lu$-DOTMP were injected into ICR-mice through tail vein, and then biodistribution data were obtained as percentages of injected dose per gram of tissue (% ID/g). Urine excretions of both agents in mice were checked for 7 days. Rat images were also obtained after injection of $^{177}Lu$-EDTMP or $^{177}Lu$-DOTMP. $^{177}Lu$-DOTMP (100% at 1 min) showed faster labeling than $^{177}Lu$-EDTMP (100% at 30 min). Both of them were stable at least for 21 days at room temperature. High bone uptakes were found for both $^{177}Lu$-EDTMP and $^{177}Lu$-DOTMP: 38.0 and 34.1% ID/g at 3 hr, respectively; and 33.2 and 18.8% ID/g at 7 day, respectively. Rapid excretions to urine were found for both agents ($^{177}Lu$-EDTMP: 56%, $^{177}Lu$-DOTMP: 63% at 1 day). Other organs showed very low uptakes. Rat images of both $^{177}Lu$-EDTMP and $^{177}Lu$-DOTMP showed high bone uptakes and low soft tissue uptakes. In conclusion, both $^{177}Lu$-EDTMP and $^{177}Lu$-DOTMP showed high potential as bone pain palliation agents. $^{177}Lu$-EDTMP showed higher bone uptake and slower bone clearance in mice than those of $^{177}Lu$-DOTMP.
Biogenic amine류는 어육의 부패과정 중 생성되는 성분으로 이를 간편하게 측정하기 위하여 diamine oxidase를 amino기가 관능기인 다공질의 Chitopearl beads에 고정화한 후 이를 충진한 효소 reactor를 제조하였다. 고정화 효소 reactor를 이용한 biogenic amine 연속계측 시스템을 사용하여 putrescine 기질에 대해 15.0 mM까지 검량곡선을 얻을 수 있었다. 이 때, biogenic amine 센서의 최대 감응도는 $35^{\circ}C$, 0.05 M 인산 완충용액(pH 7.2)을 사용한 경우 얻을 수 있었다. Biogenic amine 센서로 측정 시 방해물질로 작용할 수 있는 성분을 조사한 결과, ATP분해산물 및 TMA 등에는 거의 영향을 받지 않아 측정에 무리가 없음을 보여주었고, 0.8%까지의 식염에 대해서는 감응도가 19.2%이하로 감소하였으며 alanine과 glycine을 제외한 아미노산에 대하여 9.8% 이하의 감응도 상승을 나타내었다. 염류 및 아미노산에 의한 감응도 감소 및 증가 현상은 시료를 0.4 M perchloric acid에 의해 전처리하면 해결할 수 있었다. 여러 종류의 polyamines가 공존하는 경우 putrescine 기준으로 하여 putrescine 검량곡선의 26.7% 범위내에서 polyamines의 측정이 가능하였다. Diamine oxidase가 고정화된 Chitopearl 효소 reactor를 이용하는 경우 biogenic amines의 함량 유무를 30분 이내에 측정할 수 있었다.
본 논문에서는 대전류공급장치(PCITS)에 의해 소손된 강이음쇠형(iron fittings type) 금속플렉시블호스(CSST)의 구조 및 전기적 특성을 해석하였다. CSST는 보호 피막, 튜브, 너트, 클램프 링, 플레어 캡, 소켓, 볼 밸브 등으로 구성되어 있다. CSST의 내전압 평가는 전기 충전부와 비충전부 사이에 교류 전압 220 V를 1분간 인가하여 견뎌야 한다. 직류 500 V에 의한 절연 성능의 평가는 온도 상승 시험 전에 $1M{\Omega}$ 이상, 시험이 끝난 후에는 $0.3M{\Omega}$ 이상을 요구한다. 정상 제품의 평균 저항은 $11.5m{\Omega}$이었으나 PCITS로 130 A를 흘려 소손된 제품의 평균 저항 $11.50m{\Omega}$이었다. 또한 130 A가 약 10 s 흘렀을 때 튜브의 보호 피막이 일부 용융되었고, 검정색의 연기가 발생하였다. 60 s 경과되면 튜브의 대부분이 적색으로 발열되며, 전류가 120 s 흘렀을 때는 적열 범위가 넓어졌다. 95%의 신뢰 구간(CI)의 검증에서 P 값은 0.019로 정규 분포를 갖지 못하였으나 Anderson-Darling (AD) 통계량은 0.896, 표준 편차는 0.5573 등으로 양호한 특성을 나타냈다.
To fabricate a metal mold for injection molding, hot-embossing and imprinting process, mechanical machining, electro discharge machining (EDM), electrochemical machining (ECM), laser process and wet etching ($FeCl_3$ process) have been widely used. However it is hard to get precise structure with these processes. Electrochemical etching has been also employed to fabricate a micro structure in metal mold. A through mask electrochemical micro machining (TMEMM) is one of the electrochemical etching processes which can obtain finely precise structure. In this process, many parameters such as current density, process time, temperature of electrolyte and distance between electrodes should be controlled. Therefore, it is difficult to predict the result because it has low reliability and reproducibility. To improve it, we investigated this process numerically and experimentally. To search the relation between processing parameters and the results, we used finite element simulation and the commercial finite element method (FEM) software ANSYS was used to analyze the electric field. In this study, it was supposed that the anodic dissolution process is predicted depending on the current density which is one of major parameters with finite element method. In experiment, we used stainless steel (SS304) substrate with various sized square and circular array patterns as an anode and copper (Cu) plate as a cathode. A mixture of $H_2SO_4$, $H_3PO_4$ and DIW was used as an electrolyte. After electrochemical etching process, we compared the results of experiment and simulation. As a result, we got the current distribution in the electrolyte and line profile of current density of the patterns from simulation. And etching profile and surface morphologies were characterized by 3D-profiler(${\mu}$-surf, Nanofocus, Germany) and FE-SEM(S-4800, Hitachi, Japan) measurement. From comparison of these data, it was confirmed that current distribution and line profile of the patterns from simulation are similar to surface morphology and etching profile of the sample from the process, respectively. Then we concluded that current density is more concentrated at the edge of pattern and the depth of etched area is proportional to current density.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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