배양온도, 먹이생물의 종류에 따라 rotifer 의 성장과 세포크기변화를 알아본 결과 다음과 같다. Large-type rotifer 의 최대세포수는 온도 $36^{\circ}C$, 먹이생물 $\omega$-yeast를 공급한 것에서 배양 7일후 1,420 ind./ml, small-type rotifer에서는 온도 $34^{\circ}C$, 먹이생물 $\omega$- yeast를 공급한 것에서 배양 7일후 1,669 ind./ml로 최고의 성장을 보였다. Rotifer의 크기변화에서는 large-type의 경우 온도 $34^{\circ}C$, 먹이생물 C. ellipsoidea를 공급한 실험구에서 $112.1\mu m$까지 감소되었다 (실험시작시 $202.0\mu m$. Small-type rotifer의 경우는 $320^{\circ}C$, $\omega$-yeast를 먹이로 공급한 것이 배양시작 5일후 $201.3\mu m$까지 증가되었다 (실험시작시 $157.0\mu m$. 크기의 변화가 큰 rotifer에 온도 변화를 다시 주었을 때 처음 실험 시작 때의 rotifer 크기로 회복되었다.
장수상황버섯(Phellinus baumii)의 균사체 성장 및 세포외 다당체(exopolysaccharides) 생산을 위한 액체배양의 최적 배지 및 배양조건에 관한 실험을 수행한 결과, 최적배양 온도와 초기 pH는 각각 3$0^{\circ}C$와 5.0으로 결정되었다. 탄소원의 경우, cellobiose와 maltose가 균사체 성장에는 양호하였으나 저조한 세포외 다당체 생산을 보였으며, 반면에 fructose 와 mannitol 은 상대적으로 높은 수율의 세포외 다당체 생산과 균사체 성장 또한 양호하였다. 최적 질소원으로는 yeast extract가 균사체 성장뿐만 아니라 세포외 다당체 생산에 효과적인 것으로 결정되었다. 최적 배지의 조성은 fructose 20 g/L, yeast extract 20 g/L 및 $CaCl_2$ 0.55 g/L이었으며, 최적 배양조건 하에서 5-L 교반 발효조를 운전한 결과, 최대 균사체 성장(17.43 g/L)과 최대 세포외 다당체 생산(3.6 g/L)을 얻을 수 있었다. 회수된 세포외 다당체는 glycoprotein이었으며 그 조성은 amino acid분석 결과 주로 arginine (14.1%)과 glycin (12.0%)이었으며, cabohydrate의 경우는 mannose (48.7%)와 arabinose (38.4%)이 주성분이었다.
파김치에서 분리한 마늘 내성 유산균인 Lactobacillus plantarum TJ-LP-002 균주의 균체생육과 항균활성에 영향을 미치는 배양조건 및 배지조건을 조사하였다. 선정 유산균의 배양 상등액 내에는 acetic acid, citric acid, lactic acid, tartaric acid와 같은 유기산이 존재하였고, 배양 중에 lactic acid와 acetic acid의 생성이 크게 증가하는 것으로 확인되었다. 단백질분해효소를 비롯한 각종 효소 처리에 의해 항균활성이 소실되지 않아, 선정 유산균이 생산하는 항균활성은 단백질성 물질이 아닌 산 생성에 의한 작용일 것으로 판단되었다. 항생제와 생균제의 병용 가능성을 확인하기 위하여 선정 유산균의 항생제 감수성을 조사한 결과, neomycin sulfate, spectinomycin dihydrochloride, lincomycin hydrochloride에 내성을 나타내었고, streptomycin sulfate에는 감수성을 나타내었으며, ampicillin trihydrate, chloramphenicol, erythromycin, tetracycline hydrochloride, kanamycin sulfate에는 중간 내성을 나타내었다. L. plantarum TJ-LP-002는 배양온도 30${^{\circ}C}$, 초기 pH 7.0, 24시간의 배양조건에서 최적의 균체생육과 항균활성을 나타내었으며, 탄소원은 glucose 3%(w/v), 질소원은 yeast extract 3%(w/v) 첨가 시에 균체생육과 항균활성이 높게 나타났다. 무기염류는 manganese sulfate와 ammonium citrate가 항균활성에 많은 영향을 주는 것으로 나타났으며, 각 성분을 단독 첨가하는 것보다 혼합 첨가하는 것이 더 우수한 영향을 나타내는 것으로 확인되었다.
토양에서 분리한 광합성 세균인 Rhodospirillum rubrum N-1 균주에 의한 ${\delta}$-aminolevulinic acid (ALA) 생산에 있어서 levulinic acid (LA) 및 ALA 생합성 경로의 첨가효과를 검토하였다. Glutamate를 제외한 Lascelles의 기본배지에 LA를 배양초기에 10mM, 이후 대수기 중기에 30 mM을 첨가한 결과 균체외의 ALA 생산성은 최고 45 mg/l 도달, LA 미첨가 대비 23배 증가하였다. ALA 생합성의 전구물질인 glycine-succinate ($C_4$) 및 glutamate ($C_5$)의 feeding 효과는 배양초기/대수기 중기에 LA 10/30 mM을, glutamate 30 mM/30 mM을 각각 첨가하는 한편, 대수기 중기에 10 mM 농도의 $C_4$ 전구물질을 별도로 첨가배양함으로써 미첨가 대비의 ALA 생산성이 약 40배 (75 mg/l) 증가하였다.
Methylobacterium organophilum을 이용하여 메탄 올로부터 고점성 다당류의 생산에 대한 질소원 이용의 통력학척 분석을 유가식 배양에서 수행하였다. 발효중 세포는 배지 중에 첨가된 질소원이 고갈된 후에도 계속 성장하였고, 에틸란은 질소원 고갈조건 하에서만 생성되였다 세포 성장은 배양초기에 첨가 한 질소원인 암모니아의 농도에 비례적으로 이루어 졌으나, 에릴란 생산은 첨가한 암모니아 농도가 $0.75g/\ell$ 이상에서는 오히려 현저하게 감소하였다. 초기 암모니아 농도가 높아질수록, 비세포중식 속도, 비산물생성 속도, 비기질소비 속도가 감소하였다. 높 은 암모니아 농도의 발효 속도들에 대한 저해작용을 감소시키기 위해, 질소원을 일정농도(암모니아 농도=$0.15g/\ell$) 이하로 유지시키면서 공급하는 유가식 배양법으로 메틸란의 농도를 $12.5g/\ell$ 까지 증가시킬 수있었다.
The optimal conditions for mycelial growth of P. linteus ASI 26011 were 25-30$^{\circ}C$ and pH 6.0, respectively. The mycelial growth of P. linteus was excellent on MCM medium. In case of carbon sources, the mycelial growth of P. linteus was best on the culture media that were contained with sucrose, mannose and glucose. Potassium nitrate and sodium nitrate were good for the mycelial growth of P. linteus as a nitrogen source. For comparison of the mycelial colonization of P. linteus on logs, several techniques of inoculation were tested; the sterilized short log inoculation, drilling inoculation and log-end sandwich inoculation. The mycelial colonization of P. linteus on logs was good in the treatment of sterilized short log inoculation, but poor in the traditional methods such as drilling inoculation and log-end sandwich. The initial mycelial growth and the full mycelial colonization of P. linteus were the best on 20 cm logs under the condition of 42% of moisture content in log. Also the initial mycelial growth of P. linteus was accelerated over 12 hours of sterilization. Burying method of logs after 5-6 months of incubation was the best for formation of basidiocarp of P. linteus. The formation of fruiting body of P. linteus was quite good in the cultivation house at the 31-35$^{\circ}C$ and over 96% of relative humidity.
원숭이 콩팥세포를 T-flask에서 배양할 때 로타바이러스 감염에 미치는 protease, $CaCl_2$. EGTA, po]ybrene 감염배지내에서 pH의 영향과 formaldehyde에 의한 로타바이러스의 inactivation 정도를 조사하였다. 로타바이러스의 증식은 trypsin이나 clostripain과 같은 protease의 첨가에 의해 크게 향상되었다. $CaCl_2$ 농도가 300 mg/ml이거나 pH가 8인 감염배지에서 로타바이러스의 증식은 각각 8 및 10 배 증가하였다 그러나 EGTA 와 polybrene을 감염배지에 첨가하였을 때 바이러스 증식은 감소하였다. Fonnaldehyde는 로타바이러스 inactivation에 유효하였으며 로타바이러스의 농도는 fomrmaldehyde를 처리하였을 때 1 시간 후 약 53-95% 수준으로 감소하였으며 12 시간 후에는 로타바이러스가 98% 이상 inactivation 되었다.
이 연구는 전기화학적 배양법과 호기성 조건을 유지함으로써 Thiobacillus ferrooxidans의 밀도가 높게 유지될 수 있다는 것을 보여준다. 최적 pH는 $2.0{\pm}0.05$로 결정하고 1vvm의 Air를 공급하였다 전류와 전압은 0.15A, 4V로 유지하였고 Pt 전극에서 85%의 효율로 $Fe^{3+}$ 를 $Fe^{2+}$로 환원시켰다. 이러한 조건에의 배양에서 초기 건조셀 밀도 0.0025 g-dry cell/L에서 8일 후에는 0.0576 g-dry cell/L에 이르렀다. 이는 같은 조건에서 고전적인 배양법에 의한 것보다 7배가 높은 값이다.
An alkalophilic microorganism capable of degrading dyes was developed for the treatment of alkaline dye solution. This strain was identified as Pseudomonas species. Using this microorganism, biological treatment of dye was studied in Erlenmeyer flasks. The characteristics of this microorganism were observed under various incubating-condition such as temperature, pH, nitrogen source, and macronutrients concentration. The removal effciencies of Disperse Red 60 from synthetic wastewater were 33.5 ~ 36.9% at the range of $30{\sim}40^{\circ}C$, and they were 31.1 ~ 36.7% at the range of initial pH 8 ~ pH 10, respectively. The optimal culture medium was found to be 0.25%(w/v) yeast extract, 0.25%(w/v) polypeptone, 0.1%(w/v) $KH_2PO_4$, 0.2%(w/v) $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, and 1.0%(w/v) $Na_2CO_3$. In treatment of various dyes using Erlenmeyer flasks, the removal effciencies of Disperse Blue 87, Disperse Yellow 64, Disperse Red 60, Acid Blue 193, Acid Red 138, and Direct Yellow 23 were found to be 76%, 71%, 58%, 93%, 94%, and 90% respectively after 24hrs reaction of alkalophilic strain Pseudomonas sp. YBE-12.
An antimicrobial substance-producing microorganism was isolated from soil samples. Based of the taxonomic characteristics of its morphological, cultural, physiological properties and 16s rRNA sequence alignment, this microorganism was identified as Pseudomonas aeruginosa, and we named Pseudomonas aeruginosa EL-KM. The optimal culture condition for production of antimicrobial substance was 1% mannitol, 0.4% yeast extract, 0.5% Nacl, 0.2% $K_2SO_4$, 100$\mu$M $MgSO_4$.$7H_2O$, 10$\mu$M $CaCl_2$.$2H_2O$, 1$\mu$M $FeSO_4$.$7H_2O$, 1$\mu$M $MnSO_4$.$4-5H_2O$, initial pH 7 and 200 rpm at 3$0^{\circ}C$. The purification of the antimicrbial substance was performed by silica gel column chromatographys, and fraction with TLC $R_f$ 0.77 value represented good antimicrobial activity. The crude antimicrbial substance was stable within a pH range of 3-10 and temperature range of 4$^{\circ}C$-121$^{\circ}C$ autoclaving. This crude antibacterial substance acted as bacteriolytic agent against Vibrio cholerae non-Ol ATCC 25872, and also exhibited excellent properties, when the substance was demonstrated against many other gram-positive, gram-negative bacteria, yeast and fungi.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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