Molecular cloning was carried out on the Danish strain of bovine viral diarrhea virus(BVDV) to construct strategy for the diagnostic tools and effective vaccine of BVD afterwards. A recombinant DNA clone(No. 29) was established successfully from cDNA for viral RNA tailed with adenine homopolymer at 3'-end. $^{32}P$-labeled DNA probes of 300~1,800bp fragments, originating from the clone 29, directed specific DNA-RNA hybridization results with BVDV RNA. Recombinant DNA of the clone 29 was about 5,200bp representing 41.6% of the full length of Danish strain's RNA, and restriction sites were recognized for EcoR I, Sst I, Hin d III and Pst I restriction enzymes in the DNA fragment.
A genomic clone carrying a proteinase inhibitor I sequence was isolated and characterized. The clone contained a 0.7 kb EcoRI fragment hybridized with tomato inhibitor I cDNA. The nucleotide sequence of the EcoRI fragment revealed presence of a truncated form of a proteinase inhibitor I gene of potato. The truncated gene contained the 5' flanking region and the first exon of a functional proteinase inhibitor I gene. Although the 5' flanking region contained the regulatory sequences TATAAA and CCACT, a deletion of 40 bp occurred between them.
Proceedings of the Korean Institute of Information and Commucation Sciences Conference
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2014.05a
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pp.520-522
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2014
The 3D animation these days is confronted with a situation that should develop new contents fit for those circumstances of media in which new platforms such as smart phones, tablet PCs, and smart TVs, etc. are in a rapid change and establish media strategies. Attempts are made of developing methods to diversify content type coping with new smart media characteristics including smart phones, tablet PCs, and smart TVs, etc., with materials of the same story and character, and developing animation video contents based on new media technology. This study made avatas utilizing iClone, avata 3D production technology and investigated 3D animation production methods through costume editing and motion editing.
Hairy root clones of Panax ginseng were established by selection of some hairy roots formed on the leaf, stem and root segments transformed with Agrobacterium rhizogenes strain $A_4$. The transformed roots grew well in MS medium under the dark condition. To confirm the transformation with Ri-T-DNA, dot blot hybridization and opine analysis were Performed. Among four hairy roots induced from different part of ginseng, the HB3 hairy roots were examined for selection of high-saponin-producing clones. Four clones isolated from HB3 hairy root cultures displayed various phenotypes characterized by growth and total saponin content. Maximum growth was obtained for cultures of HB3-10 clone and the content of total saponin was 0.55 wt%. However, higher amount of total saponin was obtained with HB3-2 clone cultures(0.74 wt%) in spite of lower growth. Dot blot hybridization confirmed the introduction of Ri-T-DNA in the plant genome. In the opine test, agropine and mannopine were detected from all hairy root clones.
Sampels of Korean field mice (apodemus peninsulae peninsulae Thomas ) from six localities in Korea were used for the analyses of mitochondrial DNa (Mt DNA) fragment patterns resulted from the digestion with eight restriction enzymes. A total of 29 fragments were recognized and seven mtDNA clones were revealed. The nucleotide-sequence divergences (p) among the seven mtDNA clones ranged from 0.42% to 2.01%. Moreover, the seven clones were grouped into three major subgroups with the mean divergence value of 1.52% among them. One subgroup was composed of three clones of 18 sample from three localities (16, Cheongu: 1, Mt. Sobaek : 1, Mt. weolak) L another subgroup, three clones of eight samples from four localities (2, Cheongju ; 2 , Mt. Weolak ; 2, Mt. Gaya ; 2, haenam) ; and the last subgroup, one clone of two samples from Cheongju. Three subgroups were also distinct with one another in their mtDNA genotypes of Stu I and the former two subgroups differed from the last subgroup in their genotypes with Pvu II. Further analyses with additional samples from various localities in Korea appeared to be necessary in order to clarify the taxonomic status of the distinct mtDNA subgroups.
JI SANG CHUN;KIM DOCKYU;YOON JUNG-HOON;OH TAE-KWANG;LEE CHOONG-HWAN
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.1
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pp.153-157
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2006
A soil metagenomic library was constructed using an E. coli-fosmid cloning system with environmental DNAs extracted from Kwangreung forest topsoil. We targeted the genes involved in the biosynthesis of bacterial polyketides. Initially, a total of 36 clone pools (10,800 clones) were explored by the PCR-based method using the metagenomic DNAs from each pool and a degenerate primer set, which has been designed based on the highly conserved regions among ketoacyl synthase (KS) domains in actinomycete type I polyketide synthases (PKS Is). Six clone pools were tentatively selected as positive and further examined through a hybridization-based method for selecting a fosmid clone containing PKS I genes. Colony hybridization was performed against fosmid clones from the 6 positive pools, and finally 4 clones were picked out and confirmed to contain the conserved DNA fragment of KS domains. In this study, we present a simple and feasible sorting method for a desired clone from metagenomic libraries.
Park, Ui-Sun;Choi, Kwan-Sam;Kim, Kab-Sig;Kim, Nam-Won;Choi, Kwang-Tae
Journal of Ginseng Research
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v.19
no.1
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pp.56-61
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1995
Molecular cloning and restriction mapping on ATPase $\alpha$-subunit gene (atpA) were carried out to obtain genomic information concerned with the gene structure and organization in Korean ginseng mitochondria. Two different clones containing the homologous sequence of atpA gene were selected from SalI and PstI libraries of mitochondrial DNA (mtDNA) of Korean ginseng. The sizes of mtDNA fragments inserted in SalI and PstI clones were 3.4 kb and 13 kb, respectively. Southern blot analysis with [$^{32}P$] labelled Oenothera atPA gene probe showed that atpA gene sequence was located in 2.0 kb XkaI fragment in PstI clone and in 1.7 kb XbaI fragment in SalI clone. A partial sequening ascertained that the SalI clone included about 1.2 kb fragment from SalI restriction site to C-terminal sequence of this gene but about 0.3 kb N-terminal sequence of open reading frame was abscent. The PstI fragment was enough large to cover the full sequence of atpA gene. The same restriction pattern of the overlapped region suggests that both clones include the same fragment of atiA locus. Data of Southern blot analysis and partial nucleotide sequencing suggested that mtDNA of Korean ginseng has a single copy of atpA gene. Key words ATPase a-subunit, mitochondrial DNA, Panax ginseng.
Two maize transposable elements, immobilized Ac (iAc) and Ds, have been introduced into the genome of a diploid potato clone (Solanum tuberosum Group Phureja clone 1.22). The iAc is a modified Ac that is supposed to be unable to transpose but is expected to trans-activate the transposition of a Ds that is unable to transpose by itself. When the leaf and stem explants of in vitro shoots of the clone 1.22 were inoculated with Agrobacterium tumefaciens strains harboring binary vectors containing the iAc and the Ds, calli were formed from the explants on media containing 50 mg/L of kanamycin, and shoots were regenerated from the calli. The regenerated shoots formed roots when cultured on media containing 100 mg/L of kanamycin, whereas untransformed shoots did not form roots on the same media. The PCR amplification of the DNA's from the transgenic plants confirmed that the iAc and the Ds elements were introduced into the potato genome of 1.22.
Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
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1999.04a
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pp.18-18
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1999
We characterized a cDNA clone for a low molecular weight heat-shock protein (LMW HSP) from tobacco named TLHS-l. Nucleotide sequence determination of TLHS-1 identified an open reading frame for 159 amino acids. To the upstream of the open reading frame, a sequence of 124 nucleotides was determined. To the 3' downstream of the open reading frame, 212 nucleotides were identified which carried poly(A)-tail. Comparison of the open reading frame and hydropathy plot of TLHS-1 with the previously reported class I LMW HSPs showed high identity which classified TLHS-1 as a class I LMW HSP cDNA clone. We proposed that there are six consensus regions in class I LMW HSPs. RNA blot hybridization for TLHS-1 showed a typical expression pattern of heat-shock-inducible gene from three common tobacco cultivars. The open reading frame of TLHS-1 was overexpressed in Escherichia coli. TLHS-1 protein confers thermal protection of other proteins in vitro and in vivo. Thermal induced aggregation of citrate synthase was reduced by purified TLHS-1 protein, and thermal death rate at $50^{\circ}C$ was reduced in E. coli expressing TLHS-l. From these data, we can expect that TLHS-1 acts as a molecular chaperone.perone.
The efficiency of in vitro regeneration of four clones of Populus euramericana, Canada blanc, Eugenii, I-45/51, and Wisconsin #5, was examined. Cytokinins and the combinations with auxins affected the rate of regeneration from the explants of root segments, stem internodes, and leaf discs. Overall, BA and the combination with auxins were effective in root segments and leaf discs of the Canada blanc clone, whereas zeatin and the combination with auxins were important in stem internodes of the Wisconsin #5 clone. The highest number of shoots averaging 17.6 $\pm$ 0.47 from root segments in the Canada blanc clone,18.2 $\pm$ 3.0 from stem internodes in the Wisconsin #5 clone, and 17.8 $\pm$ 1.92 from leaf discs in the Canada blanc clone were obtained with 2.0 mg/1 BA, 2.0 mg/l zeatin combined with 0.2 mg/l IAA, and 0.5 mg/l BA combined with 0.05 mg/l 2,4-D, respectively. In particular, the addition of 2,4-D into cytokinin medium promoted shoot proliferation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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