Lactic acid bacteria (LAB) producing phenyllactic acid (PLA), which is known as antimicrobial compound, was isolated from button mushroom bed and the isolated LAB was identified to Lactobacillus casei by 16 rRNA gene sequence analysis. Cell-free supernatant (CFS) from L. casei was assessed for both the capability to produce the antimicrobial compound PLA and the antifungal activity against three fungal pathogens (Rhizoctonia solani, Botrytis cinerea, and Collectotricum aculatum). PLA concentration was investigated to be 3.23 mM in CFS when L. casei was grown in MRS broth containing 5 mM phenylpyruvic acid as precursor for 16 h. Antifungal activity demonstrated that all fungal pathogens were sensitive to 5% CFS (v/v) of L. casei with average growth inhibitions ranging from 34.58% to 65.15% (p < 0.005), in which R. solani was the most sensitive to 65.15% and followed by C. aculatum, and B. cinerea. The minimum inhibitory concentration (MIC) for commercial PLA was also investigated to show the same trend in the range of 0.35 mg mL-1 (2.11 mM) to 0.7 mg mL-1 (4.21 mM) at pH 4.0. The inhibition ability of CFS against the pathogens were not affected by the heating or protease treatment. However, pH modification in CFS to 6.5 resulted in an extreme reduction in their antifungal activity. These results may indicate that antifungal activities in CFS was caused by acidic compounds like PLA or organic acids rather than protein or peptide molecules.
Ha, J.K.;Lee, S.S.;Gao, Z.;Kim, C.-H.;Kim, S.W.;Ko, Jong Y.;Cheng, K.-J.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.14
no.7
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pp.941-946
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2001
The effects of various concentrations of saturated fatty acids (SFA; caprylic, capric and stearic acids) on the growth of the anaerobic fungus, Neocallimastix frontalis C5-1 isolated from the rumen of a Korean native goat were investigated. At higher concentrations of fatty acids (0.1%, w/v), the addition of SFA strongly decreased filter paper (FP) cellulose digestion and polysaccharide-degrading enzyme activity. The sensitivity of the rumen anaerobic fungus to the added fatty acids increased in the following order: caprylic ($C_{8:0}$)>capric($C_{10:0}$)>stearic($C_{18:0}$) acid, although stearic acid had no significant (p<0.05) inhibitory effects at any of the concentrations tested. However, the addition of SFA at lower concentrations (0.01 and 0.001% levels), did not inhibit FP cellulose degradation and enzyme activity. Furthermore, although these parameters were slightly stimulated by the addition of SFA, they were not statistically different from control values. This is the first report examining the effects of fatty acids on anaerobic gut fungi. We found that the lower levels of fatty acids used in this experiment were able to stimulate the growth and specific enzyme activities of rumen anaerobic fungi, whereas the higher levels of fatty acids were inhibitory with respect to fungal cellulolysis.
Lee, Eun-Seon;Kim, Jong-Hui;Kang, Sun Moon;Kim, Bu-Min;Oh, Mi-Hwa
Journal of Animal Science and Technology
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v.64
no.2
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pp.343-352
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2022
Pig slaughterhouses harbor high humidity because of the necessary cleaning that takes place simultaneously with slaughter, which facilitates the existence of mold. Due to the enclosed space, there are several limitations to the control of mold growth with respect to cleaning, ventilation, and drying. In this study, the prevalence of fungi was investigated in four pig slaughterhouses in Korea. Four fungi (Aspergillus niger, Penicillium commune, Penicillium oxalicum, and Cladosporium cladosporioides) were detected with the highest frequency. These four strains were subjected to various treatments to reduce their growth. The fungi were inoculated onto stainless steel (SS) chips and treated with ultraviolet (UV)-C irradiation and hot water. Individual treatments with UV-C (15, 30, 90, 150, 300, and 600 mJ/cm2), and hot water (60, 65, 70, and 83℃) were performed to sanitize the SS chips. Simultaneous cleaning with 60℃ hot water and more than 150 mJ/cm2 of UV-C reduced the fungal incidence by > 6.5 Log from 6.6-7.0 Log CFU/cm2 (initial count). Our results demonstrate that a combined treatment of UV-C and hot water is the most economical and convenient way to prevent microbiological contamination of small tools (such as knives and sharpeners) and steel surfaces in slaughterhouses.
We previously reported the protein isolated from Coptidis Rhizoma (CRP), which has antifungal activity against a fungal pathogen, Candida albicans. In the current study, we investigated what portion in the CRP is responsible for the antifungal activity. For the investigation, the CRP was fractionated on a Shepadex G-50 column. Data resulting from the fractionation, seven fractions were obtained. Fractions (Fr.) I, II, and III eluted initially from the column showed no inhibitory effect on the growth of C. albicans, whereas Fr. IV, V, and VI eluted later revealed inhibition of the growth, and Fr. IV and VI showed potent antifungal activity by broth susceptibility analysis. However, Fr. VI was contained in the CRP more than Fr. IV, which led us to select the VI for the following experiments. In a murine model of a subcutaneous candidiasis caused by C. albicans, the Fr. VI displayed a therapeutic effect on nude mice pretreated with anti-neutrophil monoclonal antibody (RB68C5) and then infected subcutaneously with live C. albicans. At day 16, these mice were healed almost up to 78% of the infected area when compared to infected area of control nude mice that received diluent (Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline; DPBS), instead of the Fr. VI (P<0.01). The Fr. VI blocked hyphal formation from blastoconidial form of C. albicans (P<0.01), which might prevent penetration of hyphae to the deeper site of skin and thus helps the healing. In the ionic strength test, the effect of Fr. was influenced by $Ca^{2+}$ ion just like other known antimicrobial peptides, but the influence was affected at an extremely high concentration such as 500 mM. Thus, such ion-concentration is considered to be meaningless in the clinical situation. Considering all data together, Coptidis Rhizoma is appeared to produce an antimicrobial peptide that has therapeutic effect on subcutaneous infection caused by C. albicans.
This study was done to find out the antifungal activity of two antibacterial antibiotics, Chlorampenicol and Streptomycin sulfate, against Phytophthora n. var. Parasitica, the causal agent of Phytophthora blight of sesame, growing on artificial media. On PDA medium, Chlorampenicol at 10 ppm, Streptomycin sulfate at 25ppm highly inhibited mycerial growth and completely inhibited zoosporangial formation of Phytophthora n. var. parasitica, and Chlorampenicol at 5 ppm, Streptomycin sulfate at 10 ppm slightly inhibited the mycerial growth and zoosporangial formation of the fungus. These antibiotics showed considerably increased inhibitory effect on the fungal growth when they were mixed with other chemical. Protein content in myceria of the fungus was decreased and abnormal growth of mycerial apex was observed by treatment of these antibiotics. Phytotoxicity on sesame seedlings was not observed by application of them.
Park, Jeong-Min;Lee, Sung-Hyun;Kim, Jung-Ok;Park, Hong-Ju;Park, Jae-Bok;Sin, Jeong-Im
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.36
no.1
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pp.141-146
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2004
Fungal products indirectly mediate anti-tumor effects in vitro and in vivo. To investigate whether Lentinus edodes might possess direct anti-tumor substance, L. edodes was extracted and tested on human papillomavirus (HPV) 16 oncogenes-associated animal tumor cells (TC-1) and in an animal tumor model. Only water extract displayed direct anti-proliferative effects in TC-1 tumor cells in vitro. This inhibition was dose-dependent, and inhibitory concentration ($IC_{50}$) was $800\;{\mu}g/mL$. Fungal extracts also showed growth inhibition to human cervical cancer cells (CaSki and HeLa) similarly to TC-1 tumor cells. When fungal extracts were added at a high dose (1.5 mg/mL), cell growth was inhibited within 6 hr following extract treatment. Cell growth inhibition was blocked by heat treatment, but not by low pH, which is indicative of heat sensitivity of this anti-proliferative substance. Cell growth suppression was mediated by apoptosis, as determined by Annexin V and propidium iodide staining. When challenged with TC-1 cells, direct intratumoral injection of fungal extracts resulted in some positive effect on tumor growth inhibition, as compared to oral delivery. Results suggest that heat labile substance of L. edodes suppresses growth of HPV oncogenes-associated tumor cells through apoptosis.
Candida albicans is a major fungal pathogen in humans. In our previous study, we reported that an ethanol extract from Aucklandia lappa weakens C. albicans cell wall by inhibiting synthesis or assembly of both (1,3)-β-D-glucan polymers and chitin. In the current study, we found that the extract is involved in permeabilization of C. albicans cell membranes. While uptake of ethidium bromide (EtBr) was 3.0% in control cells, it increased to 7.4% for 30 min in the presence of the A. lappa ethanol extract at its minimal inhibitory concentration (MIC), 0.78 mg/ml, compared to uptake by heat-killed cells. Besides, leakage of DNA and proteins was observed in A. lappa-treated C. albicans cells. The increased uptake of EtBr and leakage of cellular materials suggest that A. lappa ethanol extract induced functional changes in C. albicans cell membranes. Incorporation of diphenylhexatriene (DPH) into membranes in the A. lappa-treated C. albicans cells at its MIC decreased to 84.8%, after 60 min of incubation, compared with that of the controls, indicate that there was a change in membrane dynamics. Moreover, the anticandidal effect of the A. lappa ethanol extract was enhanced at a growth temperature of 40℃ compared to that at 35℃. The above data suggest that the antifungal activity of the A. lappa ethanol extract against C. albicans is associated with synergistic action of membrane permeabilization due to changes in membrane dynamics and cell wall damage caused by reduced formation of (1,3)-β-D-glucan and chitin.
Kim, Yun Seok;Kim, Sang woo;Lamsal, Kabir;Lee, Youn Su
The Korean Journal of Mycology
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v.44
no.1
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pp.36-47
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2016
This study was conducted to evaluate five different strains of rhizobacterial isolates viz. PA1, PA2, PA4, PA5 and PA12 for biological control against Colletotrichum acutatum, C. coccodes, C. gloeosporioides, C. dematium, Botrytis cinerea, Rhizoctonia solani, Sclerotinia minor and Fusarium sp. In vitro inhibition assay was performed on three different growth mediums, potato dextrose agar (PDA), tryptic soy agar (TSA), and PDA-TSA (1:1 v/v) for the selection of potential antagonistic isolates. According to the result, isolate PA2 showed the highest inhibitory effect with 65.5% against C. coccodes on PDA and with 96.5% against S. minor on TSA. However, the same isolate showed the highest inhibition with 58.5% against C. acutatum on PDA-TSA. In addition, an in vivo experiment was performed to evaluate these bacterial isolates for biological control against fungal pathogens. Plants treated with bacteria were analyzed with phytopathogens and plants inoculated with phytopathogens were treated with isolates to determine the biological control effect against fungi. According to the result, all five isolates tested showed inhibitory effects against phytopathogens at various levels. Mode of action of these rhizobacterial isolates was evaluated with siderophore production, protease assay, chitinase assay and phosphate solubilizing assay. Bacterial isolates were identified by 16S rDNA sequencing, which showed that isolates PA1 and PA2 belong to Bacillus subtilis, whereas, PA4, PA5, and PA12 were identified as Bacilus altitudinis, Paenibacillus polymyxa and Bacillus amyloliquefaciens, respectively. Results of the current study suggest that rhizobacterial isolates can be used for the plant growth promoting rhizobacteria (PGPR) effect as well as for biological control of various phytopathogens.
This study was undertaken to investigate the activity or the water extract of Polygonum aviculare Linne in vitro. Some of the purely isolated strains or dermatophytes were inoculated on Sabouraud's dextrose agar medium containing different concentrations of the Polygonum extracts and their growth was observed for about two weeks at room temperature. Then we measured the sizes of fungal colony grown in various conditions and compared them with those of Sabouraud's medium as control to determine fungistatic effectiveness of the extract. For additional study, slide cultures on Sabouraud's dextrose medium and Sabouraud's media containing 3ml/10ml extract were performed with Epidermophyton floccosum to observe the growth of hyphae, sporulation and other mycological findings. 1. The growth of Epidermo-phyton floccosum was completely inhibited in the media containing 3ml/l0ml Polygonum extract. 2. Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes and microsporum canis were completely inhibited in several strains of each specimen and a moderate inhibitory effect was observed in all of another strains in the media containing the 3ml/10ml extract. 3. In the slide culture of Epidormophyton floccosum the hypha was thin and more desiccated. The characteristic macroco-nidia formation was not observed on the media containing 3ml/10ml Polygonum extract as compared with those findings of Sabouraud's dextrose control medium.
Seetha, Ramulu J.;Raja, Gopal Reddy C.;Ramanjaneyulu, R.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.20
no.1
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pp.1-5
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2010
The studies have been conducted to control the soil borne fungal pathogens viz, Fusarium solani (Mart) Sacc. and Alternaria tenuissima the incitants of root rot and die-back diseases on mulberry stem cuttings planted in the mulberry nurseries and also in established mulberry gardens ten plant extracts with 10% concentration except Lantana camara (undiluted) were tested through poisoned food technique and four biofungicides were also screened by dual culture method under in vitro conditions. Plant extract of Prosopis juliflora showed the maximum inhibition on the mycelial growth (81.2% over A. tenuissima and 80.0% over F. solani) and followed by L. camara (66.7% over A. tenuissima and 68.9% over F. solani). Among the antagonists Pseudomonas fluorescens and Trichoderma viride showed maximum inhibition on the mycelial growth of both pathogenic fungi. The promising plant extracts (P. juliflora and L. camara) and antagonists (P. fluorescens and T. viride) were tested against both the pathogenic fungi under in vivo conditions along with the existing popular chemical Mancozeb. All the tested plant products and bio-fungicides showed inhibitory effect on both fungi. But the maximum survival percentage of mulberry cuttings was recorded in the treatment with T. viride (95% against F. solani and 90% against A. tenuisssima) followed by P. fluorescens (90% against both fungi) and T. harzianum (80% against F. solani and 85% against A. tenuisssima). Incase of the treatments with plant extracts and chemical fungicide the P. juliflora (60% against F. solani and 55% against A. tenuisssima) showed higher survival percentage and followed by L. camara (55% against F. solani and 50% against A. tenuisssima) and Mancozeb (55% against both fungi). In case of control only 10% of survival was recorded in F. solani inoculated cuttings and 15% survival in A. tenuissima inoculated cuttings.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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