An extracellular protease (Mc1) was isolated from the nematode-trapping fungus Monacrosporium cystosporium by gel filtration, anion-exchange, and hydrophobic interaction chromatographies. This protease had a molecular mass of approximately 38 kDa and displayed an optimal activity at pH 7-9 and $56^{\circ}C$ (over 30 min). Its proteolytic activity was highly sensitive to the serine protease inhibitor PMSF (phenylmethylsulfonylfluoride, 0.1 mM), indicating that it belonged to the serine-type peptidase group. The Michaelis constant ($K_m$) and $V_max$ for substrate N-Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA were $1.67{\times}10^{-4}\;M$ and 0.6071 $OD_{410}$ per 30 s, respectively. This protease could degrade a broad range of substrates including casein, gelatin, BSA (bovine serum albumin), and nematode cuticle. Moreover, the enzyme could immobilize the free-living nematode Panagrellus redivivus and the pine wood nematode Bursaphelenchus xylophilus, suggesting that it might playa role in infection against nematodes. The encoding gene of Mc1 was composed of one intron and two exons, coding for a polypeptide of 405 amino acid residues. The deduced amino acid sequence of Mcl showed 61.4-91.9% identity to serine proteases from other nematode-trapping fungi. Our results identified that Mcl possessed biochemical properties including optimal reaction condition and substrate preference that are different from previously identified serine proteases.
Poly(ethylene glycol) methyl ether (PEG)-poly(${\beta}$-amino ester) (PAE) block copolymers were synthesized using a Michael-type step polymerization, and the construction of pH-sensitive polymeric micelles (PM) investigated. The ${\beta}$-amino ester block of the block copolymers functioned as a pH-sensitive moiety as well as a hydrophobic block in relation to the ionization of PAE, while PEG acted as a hydrophilic block, regardless of ionization. The synthesized polymers were characterized using $^1H-NMR$, with their molecular weights measured using gel permeation chromatography. The $pK_b$ values of the pH-sensitive polymers were measured using a titration method. The pH-sensitivity and critical micelle concentration (CMC) of the block copolymers in PBS solution were estimated using fluorescence spectroscopy. The pH dependent micellization behaviors with various bisacrylate esters varied within a narrow pH range. The critical micelle concentration at pH 7.4 decreased from 0.032 to 0.004 mg/mL on increasing the number of methyl group in the bisacrylate from 4 to 10. Also, the particle size of the block copolymer micelles was determined using dynamic light scattering (DLS). The DLS results revealed the micelles had an average size below 100 nm. These pH-sensitive polymeric micelles may be good carriers for the delivery of an anticancer drug.
Park, Jeong-Bae;Lee, Young-Min;Park, Moon-Ki;Min, Taesun;Lee, Sei-Jung
Journal of Environmental Science International
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v.28
no.2
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pp.183-189
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2019
Curcumin ($C_{21}H_{20}O_6$) is a hydrophobic polyphenol found in turmeric. Although curcumin has been used as a natural medicine, its major limitation is related to poor absorption from the gut. Therefore, we developed a method for preparation of Curcumin Nanospheres (CN) to improve the aqueous-phase solubility of curcumin and investigate the functional role of CN in promoting feed efficiency and odor reduction in mice. CN showed inhibitory effects on actate dehydrogenase (LDH) cytotoxicity induced by ecotoxic substance toluene in gut epithelial HCT116 cells. In addition, the weights of internal organs (liver, heart, kidneys, and spleen) and the levels of serum Glutamate Oxaloacetate Transaminase (GOT), Glutamate Pyruvate Transaminase (GPT), and LDH did not show significant differences between mice administered oral CN for two weeks and compared to the control group. Interestingly, CN not only reduced hydrogen sulfide ($H_2S$) and ammonia ($NH_3$) levels and fecal odor, but also improved feed efficiency in mice. These results demonstrate that oral nano-delivery of anti-ecotoxicological CN is a functional system to deliver curcumin to the gut to improve feed efficiency and reduce fecal odor in mice.
Kim, Subin;Sung, Jongmin;Yeon, Jungyoon;Choi, Seung Hun;Jin, Mi Sun
Molecules and Cells
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v.42
no.6
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pp.460-469
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2019
Bacterial ${\alpha}-type$ carbonic anhydrase (${\alpha}-CA$) is a zinc metalloenzyme that catalyzes the reversible and extremely rapid interconversion of carbon dioxide to bicarbonate. In this study, we report the first crystal structure of a hyperthermostable ${\alpha}-CA$ from Persephonella marina EX-H1 (pmCA) in the absence and presence of competitive inhibitor, acetazolamide. The structure reveals a compactly folded pmCA homodimer in which each monomer consists of a 10-stranded ${\beta}-sheet$ in the center. The catalytic zinc ion is coordinated by three highly conserved histidine residues with an exchangeable fourth ligand (a water molecule, a bicarbonate anion, or the sulfonamide group of acetazolamide). Together with an intramolecular disulfide bond, extensive interfacial networks of hydrogen bonds, ionic and hydrophobic interactions stabilize the dimeric structure and are likely responsible for the high thermal stability. We also identified novel binding sites for calcium ions at the crystallographic interface, which serve as molecular glue linking negatively charged and otherwise repulsive surfaces. Furthermore, this large negatively charged patch appears to further increase the thermostability at alkaline pH range via favorable charge-charge interactions between pmCA and solvent molecules. These findings may assist development of novel ${\alpha}-CAs$ with improved thermal and/or alkaline stability for applications such as $CO_2$ capture and sequestration.
Statement of Problem: Recently, resin cements have become more widely used and have been accepted as prominent luting cements. Current resin cements exhibit less microleakage than conventional luting cements. However, the constant contact with water and exposure to occlusal forces increase microleakage even in resin cements inevitably. Most bonding resins have been modified to contain a hydrophilic resin such as 2-hydroxyethylmethacrylate (HEMA) to overcome some of the problems associated with the hydrophobic nature of bonding resins. By virtue of these modifications, bonding resins absorb a significant amount of water, and there may also be significant stresses at bonding interfaces, which may adversely affect the longevity of restorations. Therefore the reinforcement of water stability of resin cement is indispensable in future study. Purpose: This study was conducted to examine the influence of water retention on microleakage of two resin cements over the period of 6 months. Materials and Methods: 32 extracted human teeth were used to test the microleakage of a single full veneer crown. Two resin cements with different components and adhesive properties - Panavia F (Kuraray Co., Osaka, Japan) and Super-Bond C&B (Sun Medical Co., Kyoto, Japan)- were investigated. The storage medium was the physiological saline solution changed every week for 1 month, 3 months, and 6 months. One group was tested after storage for 1 day. At the end of the each storage period, all specimens were exposed to thermocycling from $5^{\circ}C$ to $55^{\circ}C$ of 500 cycles and chewing simulation of 50,000 cycles, and then stained with 50% silver nitrate solution. The linear penetration of microleakage was measured using a stereoscopic microscope at ${\times}40$ magnification and a digital traveling micrometer with an accuracy of ${\pm}3{\mu}m$. Values were analyzed using two-way ANOVA test, Duncan's multiple range tests (DMRT). Results : Statistically significant difference of microleakage was shown in the 3-month group compared with the1-day or 1-month group in both systems (p<0.05) and there were statistically significant differences in microleakage between the 3-month group and the 6-month group in both systems (p<0.05). The two systems showed different tendency in the course of increased microleakage during 3 months. In Panavia F, microleakage increased slowly throughout the periods. In Super-Bond C&B, there was no significant increase of microleakage for 1 month, but there was statistically significant increase of microleakage for the next 2 months. For the mean microleakage for each period, in the 3-month group, microleakage of Super-Bond C&B was significantly greater than that of Panavia F. On the other hand, in the 6-month group, microleakage of Panavia F was significantly greater than that of Super-Bond C&B (p<0.05). Conclusion: Within the limitation of this study, water retention of two different bonding systems influence microleakage of resin cements. Further studies with the longer observation periods in viro are required in order to investigate water stability and the bonding durability of the resin cement. CLINICAL IMPLICATIONS Microleakage at the Cement-tooth interfaces did not necessarily result in the failure of the crowns. But it is considered to be a major factor influening the longerity of restorations. Further clinical approaches for decreasing the amount of microleakage are required.
Cave environment provides special ecosystems for evolution of lives distant from surface environments. We investigated bacterial and archaeal communities of wall biofilm obtained from of a volcanic cave (Daesubee) in Jeju, Republic of Korea. Bacterial and archaeal 16S rRNA genes were PCR-amplified and sequenced using pyrosequencing technologies. Unique prokaryotic communities with low diversities were observed. The main bacterial sequences (ca. 83% of total reads) were affiliated with Pseudonocardia mongoliensis of phylum Actinobacteria and clustered with clones obtained from various caves. Reflection of light on the wall surface of cave might be caused by formation of beads of water caused by hydrophobic filaments of actinobacterial colonies. Main archaeal sequences (ca. 65.7% of total reads) were related with those of I.1a-Associated group of phylum Thaumarchaeota. The sequences were related with that of Candidatus Nitrosotalea devanaterra which was known to oxidize ammonia under acidic condition (ca. pH 5.0). Nutrients leached through volcanic soils contribute formation of unique microbial communities of wall biofilm of cave Daesubee.
The correlations between chromatographic parameters of monosubstituted benzenes and several physical parameters in reversed phase liquid chromatography were studied. The relationships between retention data and polarity index were investigated by plotting $log(log k'_S/k'_B)$ vs. $P'_S/P'_B$ which were relative retention and relative polarity index of monosubstituted benzenes with respect to benzene, respectively. The linear relationship between relative retention and polarity index was observed for the monosubstituted benzenes having polar group, while in case of those having nonpolar group, the good linearity was observed by combination with relative molecular weight i.e. $(P'_S/P'_B)/(MW_S/MW_B)$. Multivariant regression analysis, $a(P'_S/P'_B)+b(MW_S/MW_B)$+c did not give significantly better correlations compared to single variant analysis, $a[(P'_S/P'_B)/(MW_S/MW_B)]$+c, but multiple stepwise regression analysis was recommended when several physical parameters simultaneously were chosen. The best correlation between retention data for monosubstituted benzenes taken from the literature and substituent constant(${\pi}$), derived from hydrophobic parameter and the first order molecular connectivity index$(^1{\chi}^{\nu})$, was established for methanol/water mobile phase system. The larger the surface coverage of the stationary phase, the higher was the correlation coefficient between these two parameters and retention data.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.28
no.10
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pp.1046-1054
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2006
The raw water DOC contained 39.3% of hydrophilics, 42.9% of hydriophobic, and 17.8% of transphilic. The hydrophobic fraction in this raw water was mostly fulvic acid. Fulvic acid comprised of 62% and the rest was humic acid(38%). There was more carboxylic acid functional group(64%) than phenolic group(36%). HPI-N and HPI-C comprised of 17% and 22% in the hydrophilic portion, respectively. The fouling mechanisms on the membrane surface and into its porous structure were analyzed in terms of several kinetic models. In order to analyze the fouling kinetics, the various kinetic models described in this paper were used to fit the experimental results. The kinetic models and kinetic constants obtained for each operation condition. The permeate flux was rapidly declined by simultaneous pore blocking and cake formation. Also, the permeate flux declined with decreasing internal pore size resulted from organic deposition into the membrane pore. The results of the membrane fouling test using UF membrane according to NOM fractions. HPI-N caused more fouling than HPI-C. Humic acid caused more fouling than fulvic acid probably due to higher adsorption capacity. Since humic acid has higher adsorption capacity than fulvic acid, it would be more adsorbed onto the membrane pores.
In this research, polymeric anionic surfactants having various molecular weights and acid values were synthesized using a continuous stirred tank reactor (CSTR). The CSTR has an advantage of higher production rate and more constant product properties compared to batch and semi-batch reactors. The polymeric surfactants were made using butyl acrylate as a hydrophobic group and acrylic acid as a hydrophilic group. The synthesized polymeric surfactants were ionized with alkali solution and were used as an anionic surfactant. To investigate the properties as a surfactant, the properties of the synthesized surfactant, such as acid value, critical micelle concentration (CMC) and molecular weight, were measured. The results showed that the acid values of the polymeric surfactants were 60 to 380 and a number average molecular weight were 8,000 to 13,000 g/mol. Also, it was found that the CMC was around 0.01 g/ml, which showed similar level values with ordinary surfactant. To prove the performance of the polymeric surfactant, acrylic emulsion PSAs were synthesized using the acquired polymeric surfactant. The results showed that the maximum peel strength of 21.24 N/25mm when acid value was 150 and molecular weight was 8,500 g/mol. The values of peel strength and initial tack of acrylic emulsion PSAs using polymeric surfactant synthesized in this study showed much higher than those of reference PSAs synthesized using ordinary anionic surfactant, SDS (Sodium Dodecyl Sulfate) and SDS/TRX (Triton X-100).
We prepared 10cm-diameter Si(100)/500 $\AA$-Si$_3$N$_4$/Si(100) wafer Pairs adopting 500 $\AA$ -thick Si$_3$N$_4$layer as insulating layer between single crystal Si wafers. Si3N, is superior to conventional SiO$_2$ in insulating. We premated a p-type(100) Si wafer and 500 $\AA$ -thick LPCVD Si$_3$N$_4$∥Si (100) wafer in a class 100 clean room. The cremated wafers are separated in two groups. One group is treated to have hydrophobic surface and the other to have hydrophilic. We employed a FLA(fast linear annealing) bonder to enhance the bond strength of cremated wafers at the scan velocity of 0.1mm/sec with varying the heat input at the range of 400~1125W. We measured bonded area using a infrared camera and bonding strength by the razor blade crack opening method. We used high resolution transmission electron microscopy(HRTEM) to probe cross sectional view of bonded wafers. The bonded area of two groups was about 75%. The bonding strength of samples which have hydrophobic surface increased with heat input up to 1577mJ/$m^2$ However, bonding strength of samples which have hydrophilic surface was above 2000mJ/$m^2$regardless of heat input. The HRTEM results showed that the hydrophilic samples have about 25 $\AA$ -thick SiO layer between Si and Si$_3$N$_4$/Si and that maybe lead to increase of bonding strength.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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