배 경 : 폐기종에서 발생하는 폐포 파괴의 원인으로서 전통적으로 protease/anti-protease 불균형과 산화성 스트레스가 주요 가설로 여겨져 왔으나 최근 폐포세포의 아포프토시스가 폐포파괴 및 폐기종의 원인이 된다는 이론이 제기되고 있어서 A549 폐상피세포에서 흡연추출물에 의한 세포사의 특성을 규명하고자 본 연구를 시행하였다. 방 법 : A549 폐상피세포주에서 여러 농도의 흡연추출물 및 억제제를 첨가한 후 MTT assay를 잉용하여 세포생존율을 측정하였다. 세포사 분석은 FACScan을 이용한 DNA 분절확인, 전자현미경 검사, Hoecst/PI 이중염색을 이용한 현광현미경 검사를 이용하였고 cyt-ochrome c 유리는 면역형광법을 이용하였다. Bcl-2 과발현세포주를 이용하여 bcl-2의 역할을 확인하였고 p53 Western blot 및 HPV-E6 과발현 세포주를 이용하여 p53의 역할을 확인하였다. 결 과 : A549 세포주에서 흡연추출물에 의한 세포사는 FACScan에서 DNA 분절에 의한 subG1 분획의 확인 및 Hoecst/PI 이중염색 및 현광현미경 소견 상 아포프토시스임이 확인되었고 전자현미경 소견상 저농도에서는 아포프토시스가 발생하지만 고농도에서는 괴사가 발생함을 확인하였다. Cytochrome c가 세포질로 유리됨을 확인하였으나 caspase 억제제에 의해서 세포사가 차단되지 않았다. 흡연추출물에 의한 세포사는 Bcl-2과발현에 의해 억제되었고 p53활성화를 유도하고 p53이 기능적으로 knock-out 된 세포주에서 억제되었다. 결 론 : 흡연추출물에 의한 폐상피세포의 세포사는 저농도에서는 아포프토시스를 고농도에서는 괴사를 유도하고 bcl-2 및 p53 경로가 중요한 역할을 담당하며 이는 폐기종 발생기전에 있어서 폐세포 세포사 이론을 뒷바침하는 자료로 활용될 수 있다고 생각된다.
본 연구에서는 인체 폐암 세포인 A549를 사용하여 Litsea populifolia 에탄올 추출물(EELP)의 항산화 및 항암활성과 그 분자적 기전에 관하여 연구하였다. 먼저 EELP의 DPPH 라디칼 소거활성을 측정한 결과, $IC_{50}$가 $11.71{\mu}g/ml$로 유의적인 항산화활성을 보였다. 또한 EELP가 인체폐암세포주인 A549와 정상 폐세포인 IMR90의 세포증식에 미치는 영향을 알아본 결과, 정상세포의 생존율에는 거의 영향을 끼치지 않은 반면, EELP 농도의존적으로 A549 세포의 성장이 저해되었으며, 세포 주기 변화를 분석한 결과 EELP에 의해 A549 세포의 강력한 G1 arrest가 유도되는 것을 확인하였다. EELP에 의해 유도되는 G1 arrest는 세포주기 조절 인자인 Cyclin D1, Cyclin E, Cyclin-dependent kinase인 CDK2와 CDK6의 mRNA 발현 감소와 더불어 단백질 발현 감소와 연관되어 있었다. 또한 EELP 처리에 의한 CDK/Cyclin complex의 발현 저해는 DNA 손상에 의해 활성화되는 CHK2의 활성화 형태인 p-CHK2의 발현 증가에 따른 p53 인산화에 따른 활성화와 CDK 활성화 효소인 CDC25A 탈인산화효소의 인산화에 따른 저해에 의해 나타나는 결과로 사료된다. 이러한 결과들로부터 EELP는 두가지 경로인 p53-의존성과 p53-비의존성(ATM/CHK2/CDC25A/CDK2) 경로를 통해 A549의 G1 arrest를 유도하여 세포 증식을 억제하는 것으로 사료된다. 본 연구결과는 EELP가 폐암에 대한 새로운 항암활성 소재로서 사용될 수 있는 가능성을 시사하며, 또한 EELP의 세포주기 조절에 의한 항암기전을 이해하고 향후 지속적 연구를 하는 데 있어서 귀중한 기초자료로 사용될 수 있을 것이다.
본 연구는 정신간호사의 공감능력, 감사성향 및 직무만족의 정도를 파악하고, 공감능력과 감사성향이 직무만족에 미치는 영향을 확인하기 위해 시도되었다. 연구대상자는 K도, G도, J도 및 C도에 위치한 8개의 정신전문병원에서 근무중인 정신간호사 196명이었으며, 자료수집은 2016년 10월 8일부터 10월 20일까지 수행되었다. 수집된 자료는 SPSS WIN 22.0 프로그램을 이용하여 기술통계, independent t-test, one-way ANOVA, $Scheff{\acute{e}}$ test, Pearson correlation coefficients 및 hierarchial multiple regression으로 분석하였다. 연구대상자의 공감능력은 평균 $3.5{\pm}0.28$점, 감사성향은 $4.0{\pm}0.59$점, 직무만족은 $3.3{\pm}0.34$점이었으며, 공감능력과 감사성향은 직무만족도에 유의한 영향을 미치는 예측요인으로 설명력은 18.5%로 나타났다. 향후에는 지역사회 정신보건기관의 정신간호사들을 대상으로 하는 연구 수행을 제언하며, 본 연구결과는 정신간호사의 직무만족도 증진의 영향 요인인 공감능력과 감사성향을 향상시킬 수 있는 프로그램 개발의 기초자료로 활용될 수 있을 것이다.
Purpose: Adipose tissue injection as a free graft for the correction of soft - tissue deficiency or depression deformity is a widespread procedure in plastic surgery. This study is to analyze the changes and viability of cryopreserved adipose tissue and to find out efficient long - term storage period. Methods: After centrifugation of aspirated abdominal tissues, $10m{\ell}$ of packed Adipose tissue were freezed at $-20^{\circ}C$. For 2, 4, 6, 8 months, each frozen samples were taken and injected into scalp of SCID mice. After 15 weeks, injected Adipose tissue were sampled and analyzed at 2 months interval. We compared and analyzed each group about the weight of the injected fat, histologic impressions, activity of mitochondria, size of a fat cell and rate of survival. Results: Significant weight changes were observed in cryopreservation for 2 months(p<0.05). Histologic changes were observed, independent of the freezing period with H - E stain. Among cryopreservations for 2, 4, 6 months, no significant change were observed. The reduction of mitochondrial enzymatic activity was observed independent of time interval but activity of mitochondrial dehydrogenase was reduced less than 50% in MTT assay. Conclusion: Freezing in $-20^{\circ}C$ for 6 months has no adverse effect to Adipose tissue, but fragile adipocytes, damaged cell membrane during harvesting procedure, were disrupted within 1 - 2 month and the maximum volume reduction were followed less than 2 months. These results demonstrate that tissue preparation cells without membrane damage have the greatest viability level and cryopreservation less than 2 months has great volume effect and cryopreservation for 6 months has stable volume effect.
Background: In order to characterize human antibodies with specificity for mite allergens at the molecular level, a scFv phage display library was constructed using peripheral blood mononuclear lymphocytes from an asthma patient allergic to mite as Ig gene sources. Methods: Immunoglobulin $V_H$ and V gene fragments were obtained by polymerase chain reaction, and randomly combined in pCANTAB-5E vector. The resulting human scFv phage display library had $3{\times}10^4$ independent clones, and biopanning was performed with house dust mite extracts. Results: Four scFv clones specific for house dust mite extract were isolated. Immunoblot assay showed that our clones reacted to 25 kDa and 50~60 kDa proteins with unknown identity in mite extracts. Sequence analysis indicated that two clones (b7 and c15) are identical, and all clones belong to human $V_H3$ subgroup. On the other hand, light chain usage was different in that two clones (a2 and b7 / c15) belonging to V ${\kappa}4$ subgroup, but a4 used V ${\kappa}1$ light chain gene. Conclusion: Our approach should facilitate provision of useful information on the antibody responses against allergens at the molecular level in humans.
Purpose: With increasing life expectancy, the presence of comorbidities has become a major concern in elderly patients who require surgery. However, little is known about the impact of different comorbidities on the outcomes of laparoscopic total gastrectomy (LTG). In this study, we investigated the impact of comorbidities on postoperative complications in patients undergoing LTG for gastric carcinoma. Materials and Methods: We retrospectively reviewed the cases of 303 consecutive patients who underwent LTG for gastric carcinoma between 2005 and 2016. The associations between each comorbidity and postoperative complications were assessed using univariate and multivariate analyses. Results: A total of 189 patients (62.4%) had one or more comorbidities. Hypertension was the most common comorbidity (37.0%), followed by diabetes mellitus (17.8%), chronic viral hepatitis (2.6%), liver cirrhosis (2.6%), and pulmonary (27.1%), ischemic heart (3.3%), and cerebrovascular diseases (2.3%). The overall postoperative morbidity and mortality rates were 20.1% and 1.0%, respectively. Patients with pulmonary disease significantly showed higher complication rates than those without comorbidities (32.9% vs. 14.9%, respectively, P=0.003); patient with other comorbidities showed no significant difference in the incidence of LTG-related complications. During univariate and multivariate analyses, pulmonary disease was found to be an independent predictive factor for postoperative complications (odds ratio, 2.14; 95% confidence interval, 1.03-4.64), along with old age and intraoperative bleeding. Conclusions: Among the various comorbidities investigated, patients with pulmonary disease had a significantly higher risk of postoperative complications after LTG. Proper perioperative care for optimizing pulmonary function may be required for patients with pulmonary disease.
Carbonization products C1, C2, C3, C4 and C5 were prepared by the carbonization of date pit in limited air, at 500, 600, 700, 800 and $1000^{\circ}C$, respectively. C1-V-600, C3-V-600, C1-V-1000 and C3-V-1000 were prepared by thermal treatment of C1 and C3 under vacuum at 600 and $1000^{\circ}C$. The textural properties were determined from nitrogen adsorption at 77 K and from carbon dioxide adsorption at 298 K. The surface pH, the FTIR spectra and the acid and base neutralization capacities of some carbons were investigated. The amounts of surface oxygen were determined by out-gassing the carbon-oxygen groups on the surface as $CO_2$ and CO. The adsorption of water vapor at 308 K on C1, C2, C3 and C4 was measured and the decomposition of $H_2O_2$ at 308 K was also investigated on C1, C2, C3, C4 and C5. The surface area and the total pore volume decreased with the rise of the carbonization temperature from 500 to $1000^{\circ}C$. The adsorption of water vapor is independent on the textural properties, while it is related to the amount of acidic carbon-oxygen groups on the surface. The catalytic activity of $H_2O_2$ decomposition does not depend on the textural properties, but directly related to the amount of basic carbon-oxygen complexes out-gassed as CO, at high temperatures.
Nitric oxide (NO)-mediated relaxation in vascular smooth muscle involves not only activation of guanylate cyclase but also hyperpolarization of the membrane. It has been shown that depolarization decreases the [$Ca^{2+}$] sensitivity of myosin light chain kinase in arterial smooth muscle, and nitric oxide (NO)-mediated relaxation was attenuated in this situation. However, why potassium inhibits or attenuates the action of EDRF/NO is not clear. Therefore, we investigated the magnitude of relaxation and cGMP contents using measures known to release NO, such as photorelaxation, photo activated NO-mediated relaxation, and NO-donor (SNP)-mediated relaxation in porcine coronary arterial rings in which contractile conditions were made by different degree of depolarization, i.e., contraction in response to U46619 or U46619 plus KCl. In all cases, the magnitude of relaxation was significantly greater (P<0.05) in U46619-contracted rings than in U46619+KCl-contracted ones. Although accumulation of cGMP was evident with three measures employed in the present study, no difference was found in cGMP contents between U46619 and U46619+KCl conditions, indicating that the diminished relaxation in KCl containing solution is cGMP-independent mechanism(s). To understand this further, cytosolic $Ca^{2+}$ changes due to NO were compared in rat thoracic aorta by exploiting photoactivated NO using streptozotocin (STZ) that was contracted with either NE or KCl. Fura-3 $[Ca]_{cyt}$ signal caused by NO was small and transient in high $K^+$-, but large and sustained in NE-contracted aorta. The inhibitory potency of STZ expressed in terms of $IC_{50}$ was 5.14 and 3.88 ${\mu}M$ in NE and in high $K^+$, respectively. These results suggest that modification of the cellular mobilization of $Ca^{2+}$ rather than cGMP levels may be an important mechanism for the NO-mediated relaxation when vascular membrane is depolarized, such as atherosclerosis and hypertension.
The theory and practice of water quality scoring and indexing are introduced. The monthly water analysis data are available for six stations long the down-stream Han River whthin the areal boundary of the Special City of Seoul. The data cover the period between 1975 and 1979 inclusive and contain the analytical findings on 37 water constituents including DO, BOD, temperature, total solids and etc. Sic parameters are selected form the 37 items, that, to the judgement of the writer, best reflect the water quality of the Han River. They are; dissolved oxggen saturation, pH, fecal coliform, total solids, BOD and nitrate+ammonia. For each of the six parameters, a subscore function is developed and graphically presented to facilitate the transform of a measurment of the arameter to a subscore on a common score(e.G. 0-100) The score of a sample is calculated as a fuction of the six subscores, using four different approaches; (1) the unweighted arithmetic water quality score, (2) the weighted arithmetic water quality score, (3)the unweighted multiplicative score and (4) the reduced (total) score. Independent of these calculated scores, the experts' score which is calculated by averaging the ratings of water quality experts is obtained and compared with each of the four calculated scores by means of the least square method. The experts' score compares most favorably with the "reduced" score with the correlation coefficient of 0.956 : therefore this method of water quality scoring is adopted to calculate the Han River water quality scores and indices. Water quality index data for Guiri, ukdo, Pokwangdong, Noryangjin, Yongdungpo and Kayang Stations, 1975-1979 are as follow: The overall water quality index data of the Han River between Guiri and Kayang Stations are found; 47.3 in 1976, 48.0 in 1977, 48.5 in 1978 and 54.7 in 1979, indicating the general trend towards water quality improvent in this part of the river, in terms of the increased water quality index by average 1.85 points per year during this period. Finally the optimum sampling frequencies distributed among the six stations, using an equation which takes into account the coefficients of variation of the water quality scores and indices arec calculated.alculated.
Second-order rate constants ($k_{HOO}$‒) have been measured spectrophotometrically for nucleophilic substitution reactions of Y-substituted phenyl benzenesulfonates (1a-g) with $HOO^-$ ion in $H_2O$ at $25.0\;{\pm}\;0.1\;{^{\circ}C}$. The Br$\phi$nsted-type plot is linear with ${\beta}_{lg}$ = ‒0.73. The Hammett plot correlated with with ${\sigma}^-$ constants results in much better linearity than ${\sigma}^o$ constants, indicating that expulsion of the leaving group occurs in the rate-determining step (RDS) either in a stepwise mechanism or in a concerted pathway. However, a stepwise mechanism in which departure of the leaving group occurs in the RDS has been excluded since $HOO^-$ ion is more basic and a poorer leaving group than the leaving Y-substituted phenoxide ions. Thus, the reactions of 1a-g with $HOO^-$ ion have been concluded to proceed through a concerted mechanism. The $\alpha$-nucleophile $HOO^-$ ion is more reactive than its reference nucleophile $OH^-$ ion although the former is ca. 4 p$K_a$ units less basic than the latter (i.e., the $\alpha$-effect). TS stabilization through intramolecular H-bonding interaction has been suggested to be irresponsible for the $\alpha$-effect shown by $HOO^-$ ion, since the magnitude of the $\alpha$-effect is independent of the electronic nature of substituent Y in the leaving group. GS destabilization through desolvation of $HOO^-$ ion has been concluded to be responsible for the $\alpha$-effect found in the this study.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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