• 한국식품과학회지
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• 제37권2호
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• pp.255-260
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• 2005

혈전용해 활성과 면역세포 활성능이 우수한 청국장을 제조하기 위하여 청국장에서 분리된 220개의 세균으로부터 단백질 분해능과 점질물질 생성능이 우수한 13개의 Bacillus 균주를 선별하였다. 이들 13개 Bacillus 균주들의 fibrin plate 방법을 이용한 혈전용해 활성과 RAW 264.7 cell line을 이용한 cytokine 생성능력 (NO 생성능, Interlukin-1${\alpha},\;TNF-{\alpha}$) 검정에 의한 면역세포 활성능 측정실험을 수행하였는데, Bacillus 균주들을 TSB(Trypticase soy broth)에 키운 시료와 콩에 접종하여 제조한 청국장시료와 같은 두 가지 상이한 시료를 이용하여 혈전용해능과 면역세포 활성능을 측정한 결과, 혈전용해능과 면역세포 활성능이 가장 우수한 세 균주가 최종 선발되었다. 선발된 세균주의 동정결과 두 균주(CHKJ 1249, CHKJ 1326)는 Bacillus licheniformis로 그리고 CHKJ 1339 균주는 Bacillus subtilis로 동정되었다.

• KSBB Journal
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• 제21권5호
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• pp.331-335
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• 2006

참당귀(Angelica gigas Nakai) 현탁세포의 면역 증강성 다당의 생산을 증진시키기 위하여 초기 당농도와 생장조절제인 2,4-D의 농도를 변화시켰다. 당의 농도를 높일수록 세포의 생장과 ECP의 생산은 각각 1.6배, 1.1배 증가하여 효과적이었다. 2,4-D는 첨가하지 않은 것이 세포의 생장이 대조군에 비해 1.2배 높았지만, ECP의 생산의 경우 2mg/L 2,4-D를 첨가한 경우 대조군에 비해 10% 이상 더 생산되었다. 또한 배양 중 여러 가지의 elicitor를 첨가함으로써 ECP의 생산을 증진시키기 위하여 fungal elicitor들을 처리한 결과 Verticillium dahliae 90 mg/L을 배양 4일째에 처리한 경우 세포의 생장을 다소 저해시킨 반면, ECP 생산량이 1.7배나 증가함을 확인하였다.

• 한국식품과학회지
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• 제48권3호
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• pp.289-295
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• 2016

국내 시판중인 인스턴트 커피에서 다당류를 추출하여 새로운 면역 활성 물질을 확인하고자 하였다. 시판중인 인스턴트 커피를 구입하여 냉수추출 후, 에탄올 침전과 투석을 통하여 약 24%의 높은 수율로 다당류(ICP-0)를 얻을 수 있었다. ICP-0은 중성당 89.9%, 산성당 10.1%로 이루어진 다당체로써, 구성 성분으로는 갈락토스 55.5%, 만노스 25.7%와 소량의 아라비노스, 람노스 등으로 이루어진 것을 확인하였으며, 갈락토만난(galactomannan)이나 팩틴 다당류(pectic polysaccharide)가 혼합된 구조일 것이라고 추정되었다. 인스턴트 커피 유래 ICP-0에 대하여 대식세포 자극에 대한 세포증식능을 확인한 결과, NC 대비 유의적으로 높은 증식활성을 보였으며, IL-6, IL-12 및 TNF-${\alpha}$의 경우, $10{\mu}g/mL$에서도 NC 대비 우수한 사이토카인 분비 유도능을 보임이 확인되었다. 또한 NO, ROS를 분석한 결과에서도 NO의 경우 $10{\mu}g/mL$ 이상에서 NC 대비 양호한 활성을 보여 주었다. ICP-0에 대하여 2차 면역기관 중 하나인 비장세포상의 증식능을 확인한 결과, NC 대비 115% 정도 증식하는 것이 확인되어 면역세포를 직접 증진시키는 마이토겐 활성이 있음을 나타내었다. 인스턴트 커피 유래 ICP-0가 장관 내 분포되어 있는 Peyer's patch를 경유하여 장관면역에 공헌할 수 있는지 여부를 확인한 결과, NC 대비 유의적으로 골수세포의 증식능을 확인하였으며 GM-CSF와 같은 관련 사이토카인의 분비 유도가 확인되었다. 이상의 결과는 시판 인스턴트 커피로부터 분리한 다당류가 대식세포의 기능과 장관면역계를 증진시킬 수 있는 가능성을 제시한다.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제5권2호
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• pp.39-43
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• 1982

A protein-polysaccharide fraction was prepared from the carpophores of Laetiporus sulphureus. This fraction suppressed growth of sarcoma 180 in A-strain mice when administered i. p. To investigate the mechanism of antitumor action of this fraction, plaque assay was conducted by administrating i. p. to the mise at a dose level of 50mg/kg for five days. Ten days later, the mice were immunized with 1 * 10$^{7}$ sheep red blooc cells. The number of hemolytic plaque forming cells was significantly greater than that of the control mice. Three monosaccharides and fifteen amino acids were identified in the protein-polysaccharide fraction.

• 대한약학회:학술대회논문집
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• 대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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• pp.258.2-258.2
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• 2002

In our previous study. we reported that PG. a polysaccharide isolated from Plyatycodon grandiflorum, activated macrophages and B cells. but not T cells. Here. we investigated in more detail the mechanism of action of PG in macrophage activation. Since PG cannot penetrate cells due to the large molecular mass, it should bind to membrane receptors of macrophages. We showed that some antibodies to cell surface molecules (CD14, CD11b. TLR2, and TLR4) inhibited RAW264.7 macrophage activation, suggesting the possible binding sites of PG. (omitted)

• 한국식품영양과학회지
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• 제41권10호
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• pp.1378-1387
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• 2012

추출조건에 따른 생리활성 영향을 검토하기 위하여 차가버섯(Inonotus obliquus)을 물($50^{\circ}C$ reflux, $90^{\circ}C$ 이상 decoction, $12^{\circ}C$ 가압추출)과 에탄올(50, 70과 $90^{\circ}C$ reflux)로 추출한 후 물 추출물을 조다당획분(IO-CP)으로 분획하였을 때 IO-CP(4.8~16.8%)의 수율은 에탄올추출물(IO-E, 1.9~2.7%)보다 높았으며 추출온도 증가에 따라 그 차이는 더 컸다. 가압추출로 조제된 조다당획분(IO-CP-121)은 가장 높은 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량(35.10 mg TAE/g와 18.48 mg QE/g)과 DPPH와 ABTS를 이용한 자유 라디칼소거능(26.08과 27.99 mg AEAC/100 mg)을 나타내었다. IO-CP-D(decoction)와 IO-CP-50(reflux)은 IO-CP-121보다 유의적으로 높은 마이토젠(saline 대조군의 2.10과 1.95배, 100 ${\mu}g/mL$)과 장관면역 활성(6.30과 5.74배)을 보였으나 에탄올추출물 활성은 확인되지 않았다. 또한, 모든 IO-CP는 0.1 mg/mL 농도에서 RAW 264.7 세포주에 대하여 독성을 나타내지 않았으나, IO-CP-121이 LPS-자극 RAW 264.7 세포주에 대하여 가장 유의적으로 염증성 인자인 TNF-${\alpha}$와 nitric oxide(NO) 생성을 억제하였다(29.2와 63.5%). 에탄올추출물도 0.1 mg/mL 농도에서 독성을 보이지 않았으나 TNF-${\alpha}$와 NO의 생성 억제능은 IO-CP-121보다 현저히 낮음을 알수 있었다. 한편, 활성 다당획분을 분리하기 위하여 면역활성 획분인 IO-CP-D를 DEAE-Sepharose CL-6B column에서 비흡착 획분(IO-CP-I)과 7개의 흡착 획분(IO-CP-II~VIII)으로 분획한 결과, IO-CP-II가 가장 우수한 마이토젠과 마크로파지 활성(4.51과 1.64배)을 나타내었다. 이와 같이 분리된 면역활성 획분인 IO-CP-II는 주로 중성당(61.86%)과 함께 소량의 산성당(2.96%)을 포함하고 있는 다당류임이 밝혀졌으며, 주요 구성당으로서 Glc, Gal와 Man(molar ratio of 1.00:0.55:0.31)를 포함하고 있음을 확인할 수 있었다. 이러한 결과로부터 추출조건은 차가버섯 생리활성에 중요하게 작용하고 있으며, decoction 추출방법으로 제조하여 분획한 면역활성 획분으로부터 차가버섯 면역활성은 적어도 중성 다당류가 관여하고 있음을 알 수 있었다.

• 한국식품영양학회지
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• 제28권5호
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• pp.821-828
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• 2015

ASW0 is a polysaccharide derived from the perennial herb Aster scaber Thunberg. We isolated ASW0, a fraction of crude polysaccharide, by means of ethanol precipitation and dialysis after hot water extraction to investigate its physicochemical properties and immunostimulatory effects. ASW0 contains neutral sugar (45.7%), acidic sugar (51.6%), protein (2.3%), and 2-keto-3-deoxy-D-manno-octonate (KDO) (0.4%). The neutral sugar in ASW0 (in mole percentage) was mainly composed of arabinose (34.5 mol%), glucose (31.1 mol%), galactose (14.9 mol%), and rhamnose (8.1 mol%), which are characteristic of pectic polysaccharides. ASW0 also contained small amounts of xylose, mannose, and fucose. The anti-complementary activity of ASW-0 was similar to that of polysaccharide K (used as positive control). ASW0 exhibited no cytotoxicity in RAW 264.7 macrophages and dramatically increased nitric oxide (NO) production in a dose dependent manner ($0.3{\sim}30{\mu}g/mL$). Also, macrophages stimulated with ASW0 showed enhanced production of immunostimulatory cytokines such as interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor alpha ($TNF-{\alpha}$) in a dose dependent manner. These results suggest that the ASW0 have a potent immunostimulatory effect and can be used as a natural immune health ingredient.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제20권7호
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• pp.1053-1060
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• 2010

Cordyceps militaris, an entomopathogenic fungus belonging to the class Ascomycetes, has been reported to have beneficial biological activities such as hypoglycemic, anti-inflammatory, antitumor, antimetastatic, hypolipidemic, immunomodulatory, and antioxidant effects. In this study, the crude water-soluble polysaccharide CMP, which was obtained from the fruiting body of C. militaris by hot water extraction and ethanol precipitation, was fractionated by DEAE-cellulose and Sepharose CL-6B column chromatographies. This process resulted in three polysaccharide fractions, termed CMP Fr I, CMP Fr II, and CMP Fr III. Of these fractions, CMP Fr II, with an average molecular mass of 127 kDa, was able to upregulate effectively the phenotypic functions of macrophages such as NO production and cytokine expression. The chemical property of the stimulatory polysaccharide, CMP Fr II, was determined based on its monosaccharide composition, which consisted of glucose (56.4%), galactose (26.4%), and mannose (17.2%). Its structural characteristics were investigated by a combination of chemical and instrumental analyses, including methylation, reductive cleavage, acetylation, Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), and gas chromatography-mass spectrometry (GCMS). Results indicated that CMP Fr II consisted of the (1${\rightarrow}$4) or (1${\rightarrow}$2) linked glucopyranosyl or galactopyranosyl residue with a (1${\rightarrow}$2) or (1${\rightarrow}$6) linked mannopyranosyl, glucopyranosyl, or galactopyranosyl residue as a side chain. The configuration of the ${\beta}$-linkage and random coil conformation of CMP Fr II were confirmed using a Fungi-Fluor kit and Congo red reagent, respectively.

• 생약학회지
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• 제27권3호
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• pp.254-261
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• 1996

A potent immuno-stimulating activity was detected from the watersoluble and ethanol-precipitated crude extract (AG-1) of the root of Angelica gigas Nakai. The crude extract was fractionated into two fractions, an acidic AG-2 and a neutral AG-3 fraction by DEAE-cellulose adsorption. The two fractions contained polysaccharides of which M.W. were 10 Kdal and >2,000 Kdal respectively, proteins, and various inorganic components. The immunostimulating activities of two fractions were not reduced by proteinase K, acid or alkali treatment. The polysaccharides obtained from the root of A. gigas were mainly composed of arabinose, galactose, and galacturonic acid. These results indicated that immuno- stimulating components of the root of A. gigas was a kind of pectic polysaccharides or arabinogalactans.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제19권9호
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• pp.951-959
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• 2009

Most, if not all, Basidiomycetes mushrooms have biologically active polysaccharides showing potent antitumor activity with immunomodulating properties. These polysaccharides have various chemical compositions and belong primarily to the $\beta$-glucan group. In this study, the crude water-soluble polysaccharide HEF-P, which was obtained from the fruiting body of Hericium erinaceus by hot water extraction and ethanol precipitation, was fractionated by DEAE-cellulose and Sepharose CL-6B column chromatographies. This process resulted in four polysaccharide fractions, named HEF-NP Fr I, HEF-NP Fr II, HEF-AP Fr I, and HEF-AP Fr II. Of these fractions, HEF-AP Fr II was able to upregulate the functional events mediated by activated macrophages, such as production of nitric oxide and expression ofcytokines (IL-1${\beta}$ and TNF-${\alpha}$). The molecular mass of HEF-AP Fr II was estimated by gel filtration to be 13 kDa. Its structural characteristics were investigated by a combination of chemical and instrumental analyses, including methylation, reductive cleavage, acetylation, Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR), and gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). Results indicate that HEF-AP Fr II is a low-molecular-mass polysaccharide with a laminarin-like triple helix conformation of a ${\beta}$-1,3-branched-${\beta}$-1,6-glucan.