Objective: This research investigated the effects of human chorionic gonadotropin (HCG)-producing peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) on the implantation rate and embryo attachment in mice. Methods: In this experimental study, a DNA fragment of the HCG gene was cloned into an expression vector, which was transfected into PBMCs. The concentration of the produced HCG was measured using enzyme-linked immunosorbent assay. Embryo attachment was investigated on the co-cultured endometrial cells and PBMCs in vitro. As an in vivo experiment, intrauterine administration of PBMCs was done in plaque-positive female mice. Studied mice were distributed into five groups: control, embryo implantation dysfunction (EID), EID with produced HCG, EID with PBMCs, and EID with HCG-producing PBMCs. Uterine horns were excised to characterize the number of implantation sites and pregnancy rate on day 7.5 post-coitum. During an implantation window, the mRNA expression of genes was evaluated using real-time polymerase chain reaction. Results: DNA fragments were cloned between the BamHI and EcoRI sites in the vector. About 465 pg/mL of HCG was produced in the transfected PBMCs. The attachment rate, pregnancy rate, and the number of implantation sites were substantially higher in the HCG-producing PBMCs group than in the other groups. Significantly elevated expression of the target genes was observed in the EID with HCG-producing PBMCs group. Conclusion: Alterations in gene expression following the intrauterine injection of HCG-producing PBMCs, could be considered a possible cause of increased embryo attachment rate, pregnancy rate, and the number of implantation sites.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제33권2호
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pp.81-93
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2007
Purpose: Adenoid cystic carcinoma (ACC) is a relatively rare tumor that arises in glandular tissues of the head and neck region and sometimes has a protracted clinical course with perineural invasion and delayed onset of distant lung metastasis. Treatment failure of salivary ACC is most often associated with perineural and hematogenous tumor spread. However, very little has been known about the cellular and molecular mechanisms of perineural invasion and hematogenous distant metastasis of parotid ACC. This study was designed to develop an orthotopic tumor model of parotid adenoid cystic carcinoma in athymic nude mice. Experimental Design: A melanoma cell line was injected into the parotid gland of athymic mice to determine whether such implantation was technically feasible. A parotid ACC cell line was then injected into the parotid gland or the subcutaneous tissue of athymic mice at various concentrations of tumor cells, and the mice were thereafter followed for development of tumor nodule. The tumors were examined histopathologically for perineural invasion or regional or distant lung metastasis. We used an oral squmous cell carcinoma cell line as control. Results: Implantation of tumor(melanoma) cell suspension into the parotid gland of nude mice was technically feasible and resulted in the formation of parotid tumors. A parotid ACC cell line, ACC3 showed no significantly higher tumorigenicity, but showed significantly higher lung metastatic potential in the parotid gland than in the subcutis. In contrast, mucosal squmous cell carcinoma cell line doesn’t show significantly higher lung metastatic potential in the parotid gland than in the subcutis. The ACC tumor established in the parotid gland seemed to demonstrate perineural invasion of facial nerve, needs further study. Conclusion: An orthotopic tumor model of salivary ACC in athymic nude mice was successfully developed that closely recapitulates the clinical situations of human salivary ACC. This model should facilitate the understanding of the cellular and molecular mechanisms of tumorigenisis and metastasis of salivary ACC and aid in the development of targeted molecular therapies of salivary ACC.
Granicka, L. H.;Zolnierowicz, J.;Wasilewska, D.;Werynski, A.;Kawiak, J.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제20권1호
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pp.224-228
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2010
The encapsulation of bacteria may be used to harness them for longer periods of time in order to make them viable, whereas antibiotic treatment would result in controlled release of therapeutic molecules. Encapsulated Escherichia coli GFP (green fluorescent protein) (E. coli GFP) was used here as a model for therapeutic substance - GFP fragments release (model of bioactive substances). Our aim was to evaluate the performance of bacteria encapsulated in hollow fibers (HFs) treated with antibiotic for induction of cell death. The polypropylene-surface-modified HFs were applied for E. coli encapsulation. The encapsulated bacteria were treated with tetracycline in vitro or in vivo during subcutaneous implantation into mice. The HF content was evaluated in a flow cytometer, to assess the bacteria cell membrane permeability changes induced by tetracycline treatment. It was observed that the applied membranes prevented release of bacteria through the HF wall. The E. coli GFP culture encapsulated in HF in vitro proved the tetracycline impact on bacteria viability and allows the recognition of the sequence of events within the process of bacteria death. Treatment of the SCID mice with tetracycline for 8 h proved the tetracycline impact on bacteria viability in vivo, raising the necrotic bacteria-releasing GFP fragments. It was concluded that the bacteria may be safely enclosed within the HF at the site of implantation, and when the animal is treated with antibiotic, bacteria may act as a local source of fragments of proteins expressed in the bacteria, a hypothetical bioactive factor for the host eukaryotic organism.
Pregnancy block by male pheromones in mice differs in incidence depending on the combination of strains. Female mice of BALB/cA strain mated with BALB/cA males show a 100% pregnancy block when exposed to males of inbred strain DDK shortly after copulation (Chung et al., Biol Reprod 1997). In the present study, BALB/cA females mated with the males of other strains (CBA/J, C3H/HeN, C57BL/6Cr, and IXBL) showed higher pregnancy rates (66.6-87.5%) even when they were exposed to DDK males. In the pharmacological induction of pregnancy block with dopamine agonist (Bromocriptine, 4mg/kg BW), BALB/cA females mated with BALB/cA males showed a 100% pregnancy block. In contrast, BALB/cA females mated with CBA/J, C3H/HeN, and C57BL/6Cr males showed higher pregnancy rates (40-70%). These results suggest that the better pregnancy rate of BALB/cA females mated with alien males may be due to the stronger viability of F 1 embryos. This interpretation was confirmed by an embryo transfer experiment in which a higher implantation rate was observed when BALB/cA embryos grown in BALB/cA females exposed to BALB/cA males were transferred into recipient BALB/cA females exposed to DDK males. These results suggest that the embryonic genotype or viability of the embryo is one factor contributing to the occurrence of pregnancy block by male pheromones in mice.
Background: Selenium is one of the trace minerals whose deficiency is known to lead to complications of female reproduction. The identified gaps in researches regarding selenium and pregnancy include optimizing the dosage of selenium supplementation, timing of supplementation, finding the best form and type of selenium, and selenium administration combined with other antioxidants. Hence, this study was conceptualized to address one of the identified gaps, that is, to find out the best timing of selenium administration around the time of pregnancy. Specifically, this study aimed to assess the effects of maternal Selenium-supplementation, administered at various stages of periconception period, on murine blastocyst morphology, percent occurrence of good quality blastocysts, and implantation status. Methods: ICR female mice were randomly assigned into the unsupplemented group (Group I) receiving basal diet without selenium, and treatment groups given with $3.0{\mu}g$ selenium-supplement per day during pregestation only (Group II), pregestation-throughout-gestation (Group III) and gestation only (Group IV). Both blastocyst morphology and implantation status were assessed. Results: The morphometric measurements of blastocysts appeared to be unaffected by selenium-supplementation at different stages of periconception. Selenium-supplementation at pregestation only (Group II) and gestation only (Group IV) produced higher percent occurrence of good quality blastocysts and lower percent pre-implantation loss than Group III. Among all the treatment groups, Group III (Selenium-supplementation during pregestation-to-gestation) yielded the lowest quality blastocysts and highest percent pre-implantation loss. Conclusion: Maternal selenium-supplementation during pregestation and gestation stages of the periconception period yielded a high percent occurrence of good quality blastocysts and pre-implantation success.
Background: Embryonic stem cells (ESCs) have the potential to form teratomas when implanted into immunodeficient mice, but data in immunocompetent mice are limited. We therefore investigated teratoma formation after implantation of three different mouse ESC (mESC) lines into immunocompetent mice. Materials and Methods: BALB/c mice were injected with three highly germline competent mESCs (129Sv, BALB/c and C57BL/6) subcutaneously or under the kidney capsule. After 4 weeks, mice were euthanized and examined histologically for teratoma development. The incidence, size and composition of teratomas were compared using Pearson Chi-square, t-test for dependent variables, one-way analysis of variance and the nonparametric Kruskal-Wallis analysis of variance and median test. Results: Teratomas developed from all three cell lines. The incidence of formation was significantly higher under the kidney capsule compared to subcutaneous site and occurred in both allogeneic and syngeneic mice. Overall, the size of teratoma was largest with the 129Sv cell line and under the kidney capsule. Diverse embryonic stem cell-derived tissues, belonging to the three embryonic germ layers, were encountered, reflecting the pluripotency of embryonic stem cells. Most commonly represented tissues were nervous tissue, keratinizing stratified squamous epithelium (ectoderm), smooth muscle, striated muscle, cartilage, bone (mesoderm), and glandular tissue in the form of gut- and respiratory-like epithelia (endoderm). Conclusions: ESCs can form teratomas in immunocompetent mice and, therefore, removal of undifferentiated ESC is a pre-requisite for a safe use of ESC in cell-based therapies. In addition the genetic relationship of the origin of the cell lines to the ability to transplant plays a major role.
SKT is consisted of skullcap radix, knope-sedge radix and trametes mushroom. SKT mixture extract has been used for curing breast cancer and cervical cancer as a folk medicine without any kind of experimental evidence to support the rationales for its clinical use. This study was undertaken to investigate the antitumor effects and toxicity of SKT. Tumor was induced by implantation of B16F10 melanoma cells $(1{\times}10^6\;cells/mouse)$ into abdominal skin in ICR mice and SKT application (5 mg/mouse, p.o.) was initiated 4 days prior to tumor induction and lasted for 42 days. SKT significantly inhibited not only tumor growth but also metastasis of i.v. implanted melanoma cells into lung and showed prolonged life span of tumor bearing mice. The combined theraphy of SKT with doxorubicin was more effective against tumor metastasis into lung. SKT almostly recovered serum SGPT to normal level of galactosamine/LPS-induced hepatitis mice. High dose of SKT did not show any acute side effects. But, in vitro SKT did not inhibit the growth of melanoma cells, which suggests that the antitumor effects of SKT might be menifested by indirect mechanisms.
Neutropenia is a major dose-limiting side effect of cancer chemotherapy. The therapeutic effect of HM 10411 was examined on neutropenia caused by anticancer agents. Neutropenia in normal ICR mice was induced by a single combined intraperitoneal injection of 130 mg/kg of cyclophosphamide (CPA). 4.5 mg/kg of doxorubicin (DXR). and 1 mg/kg of vincristine (VCR) on day O. Neutropenia in tumor-bearing mice was made by a single intraperitoneal injection of 200 mg/kg of cyclophosphamide (CPA) into BALB/c mice bearing Colon 26 adenocarcinoma at 7 day after tumor implantation. HM 10411 or filgrastim (100 $\mu\textrm{g}$/kg/day) was subcutaneously administered for 5 consecutive days starting 1 day after injection of anticancer agents in order to stimulate neutrophil production. Injection of HM 10411 accelerated the recovery from these anticancer drug-induced neutropenia. In normal and tumor-bearing mice. neutrophil production efficacy of HM 10411 was similar than that of filgrastim. These results suggest that HM 10411 could be useful in the clinical treatment for neutropenia induced by anticancer agents.
To examine local response of adenosie(purine nucleoside) on the developing mammary gland, Elvax 40P implants containing adenosine were surgically implanted into mammary fat pad of the five week old female ICR mice. Inguinal(the 4th) mammary glands of anesthetized mice were exposed andplaced the implants for 12 days. One gland was treated with an adenosine implant, while the contralateral gland received a blank implant as control. For whole-mount preparations, glands were stained with alum carmine, and for histological observation, micro-selected mammary glands were stained with hematoxylin and eosin Y. Implantation with Elvax 40P did not affect on the damage of neighboring mammary tissue. Adenosie 25 or 250$\mu\textrm{g}$ per slow-release implant stimulated local mammary end bud formation of ovariectomized mice such as end bud size and numbers of end bud per gland in a dose dependent manner(P<0.05), and lower concentration of adenosie(2.5 or 25$\mu\textrm{g}$/implant) increased numbers of end bud(P<0.05) and end bud size(P<0.1) of intact mice. Adenosine treatment and intact ovarian function had moderate interation effects on the stimulation of end bud formation at 2.5$\mu\textrm{g}$ adenosine/implant(P<0.1). In histological observation, adenosine implants increased numbers of mammary epithelial type of cells at mammary duct in the presence or absece ofovary. These results indicate that adenosine should be one of regulators in mouse mammary ductal growth.
대한치과보존학회 2003년도 제120회 추계학술대회 제 5차 한ㆍ일 치과보존학회 공동학술대회
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pp.546.2-546
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2003
Dental follicle is the mesenchymal tissue which surrounds developing tooth germ. During tooth root development, periodontal components such as cementum, periodontal ligament and alveolar bone are considered to be created by progenitors present in the dental follicle. However, little is known about these progenitors. Previously we observed that cultured bovine dental follicle cells (BDFC) contained putative cementoblast progenitors. To further analyze the biology of these cells, we have attempted to immortalize BDFC by expression of the polycomb group protein Bmi-1 and human telomerase reverse transcriptase (hTERT). The BDFC expressing Bmi-1 and hTERT showed extended life span by 90 population doublings more than normal BDFC, and still contained cells with potential to differentiate into cementoblasts upon implantation into immunodeficiency mice. Among them, we established a clonal cell line designated as BCPb8, which formed cemetum-like mineralized tissue reactive to anti-cementum specific monoclonal antibody, 3G9, and expressed mRNA for bone sialoprotein, osteocalcin, osteopontin and type I collagen upon implantation. Thus with the combination of hTERT and Bmi-1, we succeeded in immortalization of cementoblast progenitor in BDFC without affecting differentiation potential. The BCPb8 progenitor cell line could be a useful tool not only to study cementogenesis but also to develop regeneration therapy for periodontitis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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