Present experiments were carried out to examine the effect of plant growthregulators for callus induction and plantlet regeneration through leaf tissue culture of Scutellaria baicalensis GEORGI. The results indicated that Callus was induced well on MS medium supplemented with 0.5mg/L NAA or 0.5mg/L NAA Plus 0.5mg/L zeatin. MS medium supplemented with 1.0mg/L BAP plus 0. 5mg /L NAA or 1. 0mg /L zeatin Plus 0.5mg /L NAA and 1.0mg /L NAA were the most effective for plant regeneration. Thin layer chromatogram of baicalin component (Rf 0.39) was observed from callus cultured on MS medium containing 0.5mg /L NAA plus 0.5mg /L zeatin.
Lee Sang-Hoon;Lee Ki-Won;Kim Do-Hyun;Lee Dong-Gi;Won Sung-Hye;Kim Ki-Yong;Lee Byung-Hyun
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.26
no.2
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pp.69-76
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2006
To optimize tissue culture responses for genetic transformation of Kentucky bluegrass, the effects of culture medium supplements on tissue culture responses were investigated with mature seeds of a cultivar 'Newport' as explant tissues. The optimal concentration of 2,4-D (2.4-dichloro phenoxy acetic acid) for the induction of embryogenic callus from mature seed was 3 mg/L. Plant regeneration frequency was 54% when embryogenic callus was cultured on the regeneration medium supplemented with 1 mg/L 2,4-D and 3 mg/L of BA (6-benzyladenine). Addition of 1 g/L of casein hydrolysate and 500 mg/L of L-proline improved frequencies of embryogenic callus induction and plant regeneration up to 60.8% and 58.3%, respectively. Regenerated plants were grown normally when shoots transplanted to the soil. A rapid and efficient plant regeneration system established in this study. We suggest that the results may be useful for molecular breeding of Kentucky bluegrass through genetic transformation.
Anther and/or tissue culture of cross pollinated crops would be very important because it can result in the direct use of haploids or doubled haploids for developing superior hybrids or varieties. The objective of the study was to investigate the response frequencies in anther and/or tissue-cultured hybrids of corn. pearl millet and buckwheat to identify agronomically acceptable germplasm of the crops. 27 crosses of corn inbred lines were evaluated by plating their anthers on N6. MS and Yu-Pei media. Two genotypes of FR1l41/FR16 hybrid cultured on N6 medium and Fla 2BT73/S6013 hybrid cultured on N6 medium responded with one anther producing calli when plated after 5$^{\circ}C$ low temperature treatment for one week. Immature embryos of corn hybrid Suwon 19 responded producing calli that were regenerated to plants at a 8.6 percent success rate. Of the 20 corn hybrids. immature tessels of FR1l41/FR16. B68/A1l6N//KS15. KS16/KS17. GA209/DB578 and SDB126/GA209 crosses responded at a relatively higher success rate producing calli that were regenerated to plants. In tissue culture of elongating culms of pearl millet x Napier grass interspecific hybrid. 2.5-4.0mm long pieces of the culm were good for callus induction resulting in higher success rate. The epicotyl of buckwheat was very good for tissue culture. and the node produced the plants regenerated directly without callus induction on the B5 medium containing I ppm BA and 0.05 ppm IBA. There were great differences in response to anther and/or tissue culture of corn, pearl millet and buckwheat due to genotype x medium and environment interactions.
Kim, Kyung-Hee;Kim, Yong-Goo;Heo, Sung-Hyun;Lee, Ki-Won;Lee, Byung-Hyun
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.31
no.3
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pp.235-242
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2011
In order to improve forage characteristics of Italian ryegrass by genetic transformation, an efficient callus induction from mature seed and optimal plant regeneration system were established using a domestic cultivar 'Kospeed'. Addition of 5 mg/L of 2,4-D showed highest frequency of embryogenic callus induction from mature seeds. N6 medium showed higher frequency of both callus induction and plant regeneration as compared with MS and SH medium. The highest plant regeneration frequency 67% was obtained when embryogenic calli were transferred to N6 medium containing 1 mg/L 2,4-D and 5 mg/L BA. Supplementation of regeneration medium with sucrose at 30 g/L level maximized regeneration frequency as compared to the other concentrations. These data would be very helpful for molecular breeding of domestic Italian ryegrass cultivar through genetic transformation.
Kim, Youn Hee;Kim, Hye Hyeong;Lee, Gee Young;Lee, Jae Hong;Jung, Jae Hong;Delgado-Sanchez, Pablo;Lee, Sang Deok
Journal of Plant Biotechnology
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v.45
no.4
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pp.369-374
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2018
The purpose of this study was to investigate the suitable parts for callus induction and optimal concentrations of growth regulators contained in the medium affecting shoot and rooting for the in vitro mass production of Haworthia maughanii. To determine suitable parts of the plant for callus induction, the leaves, flower bloom and flower stalks were cultured in MS medium at different concentrations of $0{\sim}2mgL^{-1}$ NAA and $0{\sim}2mgL^{-1}$ TDZ, respectively. All of the parts showed 100% callus formation rate at $NAA\;1mgL^{-1}$ and $TDZ\;1mgL^{-1}$ treatment, $NAA\;2mgL^{-1}$ and $TDZ\;2mgL^{-1}$ treatment and NAA 1 to $2mgL^{-1}$, respectively. While the rate of callus formation was high in all parts, the leaves were the most efficient to obtain most culture parts. $NAA\;0.1mg\;L^{-1}$ and $BA\;0.1mg\;L^{-1}$ treatments were the most effective in shoot formation with 22.0 shoots. In addition, multiple shoot propagation showed 16.3 shoots, the highest, with $NAA\;0.1mg\;L^{-1}$ and $BA\;0.1mg\;L^{-1}$ treatments. These results led us to speculate that the optimization of culture conditions was responsible for the mass propagation for in vitro cultures of Haworthia maughanii.
Lilium cernum Komarvo. is an important endangered plant belonging to the family Liliaceae. A method was developed for the rapid micropropagation of L. cernum through plant regeneration from bulb scales explant-derived calli. The bulb scales segments were cultured on Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0, 0.5, 1.0, $3.0mg{\cdot}L^{-1}$ kinetin and 0, 0.1, 0.5, $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA or 2,4-D for callus induction. In media with $0.5{\sim}3.0mg{\cdot}L^{-1}$ kinetin and $0.1{\sim}1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA and 2,4-D, 95~100% of explants produced callus. They were then transferred to MS medium supplemented with various concentrations of NAA (0, 0.01, 0.05 and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$) in combination with BA (0, 1.0 and $2.0mg{\cdot}L^{-1}$) for bulbet formation. Bulbet induction (78%), weight (468 mg) and size (15.5 mm) were obtained the highest on MS medium containing $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ BA and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ NAA. In vitro frequency of plant regeneration was not significantly treated in strength of MS and sucrose concentration. Chlorophyll contents in 1/2MS with $50g{\cdot}L^{-1}$ sucrose treatments were higher than those in control and another treatment. This in vitro propagation protocol will be useful for conservation and mass propagation of this endangered plant.
This study was conducted to investigate the effect of growth regulators and $GeO_2$ on the induction and proliferation of callus and the effect of $GeO_2$ and citric acid on the Ge content of callus from explants and plant, Angelica koreana Max. The results obtained were summarized as follows. The callus induction was most effective on MS (Murashige and Skoog) medium containing 1. 0ppm 2, 4 - D with petiolule. The proliferation of callus was most effective at 2. 0ppm 2, 4 - D on the medium, at 2. 5ppm $GeO_2$ on the medium containing 2. 0ppm 2, 4 - D, and at $0.\;1{\sim}1mM$citric acid on the medium at pH6 containing 2. 0ppm 2, 4 - D and 2. 5ppm $GeO_2.$ The more $GeO_2$ in MS medium up to 20ppm, the more Ge content in callus. Ge content in callus was highest when the medium was supplemented with 0. 1mM citric acid and the pH of medium was low. The Ge content in plant was high in order of leaf > root > stem. Application $GeO_2$ to the soil increased Ge content in plant and application of 1mM citric acid with $GeO_2$ resulted in increasing Ge content highest in plant, but application more than l0mM citric acid resulted in Ge content decreased. Application of $GeO_2$ increased Ge content in callus and plant but had a tendency to decrease some mineral content, on the other hand application of $0.\;1{\sim}1mM$ citric acid with $GeO_2$ had a tendency to increase mineral content.
Hypocotyl explants of Chinese cabbage (cvs. "Jeong Sang") produced transgenic calli on callus induction medium (MS salt, B5 vitamin, 5 mg/L acetosyringone, 1 mg/L 2,4-D, 3% sucrose, 400 mg/L cefotaxime, 100 mg/L paromomycin, pH 5.8) after cocultivation with strains of Agrobacterium tumefaciens (EHA101, LBA4404, GV3101) harboring the pPTN290 containing paromomycin-resistance gene as a selectable marker, and then they transferred to root induction medium (1/2MS salt, MS vitamins, 2% sucrose, 100 mg/L paromomycin, 100 mg/L cefotaxime, pH 5.8) and shoot induction medium (MS salt, B5 vitamin, 4 mg/L $AgNO_3$, 4 mg/L 6-benzyladenine, 3 mg/L alpha-naphthaleneacetic acid, 100 mg/L paromomycin, 100 mg/L cefotaxime, 3% sucrose, pH 5.8) in order. There was a significant difference in the frequency of transgenic calli depending on Agrobacterium strains. In particular, the highest frequency (6.1%) of transgenic calli was obtained from the hypocotyls cocultivated with EHA101 strains. Also, the frequency (%) of transgenic root and plants from each transgenic callus clone were obtained with 60.7% and 38.2% in EHA101, with 8.3% and 0% in LBA4404, with 20.5% and 85.7% in GV3101 strains, respectively. They were grown to maturity in a greenhouse and normally produced $T_2$ seeds. GUS histochemical assay for progeny ($T_2$) revealed that the transgenes was expressed in the plant genome, and progeny analysis from 7 independent transgenic events demonstrated that the transformants transmitted the transgene as a single or multiple functional locus.
Journal of The Korean Society of Grassland and Forage Science
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v.30
no.4
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pp.283-290
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2010
Guineagrass (Panicum maximum Jacq.) is an important warm-season forage grass as well as biomass crop. It has both sexual and asexual mode of reproduction (apomictic) depending on cultivar. We developed efficient plant regeneration system for an apomictic (cv. Natsukaze) and a non-apomictic (Noh-PL1) guineagrass by optimizing the level of L-proline in the callus induction and that of $AgNO_3$ in plant regeneration medium. Among the L-proline concentrations tested, the best callus induction was achieved by using 2g/L L-proline in both the genotypes. Immature embryos proved to be the best explant source for tissue culture of guineagrass. The highest frequency of shoot regeneration was obtained on MS plant regeneration medium supplemented with 2 mg/L $AgNO_3$. These results provide a foundation for efficient tissue culture and genetic improvement of guineagrass.
Seo, Hyo-Won;Yi, Jung-Yoon;Park, Young-Eun;Kang, Sung-Ho;Chung, Ho-Sung;Kim, Ji-Hee
Journal of Plant Biotechnology
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v.33
no.4
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pp.303-307
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2006
We describe here an efficient in vitro propagation method of Silene acaulis subsp. arctica (Caryophyllaceae), one of the higher arctic angiosperms, through the multiple shoot regeneration after callus induction from the radicle. The seeds of S. acaulis subsp. arctica collected from Svalbard, the Norwegian Arctic, were germinated and calli were induced from the radicle on solid MS media supplemented with 0.25mg/L 2,4-D and 1mg/L $GA_3$ at both $10{\pm}1^{\circ}C\;and\;23{\pm}1^{\circ}C$ Two weeks after callus induction, the multiple shoots were efficiently regenerated on the MS media supplemented with 0.25 g/L BA and 0.05mg/L HPh. The total biomass increment of regenerated shoots increased most efficiently of S. acaulis subsp. afctica was showed the maximum efficiency in at $23{\pm}1^{\circ}C$ on 1/2 MS salt strength. The multiple regenerated plantlets of S. acaulis subsp. arctics were grown to normal plants on soil.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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