Due to the depleting petroleum reserve, recurring energy crisis, and global warming, it is necessary to study the development of white biotech-based aromatic chemical feedstock from renewable biomass for replacing petroleum-based one. In particular, the production of aromatic intermediates and derivatives in biosynthetic pathway of aromatic amino acids from glucose might be replaced by the production of petrochemical-based aromatic chemical feedstock including benzene-derived aromatic compounds. In this review, I briefly described the production technology for hydroquinone, catechol, adipic acid, shikimic acid, gallic acid, pyrogallol, vanillin, p-hydroxycinnamic acid, p-hydroxystyrene, p-hydroxybenzoic acid, indigo, and indole 3-acetic acid using metabolic engineering, bioconversion, and chemical process. The problems and possible solutions regarding development of production technology for competitive white biotech-based aromatic compounds were also discussed.
Production of shikonin derivatives by Lithospermum erythrorhizon cells by using polyurethane foam was invesliigated. Shikonin derivatives were effectively adsorbed mostly by phase distribution to polyurethane matrices and their production increased significantly compared to the suspension culture. The enhanced production of shikonin was probably due to more facilitated cell to cell con-tact and lowered intracellular shikonin concentration, both of which are known to be favorable for plant secondary metabolite production. In order to improve the process productivity, tell culture was conducted under various culture conditions: Of them, Schenk and Hildebrandt medium containing indole-3-acetic acid (1.75mg/ι) and kinetin (0.1mg/ι) was considered most appropriate for shikonin production. Production of shikonin increased about 4.5 times in the Schenk and Hildebrandt medium containing indole-3-acetic acid (1.15mg/ι) and kinetin (0.1mg/ι) when compared to the same medium containing p-chlorophenoxyacetic acid (2.0mg/ι) and kinetin (0.1mg/ι). When poly-urethane was used as the support material, a single-stage system was more preferred to the conventional two-stage culture system in terms of shikonin productivity.
Bae, Eun-Kyung;Choi, Young-Im;Lee, Hyoshin;Choi, Ji Won
Journal of Plant Biotechnology
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v.46
no.3
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pp.180-188
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2019
Auxin plays a crucial regulatory role in plant growth and development processes. Three major classes of auxin-responsive transcription factors controlled by the Auxin/indole-3-acetic acid (Aux/IAA), Gretchen Hagen 3 (GH3), and small auxin up RNA (SAUR) genes regulate auxin signaling. Aux/IAA, in particular, encodes short-lived nuclear proteins that accumulate rapidly in response to auxin signaling. In this study, we isolated a PagAux/IAA1 gene from poplar (Populus alba ${\times}$ P. glandulosa) and investigated its expression characteristics. The PagAux/IAA1 cDNA codes for putative 200 amino acids polypeptide containing four conserved domains and two nuclear localization signals (NLSs). Utilizing Southern blot analysis, we confirmed that a single copy of the PagAux/IAA1 gene was present in the poplar genome. The expression of this gene is specific to leaves and flowers of the poplar. PagAux/IAA1 expressed in the early exponential growth phase of cell-cultured in suspension. PagAux/IAA1 expression level reduced in drought and salt stress conditions, and the presence of plant hormones such as abscisic acid. However, expression enhanced in cold stress, cambial cell division, and presence of plant hormones such as gibberellic acid and jasmonic acid. Thus, these results suggest that PagAux/IAA1 participates in cold stress response as well as developmental processes in the poplar.
Indole-3-acetic acid (IAA) biosynthesis by bacteria occurs widely in rhizospheres. Bacterial species able to synthesize IAAmay be exploited for beneficial interactions in crop management systems. The objective of this study was to determine the response of ivyleaf morningglory (Ipomoea hederacea) seedlings to IAA and to an IAA-producing rhizobacterum, Bradyrhizobium japonicum isolate GD3. IAA solution and isolate GD3 suppression of seedling growth measured as radicle length and biomass depended on IAA concentration. Seedling radicle length was significantly reduced by ca. 29% with more than $1.0{\mu}M$ of IAA solution, compared to the control, 48 h after application. The cell concentration at 50% growth reduction ($GR_{50}$) of the seedling radicle was IAA production by isolate GD3 at $10^{4.82}\;cfu$, the cell concentration for 50% growth reduction ($GR_{50}$) of seedling radicle was 0.24 iM, which was much lower than the IAA solution concentration ($117.48{\mu}M$) required for $GR_{50}$. Therefore, excess IAA production by isolate GD3 may be more detrimental to morningglory radicle growth than standard IAA solution. Results confirmed involvement of IAA in suppressive effects of isolate GD3 on morning-glory seedlings grown in a hydroponic system.
Microorganisms that live in the rhizosphere play a pivotal role in the functioning and maintenance of soil ecosystems. The study of rhizospheric cyanobacteria has been hampered by the difficulty to culture and maintain them in the laboratory. The present work investigated the production of the plant hormone indole-3-acetic acid (IAA) and the potential of biofilm formation on the rhizoplane of pea plants by two cyanobacterial strains, isolated from rice rhizosphere. The unicellular cyanobacteria Chroococcidiopsis sp. MMG-5 and Synechocystis sp. MMG-8 that were isolated from a rice rhizosphere, were investigated. Production of IAA by Chroococcidiopsis sp. MMG-5 and Synechocystis sp. MMG-8 was measured under experimental conditions (pH and light). The bioactivity of the cyanobacterial auxin was demonstrated through the alteration of the rooting pattern of Pisum sativum seedlings. The increase in the concentration of L-tryptophan and the time that this amino acid was present in the medium resulted in a significant enhancement of the synthesis of IAA (r > 0.900 at p = 0.01). There was also a significant correlation between the concentration of IAA in the supernatant of the cyanobacteria cultures and the root length and number of the pea seedlings. Observations made by confocal laser scanning microscopy revealed the presence of cyanobacteria on the surface of the roots and also provided evidence for the penetration of the cyanobacteria in the endorhizosphere. We show that the synthesis of IAA by Chroococcidiopsis sp. MMG-5 and Synechocystis sp. MMG-8 occurs under different environmental conditions and that the auxin is important for the development of the seedling roots and for establishing an intimate symbiosis between cyanobacteria and host plants.
To study the effect of IAA on the growth of Chlorella, the alage wre cultured on the media for six days by bubbling $_{2}$ enriched air under 10K lux at 20-$25^{\circ}C$. The culture media were made by adding a concentration of $10^{-3}$M, $10^{-4}$M, and 0M(as a control) IAA to the standard media. During the period of culture, Chlorella was smapled for the given time of interval and photosynthetic and respiratory activities were measured by Warburg manometer and change of chemical components of Chlorella was determined by spectrophotometry after the Chlorella cell was fractionated by Schmidt-Thannhauser method. 1) Photosynthetic and respiratory activities were enhanced by IAA ; especially the enhancement of respiratory activity was so remarkable. 2) As to the chemical components of Chlorella, carbohydrates and amino acids were reduced a little but phosphate, RNA, DNA, and protein were increased by $10^{-3}$M IAA ; the increase of RNA, in particular, was noticable. 3) The above results suggest that the enhancement of growth of Chlorella, by IAA and ATP induced by respiratory activity accelerated with IAA enhanced RNA synthesis, resulting in an increase of protein synthesis.
Jung, Yu Jin;Nogoy, Franz Marielle;Cho, Yong-Gu;Kang, Kwon Kyoo
Journal of Plant Biotechnology
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v.42
no.3
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pp.186-195
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2015
Anthranilate synthase (AS) is a key enzyme in the biosynthesis of tryptophan (Trp), which is the precursor of bioactive metabolites like indole-3-acetic acid and other indole alkaloids. Alpha anthranilate synthase 2 (OsASA2) plays a critical role in the feedback inhibition of tryptophan biosynthesis. In this study, two vectors with single (F124V) and double (S126F/L530D) point mutations of the OsASA2 gene for feedback-insensitive ${\alpha}$ subunit of rice anthranilate synthase were constructed and transformed into wildtype Dongjinbyeo by Agrobacterium-mediated transformation. Transgenic single and double mutant lines were selected as a single copy using TaqMan PCR utilized nos gene probe. To select intergenic lines, the flanking sequence of RB or LB was digested with a BfaI enzyme. Four intergenic lines were selected using a flanking sequence tagged (FST) analysis. Expression in rice (Oryza sativa L.) of the transgenes resulted in the accumulation of tryptophan (Trp), indole-3-acetonitrile (IAN), and indole-3-acetic acid (IAA) in leaves and tryptophan content as a free amino acid in seeds also increased up to 30 times relative to the wildtype. Two homozygous event lines, S-TG1 and D-TG1, were selected for characterization of agronomic traits and metabolite profiling of seeds. Differentially expressed genes (DEGs), related to ion transfer and nutrient supply, were upregulated and DEGs related to co-enzymes that work as functional genes were down regulated. These results suggest that two homozygous event lines may prove effective for the breeding of crops with an increased level of free tryptophan content.
This study explores the interaction between the production of indole-3-acetic acid (IAA), a typical phytohormone auxin and the role of IAA biosynthetic pathways in each IAA producing rhizobacterial strain. The bacterial strains were isolated from rhizosphere of wild plants and identified as Acinetobacter guillouiae SW5, Bacillus thuringiensis SW17, Rhodococcus equi SW9, and Lysinibacillus fusiformis SW13. A. guillouiae SW5 exhibited the highest production of IAA using tryptophan-dependent pathways among the 4 strains. When indole-3-acetamide (IAM) was added, Rhodococcus equi SW9 showed the highest IAA production of $3824{\mu}g/mg$ protein using amidase activity. A. guillouiae SW5 also showed the highest production of IAA using two pathways with indole-3-acetonitrile (IAN), and its nitrile hydratase activity might be higher than nitrilase. B. thuringiensis SW17 showed the lowest IAA production, and most of IAA might be produced by the amidase activity, although the nitrilase activity was the highest among 4 strains. The roles of nitrile converting enzymes were relatively similar in IAA synthesis by Lysinibacillus fusiformis SW13. Tryptophan-independent pathway of IAA production was utilized by only A. guillouiae SW5.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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