Neurofascin, one of the members of L1CAM, has been known to have some important roles during the development of nerve fibers. In order to investigate the role of neurofascin associated with the formation of Schmidt-Lantermann incisure in the sciatic nerve, the localization of neurofascin was studied with electron microscopy, immuno-fluorescence and immuno-electron microscopy. In the electron microscopy, the first formation of Schmidt-Lantermann incisure was checked at postnatal day 6 and the complete form of incisures traversing the whole myelin sheath began to be observed at postnatal day 8. In the immunofluorescence, neurofascin immunoreactive Schmidt-Lantermann incisures were first checked at postnatal day 6 and dramatically increased with aging by postnatal day 56. In the immunoelectron microscopy, neurofascin immunoreactive gold particles at the incisure forming sites were first observed at postnatal day 6 and the number of gold particles was increased as the animal was getting old by postnatal day 56. According to the present study, neurofascin is likely to have some relationships with Schmidt-Lantermann incisure formation.
The localization of worm antigen of Neodiplostomum seoulere was examined by immuno-electronmicroscopic observation. Not only the immunized serum of mice with crude worm extract of N. seoulene but also serum of infected mouse were reacted to the worm section. Using immunized serum as primary antibody. the gold particles were deposited on the rough endoplasmic reticulum of the cell of tribocytic organ, spermatozoa in the seminal vesicle, microvilli of the caecum and vitelline follicle. Using infected serum, gold particles were deposited only on the vitelline follicle prominently. This finding suggested that the tribocytic organ, seminal vesicle, caeca and vitelline follicles may play a role of antigen to immunized serum with crude worm extract of N. seoulense, whereas the vitelline follicle, to the infected serum.
LEE Jong Hee;Park Jae Hyun;Kim Sun Hoi;An Sun Hee;Kong In Soo
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.35
no.4
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pp.451-453
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2002
The rotation of the flagellar motor is powered by the electrochemical gradient of specific ions across the cytoplasmic membrane. Recently, the gents of the Na'-driven motor have been cloned from marine bacterium of Vibrio sp. and some of the motor proteins have been purified and characterized. Also, motx gene encoding a channel component of the sodium type flagellar motor was identified from Vibrio Huuiaiis (KTCC 2473). The amino acid sequence of MotX protein from V, Huvialis shared 90, 85, $85\%$ identity with V, cholerae, V. alginolyticus, V parahaemolyticus, respectively. We have studied the localization of the expressed MotX protein in Escherichia coli by immune-gold labeling of ultra-thin frozen section. Our observation of the expressed protein indicated that MotX protein could be existed as attachment to inner membrane in E. coli.
The antigen location of Cryptosporidium parvum, which stimulates antibody formation in humans and animals, was investigated using infected human sera. Immuno-electron microscopy revealed that antigenicity-inducing humoral immunity was located at various developmental stages of parasites, including asexual, sexual stages, and oocysts. The amount of antigen-stimulating IgG antibodies was particularly high on the oocyst wall. The sporozoite surface was shown to give stimulation on IgG and IgM antibody formation. Trophozoites implicated the lowest antigenicity to humoral immunity, both IgG and IgM, by showing the least amount of gold labeling. Immunogold labeling also provided clues that antigens were presented to the host-cell cytoplasm via feeder organelles and host-parasite junctions.
Present work was undertaken to investigate the origin of milled wood lignin(MWL) in the wood cell wall using immunocytochemical techniques, which can provide the information on the localization of specific antigens(MWL in the present study) to be examined. Spruce MWL dissolved in DMSO and emulsified with Freund adjuvant was injected directly into the mouse spleen. The animals were boostered at two-week intervals after the initial immunization. Blood samples were purified in standard procedures. The characteristics of antibodies against MWL were tested by indirect ELISA. Visualization of MWL was carried out using conventional indirect immunogold-labelling methods on the ultrathin sections of spruce wood. Immuno-TEM observations showed that the immunogold probes were selectively attached to secondary cell walls of spruce wood. The most intense labelling was frequently observed in the S2 layer. In contrast, gold labelling in the lignin-rich regions, such as middle lamella and cell corner was not found. The immuno-TEM provides an indication that spruce MWL originates from the S2 layer.
Norovirus (NV) is the most common cause of viral gastroenteritis, with the potential to develop into a fatal disease in those who are immuno-compromised, and effective vaccines and treatments are still non-existent. In this study, we aimed to elucidate the molecular mechanism of the previously identified NV replication inhibitor utilizing a vinyl-stilbene backbone, AC-1858. First, we confirmed the inhibition of the NV RNA replication by a structural analog of AC-1858, AC-2288 with its exclusive cytoplasmic sub-cellular localization. We further validated the induction of one specific host factor, the phosphorylated form of heat shock factor (HSF)-1, and its increased nuclear localization by AC-1858 treatment. Finally, we verified the positive and negative impact of the siRNA-mediated downregulation and lentivirus-mediated overexpression of HSF-1 on NV RNA replication. In conclusion, these data suggest the restrictive role of the host factor HSF-1 in overall viral RNA genome replication during the NV life cycle.
The present study attempts to explore the first appearance 8nd subsequent development of %cosine hvdroxvlase (TH)-containing neurons in the rat brain from embryonic day (E) 10.5 to the neonate. To increase the senti노ivity and resolution power, a double bridge peroxidase-anti-peroxidase technique was employed for cellular localization of TH. In situ hybridization histochemistw with synthetic TH oligomer (30-mer) codinB TH was also used to detect TH mRNA. TH-containing neurons were first detected at E11.5 in the intermediate zone of prosencepha1on and mesencephalon. At this stage, TH-immunoreactive neurons were small, ovoid bee and emitted their fibres into their immediate surroundings. From this stage, TH-immunoreactive neurons increased in their number and underwent migration and cell differentiation. At E15.5, the distribution pattern of the maior groups of TH neurons was similar to that of adult catecholaminergic groups, and at E19.5 the external laver of median eminence showed TH-immunoreactive processes.
The present study investigated the cellular localization of a-subunit of Gq (Gaq) protein in developing L8E63, rat skeletal muscle cell line. The colocalization of Gaq with actin cytoskeleton was demonstrated by double-labeling experiments. In mononucleated myoblasts, the immuno-fluorescence staining pattern of Gaq was almost identical with that of F-actin visualized with rhodamine-conjugated phalloidin. However, this colocalization of Gaq with cytoskeleton was not maintained in multinucleated myotubes. The staining pattern of Gaq in myotubes did not match with any specific subcellular structure, but appeared as a uniformly distributed diffuse staining throughout the whole cell surface. Interestingly, change in the expression level of Gaq was not detected during myoblast differentiation, suggesting that actin-associated Gaq protein might dissociate from the cytoskeleton as cells differentiate. Immunocytochemical experiments using specific antibodies directed against several G proteins indicated that the subcellular localizations of Gai1, Gai2, Gai3, and Gao were different from those obtained with Gaq.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.81-81
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2003
DNA methylation is a covalent modification of DNA that can modulate gene expression and is now recognized as a major component of the epigenome. During evolution, the dinucleotide CpG has been progressively eliminated from the genome of higher eukaryotes and is present at only 5% to 10% of its predicted frequency. Approxymately 80% of the remaining CpG sites contain methylated cytosines in most vertebrates and they are distributed in a pattern that is unique in each tissue and is inversely correlated with gene expression. The pattern of methylation is faithfully maintained during cell division by the enzyme Dnmt1, the maintenance DNA methyltransferase, which catalyzes the transfer of a methyl group from S-adenosyl-methionine to the 5'-position of the cytosine ring. We have been identified bovine Dnmt1 cDNA full-length recently (AY173048) Little is known on the functions of Dnmt1 in bovine preimplantation embryos. Thus, we analyzed the specific pattern of Dnmt1 in in vitro derived/nuclear transfer bovine and in vivo derived mouse embryos to monitor the epigenetic reprogramming process. We investigated these process by using indirect immunofluresence with an antibody to Dnmt1. According to other studies, Dnmt1 accumulates in nuclei of early growing oocytes but is sequestered in the cytoplasm of mature oocytes. In 2-cell and 4-cell embryos, Dnmt1 is cytoplasmic, but at the 8-cell stage, it is present only in the nucleus. By the blastocyst stage, Dnmt1o is again found only in the cytoplasm. Thus, nuclear localization of Dnmt1o in preimplantation embryos is limited to the 8-cell stages After implantation, Dnmt1 is localized in the nucleus in mouse. However, we have found different patterns of Dnmt1 nuclear localization. Though we used the common antibody, immune-localization data revealed that Dnmt1 antibody have been detected at the nucleus in 1-cell to blastocyst embryos. Therefore, maybe we think that the functions of Dnmt1 between bovine and mice are different. In order to Identify the mechanisms that regulate DNA methylation in bovine preimplantation embryo, we have plans on using bovine oocyte and somatic specific Dnmt1 antibodies.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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