The purpose of this Study was to investigate effect of TakliSodokSan(TSS) on the anti-tumor, immunocytes and nitric oxide(NO) production from mice peritoneal macrophages. This Study estimated the proliferation of L1210 cell lines, A431 cell lines, Hep-G2 cell lines, K562 cell lines, 3T3 cell lines, mouse thymocytes and mouse splenocytes and NO production from pcritoneal macrophages in vitro, and estimated the proliferation of L1210 cells, thymocytes and splenocytcs, NO production from peritoneal macrophages and body weight in L1210 cells-transplanted mice in vivo. The results were obtained as follows; 1. TSS inhibited significantly the proliferation of L1210, A431, Hep-G2, K562 cell lines in vitro. 2. TSS accelerated the proliferation of mice thymocytes and splenocytes in vitro. 3. TSS was not increased the nitric oxide production from mice peritoneal macrophages in vitro. 4. TSS inhibited significantly the proliferation of L1210 cells in Ll210 cells∼transplanted mice. 5. TSS accelerated the proliferation of mice thymocytes and splenocytes In L1210 cells-transplanted mice. 6. TSS was increased significantly the nitric oxide production from mice peritoneal macrophages in L1210 cells-transplanted mice. 7. TSS was increased the body weight as comparing with control group in Ll210 cells-transplanted mice.
Smitha Devi, Padmavathi Amma Somasekharan Nair;Hemanthakumar, Achuthan Sudarsanan;Preetha, Thankappan Suvarna
Journal of Plant Biotechnology
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제49권3호
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pp.230-239
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2022
Holostemma annulare (Family Asclepiadaceae) is an invaluable vulnerable medicinal plant; the root tubers are used in Ayurveda medicine and by folk healers to treat various ailments. In this study, Schenk and Hildebrandt medium fortified with the cytokinins 6-benzyl adenine, kinetin, and auxins, including indole 3-butyric acid, indole 3-acetic acid, α-naphthaleneacetic acid, and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, were checked for their efficiency on root tuber induction from different explants. Adventitious root tubers were more successfully induced from in vitro leaf segments and shoots when cultured in Schenk and Hildebrandt medium supplemented with 0.5 mg/l of α-naphthaleneacetic acid. In addition, preliminary phytochemical analysis of in vitro root tubers and identification of different secondary metabolites were conducted. Thin layer chromatography and high performance thin layer chromatography analysis of the crude methanolic extracts of the in vitro root tuber identified the presence of lupeol, a bioactive triterpene. Adventitious root tuber induction offers a novel method for the in vitro production of bioactive metabolites that can be scaled up by bioreactors, thus ensuring the conservation and sustainable utilization of H. annulare. The study warrants further scale-up production and pharmacological investigation that can be extended for pharmaceutical needs.
Sexing and developing from splitted embryos which were fertilized in vitro implicate a possibility of production of the superior and sex controlled individuals. This study was carried out to investigate the production of transferable late blastocysts from in vitro fertilized embryos and to analyze sex by chromosome analysis from same embryos. In results, the ratio of cleavage and fertility of bovine follicular oocytes matured in vitro was 90% in co-cultured with granulosa cells. The competence of embryonic development from in vitro matured and fertilized bovine oocytes was 38% in co-cultured with bovine oviductal epithelial cells. To produce a lot of transferable embryos, therefore, the best conditon of culture system was co-cultured with granulosa cells for immature bovine oocytes and then co-cultured with bovine oviductal eptithelial cells for matured and fertilized oocytes. In chromosome analysis, 93% of in vitro fertilized embryos were very important aspect in chromosome preparation from bovine embryos such as duration of colcemid treatment, weakening of zona pellucida, methods of hypotonic treatment and fixation treatment.
Biotechnologies for cloning animals and in vitro embryo production have the potential to produce biomedical models for various researches. Especially, pigs are a suitable model for xenotransplantation, transgenic production and various areas of reproductive research due to its physiological similarities to human. However, utilization of in vitro-produced embryos for transfer remains limited. Despite improvement over past few decades, obstacles associated with the production of good quality embryos in vitro still exist which limit the efficiency of cloning. One of major problems includes improper in vitro maturation (IVM) and culture (IVC). Oxidative stress caused from in vitro culture conditions contributes to inadequate IVM and IVC which leads to poor developmental competence of oocytes, failure of fertilization and embryo development. To reduce the oxidative stress, various antioxidants have been used to IVM and IVC system. However, limited information is available on the effects of resveratrol on livestock reproductions. Resveratrol is a polyphenolic natural product and well known as an antioxidant in foods and beverages (e.g. in grapes and red wine). Resveratrol is known to be cardioprotective, anticarcinogenic, anti-inflammatory, antioxidant and antiapoptotic. This paper will review the effects of resveratrol on in vitro maturation of oocytes and embryo development.
An adventitious root formation protocol from Smilax china L. was established for in vitro production of dioscin, a steroidal saponin having various bioactivities such as anticancer, antifungal, antiviral, and antiobesity. Optimal medium for root initiation from leaf explant was MS medium containing $30\;g{\cdot}L^{-1}$ of sucrose supplemented with $1.0\;mg{\cdot}L^{-1}$ kinetin + $2.0\;mg{\cdot}L^{-1}$ NAA. The induction of adventitious roots from in vitro initiated root segments was most favorable to MS liquid medium with $0.1\;mg{\cdot}L^{-1}$ kinetin + $2.0\;mg{\cdot}L^{-1}$ NAA. Among the 20 different adventitious roots originated from different plants, strain No. 10 was selected based on production ability of dioscin, and its stability through the successive suspension culture. The maximum growth stage of adventitious roots was noticed at 5 weeks after subculture while that of dioscin production in the adventitious root was at 7 weeks after subculture in suspension culture system. These results provide that suspension culture of adventitious roots of Smilax china L. have a potential for in vitro mass production of dioscin.
The in-vitro meat is a novel concept in food biotechnology comprising field of tissue engineering and cellular agriculture. It involves production of edible biomass by in-vitro culture of stem cells harvested from the muscle of live animals by self-organizing or scaffolding methodology. It is considered as efficient, environmental friendly, better ensuring public safety and nutritional security, as well as ethical way of producing meat. Source of stem cells, media ingredients, supply of large size bioreactors, skilled manpower, sanitary requirements, production of products with similar sensory and textural attributes as of conventional meat, consumer acceptance, and proper set up of regulatory framework are challenges faced in commercialization and consumer acceptance of in-vitro meat. To realize any perceivable change in various socio-economic and environmental spheres, the technology should be commercialized and should be cost-effective as conventional meat and widely accepted among consumers. The new challenges of increasing demand of meat with the increasing population could be fulfill by the establishment of in-vitro meat production at large scale and its popularization. The adoption of in-vitro meat production at an industrial scale will lead to self-sufficiency in the developed world.
In vitro experiments were conducted to evaluate the suitability of several mixtures of high tanniniferous non legumes with low tanniniferous legumes on in vitro gas production (IVGP), dry matter degradation, Ammonia-N, methane production and microbial population. Eight treatments were examined in a randomized complete block design using four non-legumes and two legumes (Carallia integerrima${\times}$Leucaena leucocephala (LL) (Trt 1), C. integerrima${\times}$Gliricidia sepium (GS) (Trt 2), Aporosa lindeliyana${\times}$LL (Trt 3), A. lindeliyana${\times}$GS (Trt 4), Ceiba perntandra${\times}$LL (Trt 5), C. perntandra${\times}$GS (Trt 6), Artocarpus heterophyllus${\times}$LL (Trt 7), A. heterophyllus${\times}$GS (Trt 8). The condensed tannin (CT) content of non legumes ranged from 6.2% (Carallia integerrima) to 4.9% (Ceiba perntandra) while the CT of legumes were 1.58% (Leucaena leucocephala) and 0.78% (Gliricidia sepium). Forage mixtures contained more than 14% of crude protein (CP) while the CT content ranged from 2.8% to 4.0% respectively. Differences (p<0.05) were observed in in vitro gas production (IGVP) within treatments over a 48 h period dominated by C. perntandra${\times}$G. sepium (Trt 6). The net gas production (p<0.05) was also high with Trt6 followed by A. heterophyllus${\times}$L. leucocephala (Trt 7) and A. heterophyllus${\times}$G. sepium (Trt 8). Highest (p>0.05) NH3-N (ml/200 mg DM) production was observed with the A. heterophyllus${\times}$G. sepium (Trt 8) mixture which may be attributed with it's highest CP content. The correlation between IVGP and CT was 0.675 while IVGP and CP was 0.610. In vitro dry matter degradation (IVDMD) was highest in Trt 8 as well. Methane production ranged from 2.57 to 4.79 (ml/200 mg DM) to be synonimous with IVGP. A higher bacteria population (p<0.05) was found in C. perntandra${\times}$G. sepium (Trt 6) followed by Artocarpus heterophyllus+G. sepium (Trt 8) and the same trend was observed with the protozoa population as well. The results show that supplementing high tannin non leguminous forages by incremental substitution of legume forage increased gas production parameters, NH3-N, IVDMD and microbial population in the fermentation liquid. Methane production was not significantly affected by the presence of CT or different levels of CP in forage mixtures. Among non legumes, Ceiba perntandra and Artocarpus heterophyllus performed better in mixture with L. leucocephala and G. sepium.
The oocyte undergoes various events during in vitro maturation (IVM) and subsequence development. One of the events is production of reactive oxygen species (ROS) that is a normal process of cell metabolism. But imbalances between ROS production and antioxidant systems induce oxidative stress that negatively affect to mammalian reproductive process. In vitro environments, in vitro matured oocytes have many problems, such as excessive production of ROS and imperfect cytoplasmic maturation. Therefore, in vitro matured oocytes still have lower maturation rates and developmental competence than in vivo matured oocytes. In order to improve the IVM and in vitro culture (IVC) system, antioxidants, vitamins were added to the IVM, IVC medium. Antioxidant supplementation was effective in controlling the production of ROS and it continues to be explored as a potential strategy to overcome mammalian reproductive disorders. Based on these studies, we expect that the use of antioxidants in porcine oocytes could improved maturation and development rates.
Production of calves after transfer of nuclear transplant embryos is the latest technology to be applied in commercial livestock breeding. The objective of this study was to establish an efficient procedure to produce offsprings from nuclear transplant embryos. The fusion rates (72.7% vs. 80.8%), cleavage rates (62.5% vs. 71.4%) and rates of development in vitro (12.0% vs. 15.2%) of nuclear transplant embryos were not significantly different between 30 and 40h maturation age of cytoplast. The in vivo and in vitro-derived embryos as nuclei donor were used in this system of bovine nuclear transplantation. Fusion rates of nuclear transplant embryos were not significantly different between in vivo and in vitro-derived embryos (73.0 and 79.2%, respectively). The percentage of embryos reaching the morulae or blastocysts were 21.8% for in vivo-derived embryos and 11.9% for in vitro-derived embryos (p<0.01). Pregnancy rates after embryo transfer of nuclear transplant embryos were not significantly different between in vivo and in vitro-derived embryos (45.9 and 40.5%, respectively). However, calving rates after embryo transfer of nuclear transplant embryos were significantly higher in the in vivo-derived embryos than in vitro (p<0.01). Further research for age of cytoplast and use of in vitro-derived embryos as nuclei donor is required in this system. In conclusion, these results clearly show that the use of in vitro-derived oocytes as recipient cytoplast can improve the nuclear transplant system for genetic progress in cattle.
The objective of this study was to evaluate the effects of halogenated compounds, organic acids, unsaturated fatty acids and their mixtures on in vitro methane production and fermentative characteristics of mixed rumen microorganisms. Agents used in two in vitro experiments were bromoethanesulfonic acid (BES) and pyromellitic diimide (PMDI) as halogenated compound, fumarate and malate as organic acid, and linoleic acid and linolenic acid as unsaturated fatty acid sources. Ruminal fluid collected from a Holstein steer fed tall fescue and concentrate mixtures was incubated at $39^{\circ}C$ for 48 h with addition of those materials. Single supplementation of halogenated compounds, organic acids or unsaturated fatty acids decreased in vitro methane production (p<0.05). The second experiment was designed to investigate effects of combination of one of halogenated compounds and either organic acids or fatty acids on methane production. Lower concentration of methane and lower A:P ratio were observed with PMDI compared with BES (p<0.01). In general medium pH, VFA, total gas and hydrogen production, and dry matter degradability were affected by addition of the same compounds. In addition, PMDI+malate treatment resulted in the highest molar proportion of propionate, and lowest A:P ratio and methane production (p<0.01). Hydrogen production was highest in PMDI+linolenic acid and lowest in BES+malate treatment (p<0.01). PMDI+malate combination was the most recommendable in reducing methane production without too much influence on digestibility under conditions of present studies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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