• 대한수의학회지
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• 제29권4호
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• pp.541-548
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• 1989

오제스키병 바이러스를 배양세포에다 감염시켜, 냉동 및 araldite포매 초박절편에서 protein A-gold labeling을 통해 바이러스항원 검출을 시도하였다. 오제스키병 바이러스항원은 10nm gold probes로 표지되었으며, 전자밀도가 높은 gold 입자들은 바이러스의 nucleocapsid와 envelope에서 주로 관찰되었고, 초냉동박절표본에서의 immunogold labeling은 조직구조물들과 극히 미미한 비특이결합만을 보였다. 초냉동박절표본에서의 immunogold labeling은 오제스키병 바이러스항원을 검출하는데 있어 효과적이었으며, 이는 또한 여러가지 바이러스들과 속주세포들간의 상호작용에 관한 면역세포화학적 연구에 크게 이용될 수 있을 것으로 생각된다.

• International Journal of Oral Biology
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• 제40권4호
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• pp.183-187
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• 2015

The present study was aimed to evaluate the influence of glutaraldehyde (GA) concentration on multiple electron microscopic (EM) immunostaining using pre-embedding peroxidase and post-embedding immunogold method. Influence of various concentrations of GA included in the fixative on immuoreactivity was assessed in the multiple immunostaining using antisera against anti-transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1) for peroxidase staining and anti-GABA for immunogold labeling in the rat trigeminal caudal nucleus. Anti-TRPV1 antiserum had specificity in pre-embedding peroxidase staining when tissues were fixed with fixative containing paraformaldehyde (PFA) alone. Immunoreactivity for TRPV1 was specific in tissues fixed with fixative containing 0.5% GA at both perfusion and postfixation steps, though the immunoreactivity was weaker than in tissues fixed with fixative containing PFA alone. Tissues fixed with fixative containing 0.5% GA at the perfusion and postfixation steps showed specific immunogold staining for GABA. The results of the present study indicate that GA concentration is critical for immunoreactivity to antigens such as TRPV1 and GABA. This study also suggests that the appropriate GA concentration is 0.5% for multiple immunostaining with peroxidase labeling for TRPV1 and immunogold labeling for GABA.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제34권4호
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• pp.215-224
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• 1996

작은와포자충의 세포골격 단백질 분포를 알아보기 위하여 actin, tropomyosin, $\alpha$-actinin 및 troponin-T의 분포를 이중면역 황금표지법 (double immunogold labeling method)으로 관찰하 였다 관찰된 모든 발육 단계의 충체에서 매우 많은 양의 tropomyosin이 세포질 및 세포막에 분포하고 있음이 밝혀졌으며 actin보다도 더 많은 양이 관찰되었다. ${\alpha}-actinin$의 경우는 주로 세포막에 소량이 분포하였으며 Troponin-T는 어느 발육 단계에서도 관찰되지 않았다 이 연구의 결과 tropomyosin의 분포 정도도 미루어 볼 때 이 단백질이 작은와포자충에서 매우 중요한 역할을 수행할 것으로 추측되며, 주로 세포막에 다량으로 분포하는 actin, tropomyosin 및 ${\alpha}-actinin$은 면역진단 및 면역치료의 대상으로 이용할 가능성이 있을 것으로 생각된다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권5호
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• pp.499-503
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• 1989

Cryptosporidium이 인체 내에서 복잡한 life cycle를 거치면서 각 stage마다 만들어지는 단백질 항원의 관계성에 관한 보고가 없어 Cryptosporldiosis에 대한 치료제 개발에 어려움이 있었다. 본 연구는 단일군 항체와 Immunogold labeling 기술을 이용하여 주요 extracellular stages인 sporozoites와 merozoites의 antigenic relatedness를 살펴보았다. BALB/C 쥐로부터 merozoites에 대한 단일군 항체(Jo3)를 분리하였으며 IgG3형이었다. 정제된 sporozoites를 SDS-PAGE로 분리한 후 Western blot을 이용하여 Jo3를 반응시킨 결과 3,500Daltons 크기의 sporozoites 항원을 인식하였다. Jo3를 Cryptosporidium에 감염된 tissue section에 반응시킨 후 Immunoelectron microscopy를 이용하여 3.5-kDa 항원의 위치와 sporozoites와 merozoites가 똑같은 단백질 항원을 만드는가를 추적해 본 결과 3.5-kDa 단백질 항원이 두 stages에서 공동으로 합성되는 것으로 나타났으며 이 항원은 표면과 세포질 내에 위치하고 있었다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제19권3호
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• pp.267-274
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• 1995

Vicilin and legumin, the storage Proteins of seed, were Purified from ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) endosperm cells. They were immunized in rabbits, and antibodies were raised respectively. Using these two antibodies, double immunogold labeling of vicilin and legumin was carried out to determine the gap of synthetic time and the transport pattern of vicilin and legumin in the ginseng endosperm cells. Vicilin and legumin were synthesized at the same time at early embryo developmental stage. They were secreted from the Golgi bodies and accumulated into the small vacuoles. As the endosperm cells developed, vicilin and legumin localized in the small vacuoles were gradually transported toward the large central vacuole where they were stored. Protein bodies were derived from the vacuoles filled with proteins and distributed in the endosperm cells of mature red seed. Protein bodies were various in size from 1 to 8 ${\mu}{\textrm}{m}$ in which vicilin and legumin were mixed each other. The number of small particles labeled on the vicilin was greater than that of large particles labeled on the legumin in the protein bodies indicating that the amount of vicilin is higher than that of legumin in the protein bodies.

• Applied Microscopy
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• 제32권3호
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• pp.247-255
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• 2002

두족류 Octopus minor와 Todarodes pacificus의 시엽내 신경전달물질을 분비하는 neuron의 특성 및 기능을 확인하기 위해 serotonin 및 somatostatin의 항체를 사용한 면역염색과 면역금표지법을 시행하였다. 면역염색 결과 항-somatostatin은 살오징어인 경우 항-serotonin 면역반응과 유사하게 나타났지만, 서해낙지에서는 외과립세포층의 큰 세포에서만 반응을 보였다. 항-serotonin을 이용한 면역금표지법은 살오징어인 경우 내과립세포층과 수질부의 신경세포에서는 세포질 $0.5{\mu}m^2$당 30개 정도의 금입자가 관찰되어 강한 반응을 보인 반면, 서해낙지에서는 17개 정도의 비교적 약한 반응을 보였다. 항-somatostatin에서는 살오징어의 외과립 및 내과립세포층 그리고 수질부의 반응된 세포의 세포질 $0.5{\mu}m^2$당 30개 정도의 금입자가 관찰되어 강한 반응을 보인 반면, 서해낙지의 외과립세포층의 세포에서는 3개 정도의 금입자만이 관찰되어 역시 약한 반응을 보였다. 이와 같이 시엽의 각 부위별 면역염색과 면역금표지법을 시행한 결과 2종류의 항체에 각각 양성반응을 보인 신경세포들이 두 종에서 다양하게 분포하고 있음을 확인했는데 특히 면역염색과 면역금표지법에 관한 반응외 정도를 비교하면 서해낙지에 비해 살오징어에서 비교적 강하게 나타났다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제33권4호
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• pp.365-376
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• 1995

일록춘폐흡충(Poragonimus iloktsuenensis)의 표피층, 장상피층 및 난황선의 조직항원 성을 발육단계별로, 면역황금표지법(immunogoldlabelingmethod)으로 관찰하였다. 일록춘폐흡충 으로 감염건 횐쥐(Sprague-Dawley)로 부터, 감염후 2주 3주, 4주, 5주 및 33주에 적출한 충체를 항원으로 사용하였고, 감염 후 10주의 흰쥐혈청을 항체로 사용하였다 조직항원성은 조직에 표지된 황금입자로 판정하였다. 표피층은 유약충으로부터 성충에 이르는 발육과정중 전반적으로 황금입자 표지가 많지 않았고 충체가 성숙되어감에 따라서 황금입자 표지가 다소 드물어지는 경향이 있었으나, 충체 개체별 항원 강도에 차이가 많았다. 장상피층과 난황선은 충체의 발육단계에 관계없이 많은 수의 황금입자가 표지되어 강한 항원성을 나타내었다. 이 실험의 결과, 일록춘폐흡충의 표피층 장강피층, 및 난황선은 중요한 조직항원 부위로 보이나, 표피층은 항원성이 낮은 편이고, 발육단계 및 개체별로 항인강도에 차이가 있었다. 장상피층 및 난황선도 개체별로 황금입자 표지강포에 다소의 차이는 있었으나 충체의 발육단계에 관계없이 계속해서 강한 항원성이 유지되는 조직부위로 보인다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제29권1호
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• pp.31-42
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• 1991

폐흡충(Paragonimus westermani)에 감염된 숙주에 대해 항체 생성을 유도하는 물질이 분포하고 있는 부위를 화인하기 위하여 대조군의 IgG와 폐홉충에 감염된 실험 개의 특이 IgG를 폐흡충 유약성충 조직에 반응시키고 면역황금표식법을 이용하여 전자현미경으로 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 대조군의 IgG를 반응시킨 유약성충 표피층은 표피세포에서 분비되는 물질이 포함된 표피 합포체로 구성되어 기저층과 분명하게 구별되었으며 근육층도 잘 발달되어 있었다. 난황세포는 크기가 다양한 분비과립 등을 포함하고 있었으며 특히 조면소포체가 발달되어 있었다. 맹관의 막구조물은 잘 발달되었으며 장상피 합포체도 잘 발달되어 있었다. 한펀, 폐흡충에 감염된 실험동물의 특이 항체로 반응시킨 유약성충 표피충의 표피 합포체와 표피세포의 세포질에 황금입자의 매우 특이적인 표식가 관찰되었고 난황세포에서는 분필과립에 황금 입자가 높은 밀도로 관찰되었다. 그리고 맹관 상피 합포체는 미약하게 황금 표지가 되었고 맹관 막구조물과 맹관 내강에도 특이하게 황금 표지가 관찰되었지만 표피 합포체와 표피세포보다 밀도가 낮게 관찰되었다. 이상의 결과로 폐홉충에 감염된 실험 개는 폐흡충의 표피 합포체와 표피세포에서 생성된 물질과 난황세포에서 생성된 물질에 의하여 면역항체가 형성되며 일부는 맹관 내용물에 의해 약간의 면역항체가 유도되는 것으로 생각되었다.

• Molecules and Cells
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• 제20권1호
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• pp.119-126
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• 2005

${\alpha}$-Expansins are bound to the cell wall of plants and can be solubilized with an extraction buffer containing 1 M NaCl. Localization of ${\alpha}$-expansins in the cell wall was confirmed by immunogold labeling and electron microscopy. The subcellular localization of vegetative ${\beta}$-expansins has not yet been studied. Using antibodies specific for OsEXPB3, a vegetative ${\beta}$-expansin of rice (Oryza sativa L.), we found that OsEXPB3 is tightly bound to the cell wall and, unlike ${\alpha}$-expansins, cannot be solubilized with extraction buffer containing 1 M NaCl. OsEXPB3 protein could only be extracted with buffer containing SDS. The subcellular localization of the OsEXPB3 protein was confirmed by immunogold labeling and electron microscopy. Gold particles were mainly distributed over the primary cell walls. Immunohistochemistry showed that OsEXPB3 is present in all regions of the coleoptile and root tissues tested.

• 대한의생명과학회지
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• 제5권2호
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• pp.155-165
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• 1999

호르텐스극구흡충을 흰쥐에게 경구 감염시키고 4주 후에 성충을 획득하여 고정, 포매 및 절편하여 조직항원 분포 부위를 관찰하였다. 호르텐스극구흡충의 항체는 호르텐스극구흡충 피낭유충을 흰쥐에게 경구 감염시키고 4주 후에 채혈한 혈청과 호르텐스극구흡충 조항원을 면역증강제와 함께 흰쥐에게 근육 주사하여 채혈한 혈청을 이용하였으며, 이 혈청을 반응시켜서 호르텐스극구흡충 조직내의 항원성 분포를 규명하였다. 한편, 면역황금표식법에 의한 미세조직의 항원성 반응 여부는 조직에 표지된 황금입자로 판정하였다. 그 결과 충체 조직에서 황금입자와 강하게 반응하는 미세조직은 표피층의 표지합포체, 난황세포의 구성물질, 유연조직의 분비과립 그리고 배설낭의 구성물질 등에서 반응이 강하게 나타났다. 이상의 결과를 볼 때 호르텐스극구흡충의 항원은 생식세포와 소화분비 및 소화관계통에서 분비 유래되는 것으로 분석되었다.