• 한국식품영양과학회지
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• 제33권9호
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• pp.1486-1491
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• 2004

식품오염 관련 중금속들의 에스트로겐성을 in vitro 와 in vivo 분석방법을 병행하여 평가하였다. 분석방법은 1) estrogen receptor dependent transcriptional expression 분석법, 2) E-screen assay 그리고, 3) 마우스 자궁비대시험 (uterotropic assay)을 사용하였다. 시험에 사용한 물질로는 $17\beta$-estradiol, diethylstilbestrol(DES), arsenic oxide, bis (tri-n-butyltin), cadmium chloride, chromium chloride, lead acetate, mercuric chloride을 사용하였다. Estrogen receptor dependent transcriptional expression 분석 결과, bis(tri-nbutyltin) > cadmium chloride > chromium chloride 순으로 에스트로겐성이 크게 나타났으며, mercuric chloride, lead acetate, arsenic oxide는 거의 나타나지 않았다. E-screen test 결과, bis(tri-n-butyltin) > cadmium chloride > chromium chloride 순으로 에스트로겐성이 크게 나타났으며, mercuric chloride, lead acetate, arsenic oxide는 거의 나타나지 않았다. 자궁비대시험 결과도 마찬가지로 bis(tri-nbutyltin), cadmium chloride, chromium chloride은 자궁중량 비대를 크게 초래하였으며, 반면에 mercuric chloride, lead acetate, arsenic oxide는 그러한 효과가 미약하거나 없었다. 세 분석방법 결과 bis(tri-n-butyltin), cadmium chloride, chromium chloride 순으로 에스트로겐성이 크게 나타났다. 이러한 결과는 최근 bis(tri-n-butyltin)과 cadmium chloride이 에스트로겐성이 있다는 다른 연구결과들과 잘 일치하며, 또한 크롬화합물도 에스트로겐성이 있다는 것을 새롭게 제시하고 있다. 본 연구는 세 단계 수준(전사활성화단계, 세포증식작용, in vivo assay)의 분석을 병행함으로써 수많은 중금속의 에스트로겐성을 효과적으로 평가할 수 있다는 것을 제시해주고 있다.

• Advances in Traditional Medicine
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• 제6권2호
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• pp.126-133
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• 2006

The cardiovascular drug nifedipine exhibited significant in vitro and in vivo antibacterial activity against 331 strains of bacteria belonging to three Gram-positive and twelve Gram-negative genera. The minimum inhibitory concentration of the drug, as determined both by agar and broth dilution methods, was seen to range from $25\;-\;200\;{\mu}g/ml$ against most test bacteria, including several pathogenic ones, in the in vitro studies. Nifedipine was bacteriostatic in action. in vivo studies with this drug showed that it could offer statistically significant protection (P < 0.001) to mice challenged with a virulent bacterium. Therefore, nifedipine has the potential of an antibacterial agent, which may be developed after further pharmacological studies.

• 약학회지
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• 제57권2호
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• pp.95-100
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• 2013

This study was performed to analyze in vitro and in vivo activities of LCB01-0183, a new oxazolidinone, against clinical isolates of bacteria. In vitro antibacterial activity of LCB01-0183 was tested by the two fold agar dilution method. In vivo activity of LCB01-0183 was determined against systemic infections in mice. LCB01-0183 showed most potent activity among the test compounds against clinical isolates of Gram-positive bacteria. Furthermore, the protective activity of LCB01-0183 was very effective against systemic infections in mice by oral or subcutaneous administration. In time kill study, LCB01-0183 showed a bacteriostatic activity during 24 hours. LCB01-0183 had potent in vitro and in vivo activity against Gram-positive bacteria including drug-resistant strains.

• 한국식품영양과학회지
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• 제29권4호
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• pp.726-731
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• 2000

본 연구에서는 단 삼(Salvia miltiorrhiza)의 추출물이 인체 결장암세포인 HT-29, 간암세포인 HepG2 및 직장 암세포인 HRT-18의 증식에 미치는 영향을 in vitro에서 확인하였다. 암세포의 배양액에서 단삼의 수용성 추출물과 에탄올 추출물의 암세포 증식억제효과는 농도에 비례하여 에탄올 추출물에서 더 효과적이었다. 이를 토대로 단삼의 에탄올 추출물의 급성독성, 수명연장 및 고형암형 성억제를 살펴보기 위해 in vivo 실험을 하였다. 급성독성실험결과 대조군의 15일 째의 평균체중은 32.3 g 이었고 실험군은 31.6 g으로 정상적인 상태를 유지하였으며, 흰쥐의 육종암세포인 sarcoma-180를 접종한 mouse의 수명연장실험결과 대조군에 비해 61%의 수 명연장 효과가 있음을 관찰하였다. 고형암억제 실험 결과에서도 대조군에 비해 에찬올 추출 물 처리군이 35%의 고형암 형성억제능을 나타내었다. 따라서 단삼의 에탄올 추출물 중에는 in vitro와 in vivo 실험을 통해 항암활성을 갖는 성분이 존재하며, 이성분은 유효한 항암제 로 개발될 수 있으리라 사료된다.

• 한국가금학회지
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• 제30권1호
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• pp.41-47
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• 2003

본 실험에서는 항생제 대체물질 탐색의 일환으로 톳에서 추출한 crude fucoidan의 미생물에 대한 항균능력을 in vitro 및 in vivo 상에서 검토하였고, 병아리 장내 응모의 형태적 변화에 대해 조사하였다. 본 실험에서는 갓 부화한 육계 수평아리 84두를 7처리 3반복으로 반복당 4수를 공시하여 3일령에 Salmonella typhimurium을 감염시킨 오염구와 비오염구를 두었으며, 오염구에는 항생제, fucoidan, 톳건조분말, 미역건조분말 및 yeast cell debris를 첨가하였다. 국내산 톳분말에서 추출한 조 fucoidan의 추출 수율은 5.45%로 비교적 높은 추출율을 나타냈다. in vitro 실험에서 fucoidan의 항균능력은 inhibition zone test 및 미생물 성장 실험결과 확인되지 않았다. in vivo실험에서 육계 초생추의 성장률은 fucoidan 첨가구와 YCD 첨가구가 대조구 및 다른 처리구에 비하여 높은 경향을 보였으나, 유의적인 차이는 없었다. 또한 in vivo 실험에서 Salmonella typhimurium에 대한 균의 출현율 및 생균수는 항생제 첨가구와 fucoidan 첨가구에서 낮게 나타났다. 각점막 융모의 길이는 fucoidan 첨가구와 해조류 건조분말 첨가 시 짧아진 경향을 나타내었으며, 대부분 대장벽면에 매우 촘촘하게 분포되어 있었으며, 형태는 처리구별로 크게 다르지 않았다. 따라서 본 실험의 결과만으로 fucoidan이 항생제 대체물질로 이용될 가능성을 명확하게 제시할 수는 없었으나, 연구할 가치는 충분히 있는 물질임이 확인되었다.

• Nutrition Research and Practice
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• 제4권3호
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• pp.177-182
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• 2010

The Chaga mushroom (Inonotus obliquus) has been used in folk medicine to treat cancers. However, limited information exists on the underlying anticancer effects of the major component of I. obliquus in vivo. We hypothesize that the pure compounds ($3{\beta}$-hydroxy-lanosta-8,24-dien-21-al, inotodiol and lanosterol, respectively) separated from I. obliquus would inhibit tumor growth in Balbc/c mice bearing Sarcoma-180 cells (S-180) in vivo and growth of human carcinoma cells in vitro. To test this hypothesis, the growth inhibition of each subfraction isolated from I. obliquus on human carcinoma cell lines (lung carcinoma A-549 cells, stomach adenocarcinoma AGS cells, breast adenocarcinoma MCF-7 cells, and cervical adenocarcinoma HeLa cells) was tested in vitro. Then, after S-180 implantation, the mice were fed a normal chow supplemented with 0, 0.1 or 0.2 mg of subfraction 1, 2 or 3 per mouse per day. All of the subfractions isolated from I. obliquus showed significant cytotoxic activity against the selected cancer cell lines in vitro. Subfraction 1 was more active than subfraction 2 and subfraction 3 against the A549, AGS and MCF-7 cancer cell lines in vitro. In in vivo results, subfraction 1 isolated from I. obliquus at concentrations of 0.1 and 0.2 mg/mouse per day significantly decreased tumor volume by 23.96% and 33.71%, respectively, as compared with the control. Subfractions 2 and 3 also significantly inhibited tumor growth in mice bearing S-180 as compared with the control mouse tumor. Subfraction 1 isolated from I. obliquus showed greater inhibition of tumor growth than subfractions 2 and 3, which agrees well with the in vitro results. The results suggest that I. obliquus and its compounds in these subfractions isolated from I. obliquus could be used as natural anticancer ingredients in the food and/or pharmaceutical industry.

• Molecular & Cellular Toxicology
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• 제2권3호
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• pp.176-184
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• 2006

The controversy on genotoxicity of molinate, an herbicide, has been reported in bacterial system, and in vitro and in vivo mammalian systems. To clarify the genotoxicity of molinate, we performed bacterial gene mutation test, in vitro chromosome aberration and mouse lymphoma $tk^{+/-}$ gene assay, and in vivo micronucleus assay using bone marrow cells and peripheral reticulocytes of mice. In bacterial gene mutation assay, no mutagenicity of molinate ($12-185{\mu}g/plate$) was observed in Salmonella typhimurium TA 98, 100, 1535 and 1537 both in the absence and in the presence of S-9 metabolic activation system. The clastogenicity of molinate was observed in the presence ($102.1-408.2\;{\mu}g/mL$) of metabolic activation system in mammalian cell system using Chinese hamster lung fibroblast. However, no clastogenicity was observed in the absence ($13.6-54.3\;{\mu}g/mL$) of metabolic activation system. It is suggested that the genotoxicity of molinate was derived some metabolites by metabolic activation. Molinate was also subjected to mouse lymphoma L5178Y $tk^{+/-}$ cells using microtiter cloning technique. In the absence of S-9 mixture, mutation frequencies (MFs) were revealed $1.4-1.9{\times}10^{-4}$ with no statistical significance. However, MFs in the presence of metabolic activation system revealed $3.2-3.4{\times}10^{-4}$ with statistical significance (p<0.05). In vivo micronucleus (MN) assay using mouse bone marrow cells, molinate revealed genotoxic potential in the dose ranges of 100-398 mg/kg of molinate when administered orally. Molinate also subjected to acridine orange MN assay with mouse peripheral reticulocytes. The frequency of micronucleated reticulocytes (MNRETs) induced 48 hr after i.p. injection at a single dose of 91, 182 and 363 mg/kg of molinate was dose-dependently increased as $10.2{\pm}4.7,\;14.6{\pm}3.9\;and\;28.6{\pm}6.3\;(mean{\pm}SD\;of\;MNRETs/2,000\;reticulocytes)$ with statistical significance (p<0.05), respectively. Consequently, genotoxic potential of molinate was observed in in vitro mammalian mutagenicity systems only in the presence of metabolic activation system and in vivo MN assay using both bone marrow cells and peripheral reticulocytes in the dose ranges used in this experiment. These results suggest that metabolic activation plays a critical role to express the genotoxicity of molinate in in vitro and in vivo mammalian system.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제48권4호
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• pp.161-166
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• 2005

Among 24 isolates of fluorescent Pseudomonads, 5 isolates named as LPT1, LPT2, LPT3, LPT4 and LPT5 were screened in vitro for their nematicidal activity against cyst forming nematode, Heterodera cajani causing patchiness, poor and stunting growth besides discoloration in Sesamum indicum. Second stage juveniles of H. cajani hatched from egg masses were collected from roots of host plant and subjected to fresh and heat-treated culture filtrate of isolates for 24 h. Mortality of H. cajani was recorded on the basis of parameters used for test organism bioassay. Among these isolates, Pseudomonas aeruginosa LPT5 caused maximum mortality towards second stage juvenile of H. cajani in vitro. Five isolates were used as seed coating for the management of cyst forming nematode H. cajani on sesame in green house condition. The strains LPT5 was better than the other strains in reducing the population of H. cajani both in vitro and in vivo. The reduction in cyst and juveniles population was found to be 49 and 60%, respectively when seeds were coated with strain LPT5. Among other strains, LPT4 was also found to inhibit the cyst and juveniles population 12 and 36% respectively. Increases in early vegetative plant growth parameters recorded in both in vitro and in vivo further revealed the significance of indigenous bacteria in comparison to introduced strain.

• 대한화장품학회지
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• 제22권1호
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• pp.84-101
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• 1996

동물시험을 최소화 하고, 동물시험에 사용되는 노력과 비용을 줄이기 위해 동일한 동물에서 광독성과 광알러지성을 함께 보는 새로운 방법을 제안하고, in vitro alternatives로서 photostability와 spectrophotometric carbonyl assay의 유용성을 검토하였다. Modified photosensitization model에서는 Ichikawa 방법과는 달리 동물수, 휴식 기간, 첩포 횟수를 단순히하고 폐쇄 첩포를 추가하였다. 방법의 유용성을 보기 위해 Benzocaine, 6-methyl coumarine을 Ichikawa 방법 및 본 시험 방법으로 결과를 비교한 결과 macroscopic, histologic examination에서 비슷한 결과를 얻었다. Photostability 시험에서는 pbotoreactive agent 들이 모두 20%이상의 흡광도 감소를 보여 pbotosensitization potential을 측정하기 위한 전 단계 실험으로서의 가능성을 보여주었고, spectrophotometric carbonyl assay에서는 salmonella를 이용한 광독성 실험에서는 나타나지 않았던 저농도의 Amthracene, Hematoporphyrin에서 조차도 phtotoxic prtential을 보여주어 in vitro alternatives로서의 가능성을 보여주었다.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제24권3호
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• pp.347-353
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• 1997

본 실험은 초자화 동결된 생쥐 배반포기배의 융해 후 배양조건 및 이식방법이 난자의 생존에 미치는 효과를 조사하고자 실시하였다. 체외수정후, M16배양액에서 4일동안 배양하여 얻어진 생쥐 배반포기배는 EFS40 (40% ethylene glycol, 18% Ficoll, 0.5 M sucrose가 함유된 PBS)으로 초자화동결하였다. 실험 I에서는 융해 후 배양조건에 따른 난자들의 체외/체내 생존율을 조사하였다. 융해된 난자가 M16과 4 mg/ml 소혈청알부민과 20 가지 아미노산이 함유된 m-CR1 (2% BME 아미노산 용액, 1% MEM 아미노산 용액) 및 단층배양이 유도된 난구세포 (10% FBS가 함유된 m-CR1배양액)에서 각각 배양되었을 때, 융해 후 24시간째 체외 생존율은 배양조건에 따라 차이가 없었다(75.6, 83.1, 82.4%). 그러나 체내 발달율에 있어서 임신 15일째 생존 산자율은 39.0, 49.0, 38.1%로서 유사한 성적을 나타냈으나, 전체 착상율에 있어서는 m-CR1 (80.4%)에 배양되었을 때, M16 (51.2%), 난구세포와 공배양시 (57.1%)보다 유의하게 높은 생존율을 보였다(p<0.05). 실험 II에서는 수정란 이식 방법에 따른 체내 발달율을 조사하였다. 배반포기배를 융해 후 체외배양없이 곧바로 가임신 2, 3일째 대리모에 이식을 실시하였을 때, 가임신 2일째 대리모에서는 임신징후를 얻지 못하였고, 가임신 3일째 대리모에서는 50.0%의 착상율과 15.4%의 정상산자율을 얻었다. 그러나, 이러한 결과는 융해 후, 16시간 배양하여 가임신 3일째 대리모에 이식 (73.5, 57.1%)하는 경우보다 유의하게 낮은 결과였다(p<0.05). 실험 III에서는 초자화 동결된 배반포기배의 융해 후 배양시 발달이 늦어진 수정란의 이용효율을 극대화시키기 위해 융해한 4일째 초기, 5일째 초기, 5일째 팽창 배반포기배의 체외/체내 생존율을 조사하였다. 가장 높은 체외 생존율은 5일째 팽창 배반포기배 (78.3%)에서 얻었으나, 체내 발달율 (산자율, 착상율)에 있어서는 4일째 초기 배반포기배 (33.3, 66.7%)의 경우가, 5일째 팽창 배반포기배(29.0, 38.7%)의 경우보다 높았다(p<0.05). 따라서 본 연구의 결과는 배양조건과 수정란 이식방법에 따라 초자화 동결된 배아의 체외/체내 발달율을 높일 수 있으며, 발달이 늦은 배반포기배의 체내 발달율은 체외 배양시간이 길어질수록 낮아짐으로, 5일째 팽창 배반포기배보다 4일째 초기 배반포기배를 동결하는 것이 더 유용하다는 것을 알 수 있었다.