Purpose: This study was conducted to find the optimal freezing method and storage conditions for welsh onion. Methods: Cut welsh onions (0.3 cm) were packed in nylon/linear low density polyethylene (LLDPE) film bags, and frozen utilizing still-air freezing at -$20^{\circ}C$ (SAF20) and -$40^{\circ}C$ (SAF40), and immersed-liquid freezing at -$40^{\circ}C$ (ILF40); they were then stored at -$20^{\circ}C$ for 7 months. During storage, quality characteristics were measured monthly. Results: Drip loss was the lowest in the ILF40 packaging. Color difference in the stem (white part) did not differ significantly according to freezing conditions and storage time. Color difference in the leaf (green part) and stem was the lowest in SAF20. pH remained unchanged, while total aerobic bacterial count, pyruvic acid and moisture content decreased during storage. Pyruvic acid content of ILF40 was the highest among the freezing treatments. Fructose and glucose contents increased gradually during storage. Citric acid, malic acid, succinic acid and fumaric acid contents were unaffected, regardless of the freezing conditions. Conclusion: The optimal freezing method for welsh onions with the least quality changes was determined to be immersed liquid freezing, following by preservation up to 7 months by freeze-storing.
We determined whether the ultrarapid freezing method is applicable to micromanipulated mouse embryos. One-cell mouse embryos were microinjected with MThGH gene. Nuclei from one-cell embryos of F1(C57BL$\times$CBA) mice were transplanted into enucleated one-cell embryos of ICR mice. The injected and nucleated embryos that developed to 2-cell stage were cryopreserved by ultrarapidfreezing. The embryos equilibrated in freezing medium(3 M DMSO+0.25 M sucrose+2% FBS in PBS) were directly immersed into liquid nitrogen and then thawed in 37$^{\circ}C$ water. Development rates of the microinjected and nuclear-transplanted embryos to blastocyst stage after ultrarapidly freezing and thawing were 31% and 55%, respectively. The frozen-thawed embryos were transferred to pseudopregnant recipient, which then gave birth to 17 offsprings. Twelve(14% of the transferred embryos) and five(20%) offsprings were derived from microinjected and nuclear-transplanted embryos, respectively. The results indicate that the DNA injected and nuclear-transplanted mouse embryos are cryopreservable at 2-cell stage by ultrarapid freezing method.
Color characteristic of thawed samples of frozen cooked soybean pree of selected cultivar (Gomultong) depending upon cooking temperature an dtime as well as freezing conditions were evaluated . Samples were either cooled in 4$^{\circ}C$ refrigerator (control), or frozen at - 4$0^{\circ}C$ deep freezer for 12 hrs and then stored in 4 $^{\circ}C$ refrigerator , or immersed in liquid nitrogen (LN2) and then each samples were cooked for 5, 10, 20 and 40 min at 65, 80 and 95$^{\circ}C$, respectively. Freezing effect was not significant for all color characteristics except for b. Significant cooking temperature by cooking time interacts were found for all characteristics excepts for L.
본 연구는 냉동 편마늘의 냉동 조건과 냉동 저장기간에 따른 품질특성변화를 분석하였다. $-20^{\circ}C$ 완만냉동(SAF20), $-40^{\circ}C$ 완만냉동(SAF40) 및 $-40^{\circ}C$ 침지식 냉동(ILF40)으로 마늘을 동결한 후 $-20^{\circ}C$에서 7개월간 저장하면서 이화학적 및 미생물학적 특성을 분석하였다. 냉동곡선결과 최대빙결 정생성대를 통과한 시간이 SAF20은 1,600분, SAF40은 40분, ILF40은 10분 이내로 나타나 ILF40의 냉동속도가 가장 빨랐다. 드립로스 역시 ILF40에서 저장기간 동안 최소 0.00%, 최대 0.23%를 나타내어 다른 냉동조건에 비해 가장 낮게 나타났고(p<0.05) 저장기간 동안 일정한 수준으로 유지되었다. 모든 냉동조건에서 15일 냉동 후 해동 시 신선마늘 대비 L 값은 감소, a 값은 증가, b 값은 변화가 없었으며 색차값의 변화는 SAF40에서 가장 작게 나타난 반면 SAF20에서 크게 나타났다. 절단강도는 모든 냉동조건에서 15일 냉동 후 해동 시 신선마늘 대비 증가하였고(p<0.05) ILF40에서 신선마늘의 절단강도와 가장 유사했으며 저장기간 동안 일정한 수준으로 유지되었다. 일반세균은 모든 냉동 조건에서 15일 냉동 후 해동 시 신선마늘 대비 증가하였지만(p<0.05) ILF40에서 일반세균수가 가장 적었으며 저장기간 동안 모든 냉동조건에서 감소하였다(p<0.05). pH는 모든 냉동조건에서 15일 냉동 후 해동 시 신선마늘 대비 증가하였고(p<0.05) ILF40에서 신선마늘과 가장 유사하였으며 저장기간 동안 모든 냉동조건에서 감소하는 것으로 나타났다(p<0.05). 총 유기산 함량은 모든 냉동조건에서 15일 냉동후 해동 시 신선마늘 대비 증가하였으며(p<0.05) 저장기간 동안 ILF40에서 다른 냉동조건 대비 함량변화가 일정했다. 피루브산과 알리신 함량은 모든 냉동조건에서 15일 냉동 후 해동 시 신선마늘 대비 급격히 감소하였지만(p<0.05) ILF40에서 그 함량이 가장 높았으며 저장기간 동안 모든 냉동조건에서 큰 변화 없이 일정했다. 이상의 결과 냉동 편마늘의 품질변화에 영향을 주는 요인은 냉동저장기간보다 냉동조건임을 확인하였고 신선마늘의 품질을 장기간 안정하게 유지할 수 있는 냉동방법으로 침지식 냉동이 가장 효과적일 것으로 판단된다.
This study was carried out in order to investigate effects of cryoprotectant concentration and equilibration time on survival of ultrarapidly frozen 2-cell mouse embryos. Mouse 2-cell embryos, following dehydration by exposure to DMSO and sucrose, were directly immersed into liquid nitrogen and thawed in 37$^{\circ}C$ water. Viability was defined by development rate to the blastocyst stage after in vitro culture for 72 hours. The results are summarized as follows ; 1. When 0.25M of sucrose was added into the freezing medium at various concentrations of DMSO and dilution medium, higher development rate of embryo was obtained in 3.0M DMSO concentrations (82.6%). However, when sucrose concentraitons of 0.25 and 0.5 M were added to the freezing medium with 3.0 M DMSO and dilution medium, development rate of embryos were 81.7% and 24.1%, respectively. 2. In the equilibration time at room temperature, higher development rate was attained after short period of time (2.5min) in 3.0 M DMSO+0.25 M sucrose (85.9%). 3. The development rate of embryos at in vitro 2-cell, in vitro 2-cell, solution control and untreated control was 84.6%, 90.9%, 89.9%,, and 89.7%, respectively.
동치미를 동결하면 미생물의 사멸, 및 성장과 효소의 작용이 정지되어 더 이상 발효가 진행되지 않아 산패 및 조직의 연화를 방지할 수 있으므로 동결 저장은 동치미의 효과적인 저장 방법이다. 그러나 일반적인 동결 방법과 해동 방법으로는 동결 및 해동 공정시 품질의 변화가 발생하는 문제점이 있기 때문에 액체질소를 이용한 급속 동결 및 915MHz microwave을 이용한 급속 해동 공정을 실시하였다. 동치미를 제조한 후 발효 적숙기인 pH 3.8에서 동결하였는데 동치미 무와 액을 함께 동결할 경우 동치미 무의 hardness가 크게 감소하기 때문에 무와 액을 각각 분리하여 동결시켰다. 동치미 무의 size는 $2{\times}2{\times}6cm$이 품질의 변화를 최소화할 수 있는 크기이었고, 동치미 액은 $5{\times}5{\times}10cm$로 설정하였다. 동치미 무의 경우 액체질소로 동결하고 915 MHz microwave로 해동하였을 때 조직의 hardness에 기여하는 pectinesterase activity가 가장 높았고, 조직의 연화에 작용하는 polygalacturonase activity가 가장 낮아서 hardness가 가장 좋았으며 색도의 변화도 가장 적었다. 동치미 액의 경우 $-70^{\circ}C$에서 동결하고 915 MHz microwave로 해동하였을 때 pH와 산도의 변화가 적었으며 미생물이 가장 많이 사멸되었다. 따라서 급속 동결 및 급속 해동을 이용한 저장방법은 동치미의 장기 저장 시 효과적인 방법으로 판단되었다.
This study investigated full-term development potential of ultrarap idly frozen and thawed mouse 2-cell embryos. Mouse 2-cell embryos, dehydrated by exposure to freezing medium, were directly immersed into liquid nitrogen and thawed in 37$^{\circ}C$ water. The embryos that were frozen and thawed were cultured in uitro and transferred to foster mothers to examine there developmental potential. As a result, the frozen-thawed 2-cell embryos developed to blastocysts in vitro as a similar rate as control 2-cell embryos did(in vitro 2-cell, 86.4%; in vivo 2-cell, 90.9%; solution control, 89.9%; control, 89.7%). Normal live young were obtained from transfer of frozen-thawed embryos to the oviduct and uterus of pseudopregnant recipients (3l.4~56.7%).
This study aimed at developing cryopreservation protocol for chrysanthemum (Dendranthema grandiflora Tzelevcv. peak) shoot apices based on droplet-vitrification procedure, which is a combination of droplet-freezing and solution based vitrification. Progressive preculture of shoot apices in liquid MS medium supplemented with 0.3 and 0.7 M sucrose for 31 and 17 hours, respectively, was found optimum among preculture treatments tested. The composition of both loading and vitrification solutions significantly affected recovery growth of shoot tips before and after cryopreservation. Balancing glycerol and sucrose concentrations in the solutions was beneficial for recovery growth. The highest recovery after cryopreservation was observed when apical shoot tips were extracted from 4-week-old in vitro plantlets, progressively precultured with 0.3-0.5-0.7 M sucrose for 32-16-6 hours, respectively, then treated with loading solution comprising of 1.9 M glycerol + 0.5 M sucrose (35% PVS3 solution). Apices were then dehydrated with the vitrification solution consisted of 50% glycerol + 50% sucrose for 90 minutes then directly immersed in liquid nitrogen.
This study was performed to find out the optimal larval stage among trochophore, D-shaped and umbo stage larvae and the desirable protective additive such as fructose, glucose, sucrose and trehalose with cryoprotectant for cryopreservation of surf clam, Spisula sachalinensis larvae. Dimethyl sulfoxide and ethylene glycol were used as cryoprotectant and each cryoprotectant was made to 2.0 M with previous protective additives. The larvae were immersed in the preparations waited for 15 minutes to reach equilibration, and then frozen in a program freezer (-35$^{\circ}C$) and liquid nitrogen (-196$^{\circ}C$). The freezing rate of 1.0$^{\circ}C$ /min. was used for cryopreservation of trochophores before seeding temperature (-12$^{\circ}C$). The survival rate of frozen-thawed larvae increased as larval developing and that of umbo stage larvae was the highest as 96.1 ${\pm}$ 1.0%. The presence of lower concentration of disaccharides as sucrose or trehalose significantly enhanced survival rate when mixed with cryoprotectants (P<0.05). The results of our study indicate that desirable developmental stages of larvae and protective additive for cryopreservation are the umbo stage larvae and 0.2 M sucrose, respectively.
Most of the commercial devices for vitrification are directly immersed into the warming solution (WS) for increasing of warming rate. However, the previous modified cut standard straw (MCS) which has reported is difficult to immerse into the WS. The aim of this study was to investigate whether the long cut straw (LCS) could be useful as a stable tool for vitrified-warmed human blastocysts. A total of 138 vitrified-warmed cycles were performed between November 2013 and November 2014 (exclusion criteria: women ${\geq}38$ years old, poor responder, surgical retrieval sperm, and severe male factor). The artificial shrinkage was conducted using 29-gauge needles. Ethylene glycol and dimethyl sulfoxide (7.5% and 15% (v/v)) were used as cryoprotectants. Freezing and warming were conducted using the LCS tool. The cap of LCS was removed using the forceps in the liquid nitrogen ($LN_2$) and then directly immersed into the first WS for 1 min at $37^{\circ}C$ (1 M sucrose). Only re-expanded blastocysts were transferred after it was cultured in sequential media for 18-20 h. A total of 294 blastocysts were warmed, and all were recovered (100%). Two hundred eighty-five embryos were survived (96.9%). The vitrified-warmed blastocysts of all patients were transferred without any cancellation. We were able to achieve a reasonable implantation (24.2%), following by clinical pregnancy (36.2%), which then continued to ongoing pregnancy (36.2%), and live birth (31.2%). Using LCS is achieved the acceptable rates of survival, pregnancy and live birth. Therefore, the LCS could be considered as a stable and simple tool for human embryo vitrificaton.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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