• 한국잡초학회지
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• 제10권4호
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• pp.285-293
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• 1990

제초제(除草劑)에 내성(耐性) 또는 저항성(抵抗性)을 지닌 수도(水稻) 카루스를 선발(選拔)하기 위하여 유묘기(幼苗期)에 제초제(除草劑)에 반응(反應)을 달리하는 품종(品種)을 대상으로 카루스의 생장(生長) 반응(反應)을 조사(調査)한 결과(結果)는 다음과 같다. 카루스 유도시(誘導時)에 thiobencarb에 감수성(感受性)을 보였던 IR28의 카루스 생장(生長)은 thiobencarb $10^{-5}$ M 및 $10^{-6}$ M에서도 억제(抑制) 되지 않아 특정(特定) 제초제(除草劑)에 대한 수도(水稻) 품종(品種)의 반응(反應)은 카루스의 유도기(誘導期) 및 생장기(生長期), 성식물체(成植物體)에 따라 차이(差異)가 있음을 나타내었다. Butachlor에 대한 IR31917-45-3-2-2의 반응(反應)도 IR28과 유사(類似)한 결과(結果)를 보였다. Thiobencarb에 내성(耐性)을 지닌 카루스를 선발(選拔)키 위하여 IR28의 카루스를 thiobencarb $10^{-6}$ M에 30일간(日間) 처리(處理)한 후(後) 고농도(高濃度)인 $10^{-5}$ M에 옮겨 치상(置床)시킨 결과(結果) 카루스의 생체중(生體重)은 전혀 억제(抑制) 되지 않아서 제초제(除草劑) 내성세포(耐性細胞)를 선발(選拔)키 위해서는 제초제(除草劑)의 농도(濃度)를 점진적(漸進的)으로 높이는 것이 유용(有用)한 선발방법(選拔方法)이 될 것으로 사료(思料)된다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제32권2호
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• pp.123-128
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• 2005

Lilium longiflorum 'Nellie White'에서 부서지기 쉬운 배발생 캘러스 (FEC)를 유도하여 FEC를 통한 소자구 재분화 체계를 확립하고자 실시하였다. FEC를 통한 나리 소자구 분화는 2.0 mg/L dicamba가 첨가된 MS 기본배지에 나리 인편을 배양하여 단단한 캘러스를 유도하고, 유도된 단단한 캘러스를 동일배지에서 3번 이상 계대배양하여 단단한 일반 캘러스를 증식하였다. 증식된 단단한 캘러스는 $1{\sim}2mm$ 정도의 크기로 절단하여 2.0 mg/L dicamba와 90 g/L sucrose가 첨가된 MS배지에서 배양하여 FEC를 유도하였다. 2개월 간격으로 계대배양하면서 FEC를 유도하였으며, FEC 유도율은 단단한 캘러스를 동일 배지에 계대배양 하였을 때 증가하였다. 유도된 FEC는 $1.0{\sim}2.0\;mg/L$ dicamba와 90 g/L sucrose가 첨가된 MS배지에서 5배 이상의 증식율을 보였다. 증식된 FEC에서 소자구 분화는 0.1 mg/L BA, 1.0 g/L NAA, 30 g/L maltose가 첨가된 1/2 MS 배지에서 양호하였다. 그러나 많은 재분화된 소자구가 투명화 되었다. 건전한 소자구의 재분화는 30 g/L sucrose와 $0.5{\sim}1.0%$ 활성탄이 첨가된 MS 배지가 가장 효과적이었다.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제45권3호
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• pp.266-272
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• 2018

본 연구는 백합과에 속하며 환경부에서는 멸종위기종 리스트 중 관심종으로 분류된 층층둥굴레의 기내 증식에 미치는 연근별, 호르몬 종류와 농도별 배양환경을 조사하기 위해 수행되었다. 효과적인 캘러스 유도조건을 알아보고자 0.1, 0.5, 1.0, $1.5mg{\cdot}L^{-1}$의 2,4-D가 첨가된 MS배지에 1, 3, 5년생 층층 둥굴레 근경을 치상한 후에 캘러스 유도율을 조사한 결과, $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ 2,4-D 배지에 2년생 근경 배양한 배지에서 87%의 캘러스 유도율을 보였다. 1년생 근경은 67%, 5년생 근경은 50%로 조사되었다. 층층둥굴레 캘러스 유래의 부정아 유도는 0.5 mg/L NAA 처리구에서 57%로 조사되었다. 호르몬이 첨가되지 않은 대조구에서는 부정아가 유도되지 않았다. 층층둥굴레 부정아의 신장과 발근에 적합한 호르몬의 종류와 농도를 조사하였다. 층층둥굴레 부정아 신장의 최적 조건은 $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ BA 호르몬이 첨가된 배지이고 BA의 농도가 높아질수록 감소하는 경향을 보였다. 그리고 기내에서 무균적으로 온전한 개체를 생산하기 위해 shoot 부위가 신장된 부정아에서 발근에 적합한 배지를 조사하였다. 발근에 적합한 조건은 호르몬이 첨가되지 않은 대조구이며 뿌리의 길이는 11 cm로 조사되었다. 본 연구결과에서 층층둥굴레 연생별 근경, 옥신종류 및 농도에 따른 최적의 캘러스 유도조건을 조사하였고, 유도된 캘러스를 이용하여 분화에 최적조건을 조사하였다. 또한 발근에 필요한 최적의 조건을 조사하여 성공적인 기내배양을 통한 재분화 시스템을 확립하였다. 이러한 결과는 향후 층층둥굴레의 개체보전과 생물소재 활용을 위한 소재확보에 중요한 기초자료를 제공할 것으로 생각된다.

• Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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• 제8권1호
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• pp.32-36
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• 2003

Production of camptothecin ((PT) from callus cultures of Camptotheca acuminata Decne was affected by light and culture conditions. Among the culture media tested, modified B5 medium containing 3% (w/v) sucrose, 2 mg/L B,4-D, 2 times of MS medium vitamins, 500 mg/L casein hydrolysate, 250 mg/L myo-inositol, 0.05% (w/v) activated charcoal, and 0.15% (w/v) gelite was used for callus induction . The highest cell growth and CPT production were obtained in dark and green light condition, respectively. Photoperiod has no effect on cell growth and CPT production. Both cell growth and CPT production were also influenced by combination ratio of red and blue light .Cell growth and CPT production were the highest in the ratio of red and blue light,90:10.

• 한국자원식물학회:학술대회논문집
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• 한국자원식물학회 2003년도 제10차 국제학술회의 및 추계정기 학술발표회
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• pp.21-21
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• 2003

An efficient plant regeneration system was developed for Hordeum vulgare L. cv Baegdong - an important Korean cultivar. The protocol was based on a series of experiments involving the sizes of mature embryos and the culture media. The embryo size is found to be critical for the establishment of embryogenic callus. Embryos of 1.1-1.5 mm size showed a much higher ability to produce embryogenic callus capable of regenerating green plants. The auxins picloram and dicamba proved effective in inducing callus from mature embryos. 2.5 mg $I^{-1}$ dicamba and 4.0 mg $I^{-1}$ picloram in Murashige and Skoog's (MS) medium was optimum for the induction of primary callus. The induced primary callus was loose and friable which ultimately developed into creamy white and compact callus after transferring into the fresh medium. Multiple shoots were induced in the MS medium supplemented with 6.0 g $I^{-1}$ maltose, 20 mg $I^{-1}$ sorbitol, 0.5 mg $I^{-1}$ 2,4-D and 1.0 mg $I^{-1}$ kinetin and the rate was 6.5 shoots per embryo. Regenerated plants were hardy and developed roots rapidly in the medium containing 0.2 $I^{-1}$ IBA. This efficient plant regeneration system provides a foundation for generating transgenic plants of this important barley cultivar.

• 한국자원식물학회:학술대회논문집
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• 한국자원식물학회 2003년도 심포지엄
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• pp.59-67
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• 2003

An efficient plant regeneration system was developed for Hordeum vulgare L. cv Baegdong - an important Korean cultivar. The protocol was based on a series of experiments involving the sizes of mature embryos and the culture media. The embryo size is found to be critical for the establishment of embryogenic callus. Embryos of 1.1-1.5 mm size showed a much higher ability to produce embryogenic callus capable of regenerating green plants. The auxins picloram and dicamba proved effective in inducing callus from mature embryos. $2.5\;m;I^{-1}$ dicamba and $4.0\;mg\;I^{-1}$ picloram in Murashige and Skoog's (MS) medium was optimum for the induction of primary callus. The induced primary callus was loose and friable which ultimately developed into creamy white and compact callus after transferring into the fresh medium. Multiple shoots were induced in the MS medium supplemented with $6.0\;g\;I^{-1}$ maltose, $20\;mg\;I^{-1}$ sorbitol, $0.5\;mg\;I^{-1}$ 2, 4-D and $1.0\;mg\;I^{-1}$ kinetin and the rate was 6.5 shoots per embryo. Regenerated plants were hardy and developed roots rapidly in the medium containing $0.2\;I^{-1}$ IBA. This efficient plant regeneration system provides a foundation for generating transgenic plants of this important barley cultivar.

• Journal of Plant Biotechnology
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• 제30권2호
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• pp.115-121
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• 2003

In this study, plant regeneration and Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation Kentucky bluegrass(Poa pratensis L.) were evaluated. Three different types of calli were produced depending on the combinations of growth regulators. They were non-friable brown or gray-colored callus (type I), compact, friable and yellow or white-colored callus (typeII), and soft, watery translucent callus with differentiated structure (typeIII). The highest regenerable organogenic callus (typeII) was obtained on the medium containing 1mg/L, 2,4-D and 0.1mg/L BA. Additionally, the production of typeII calli increased significantly when AgNO$_3$ was added to the callus induction and growth medium. The highest frequency of multiple shout formation from typeII callus was obtained on MS medium containing 1mg/L BA and 1mg/L Thidiazuron(TDZ). The organogenic calli(typeII) were inoculated with Agrobacterium tumefaciens strain EHA101 harboring the binary vector pIG121Hm with $\beta$-glucuronidase gene, and various factors were found to influence the transfer-DNA delivery efficiency. The highest transient GUS activity was observed on typeIIcallus. In the present work, we reported the first transient GUS activity of Kentucky bluegrass mediated by Agrobacterium tumefaciens. Our system may contribute to genetic improvement for breed-recalcirtrant grass species, Kentucky bluegrass.

• 식물조직배양학회지
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• 제28권2호
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• pp.61-67
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• 2001

들잔디 (Zoysia japonica Steud.)의 성숙종자 유래의 캘러스를 사용하여 캘러스 생장 및 재분화에 적합한 몇 가지 조건과 캘러스 유형에 따른 재분화 효율을 검토하였다. 종자로부터 캘러스 유도는 2 mg/L 2,4-D, 0.2 mg/L BAP, 4 mg/L thiamine-HCl, 100 mg/L $\alpha$-ketoglutaric acid를 포함한 MS 배지에서 가장 좋았다. 캘러스 증식은 0.5 mg/L 2,4-D, 0.05mg/L BAP, 4 mg/L thiamine-HCl, 100 mg/L $\alpha$-ketoglutaric acid를 포함한 MS 배지가 가장 좋았다. 식물체의 재분화는 3% maltose, 1 mg/L BAP 또는 1 mg/L TDZ를 포함한 MS배지에서 좋았다. 캘러스의 Type과 빈도는 2,4-D와 BAP 조합과 농도에 따라 크게 영향을 받았고, 형태적으로 4가지 Type이 뚜렷하게 나타났다. Type I, II, III 캘러스는 계대배양으로 신초가 형성된 반면, 물기가 많은 캘러스인 Type IV에서는 뿌리만이 분화되었다. 이 중 Type I 캘러스는 신초의 재분화율이 82%로 가장 높고 albino체의 출현빈도가 4%로 가장 낮았다. 이와같이 캘러스를 유형별로 구분하여 배양함으로써 잔디 캘러스로부터 식물체의 재분화를 높일 수 있었다.

• 식물조직배양학회지
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• 제26권2호
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• pp.71-76
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• 1999

약배양에 대한 반응이 비교적ㆍ높은 것으로 알려진 고추의 두 품종 계룡산재래와 밀양재래의 약을 2,4-D와 kinetin이 각각 0.1 mg/L씩 첨가된 배지에 치상한 후 4$^{\circ}C$와 32$^{\circ}C$의 온도 전처리가 소포자배 발생에 미치는 영향을 조사하였다. 소포자배의 발생은 사용한 두 품종 중 밀양재래에서 높았다. 고온처리는 저온처리에 비해 소포자 배의 발생이 많았고 캘러스의 발생은 거의 없었으며 발생한 배는 동일 배지에서 또는 호르몬이 없는 배지에 옮겼을 때 대부분이 정상적인 유식물로 발달하였다. 저온처리에서는 캘러스의 발생이 많았고 발생한 배는 대부분이 비정상적으로 발달하였다. 소포자배 발생에 효과적인 고온처리 기간은 밀양재래에서는 3일, 계룡산재래에서는 6일이었다. 고추의 약배양 시 고온처리는 소포자배의 유기뿐만 아니라 유기된 배의 생장에도 중요한 영향을 미치는 것으로 나타났다.

• 원예과학기술지
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• 제29권3호
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• pp.260-266
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• 2011

An efficient protocol was established for high frequency somatic embryogenesis through a callus culture of Coelogyne cristata. The best frequency of callusing was obtained from a PLB segment (3-5 mm) cultured on MS medium supplemented with coconut water (CW) and a combination of both 3 $mg{\cdot}L^{-1}$ of 2,4-D and BA. When the calli were sub-cultured on the MS medium without any PGRs, the average number of somatic embryos were higher than those with PGRs treatment. NAA is the most critical factor among PGRs, which dramatically hindered for the formation of a somatic embryo. The efficacy of the addition of coconut powder (CP) for somatic embryogenesis was almost the same in all treatments. However, the number of somatic embryos formed distinctly depended on age of the callus. The somatic embryos converted into healthy plants with well-developed shoots on the same medium. Plantlets showed the best responses of root and shoot growth when transferred to $\frac{1}{2}$ MS medium containing 1.5 $g{\cdot}L^{-1}$ of activated charcoal. All plants with above 3.0-cm-high were successfully acclimatized in the greenhouse.