Riboflavin is a water-soluble vitamin, which serves as a precursor to flavin mononucleotide and flavin adenine dinucleotide. This study aimed to develop a simple and rapid liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) analysis for the quantification of riboflavin in the Beagle dog plasma. This method utilized simple protein precipitation with acetonitrile and 13C4, 15N2-riboflavin was used as an internal standard (IS). For chromatographic separation, a hydrophilic interaction liquid chromatography (HILIC) column was used with gradient elution. The mobile phase consisted of 0.1% (v/v) aqueous formic acid with 10 mM ammonium formate and acetonitrile with 0.1% (v/v) formic acid. Since riboflavin is an endogenous compound, 4% bovine serum albumin in phosphate buffered saline was used as a surrogate matrix to prepare the calibration curve. The quantification limit for riboflavin in the Beagle dog plasma was 5 ng/mL. The method was fully validated for its specificity, sensitivity, accuracy and precision, recovery, and stability according to the US FDA guidance. The developed LC-MS/MS method may be useful for the in vivo pharmacokinetic studies of riboflavin.
Poly(vinyl acetate) films containing benzophenone were photocrosslinked by continuous UV irradiation.UV irradiation of PVAc film containing 5% benzophenone induced bulk crosslinking of the polymer indicated by 84.1% of gel fraction after ethyl acetate extraction. The crosslinking was attributed to the recombination of tertiary polymer radicals generated upon UV irradiation, which was enhanced by the hydrogen abstraction of benzophenone. Also the UV irradiation resulted in scission of ester linkage and photooxidation of PVAc surface, which was verified by ATR and zeta potential analysis, implying that the PVAc surface became more polar and hydrophilic. The zeta potential proportionally increased from +4.5mV to -26.8 mV with increasing UV irradiation. Also the surface energy of the PVAc film increased with higher UV irradiation upto 56.5 $mJ/m^2$ by the enhanced Lewis acid/base component with larger contribution of Lewis acid parameter. Accordingly the crosslinked PVAc showed higher thermal stability with increasing UV energy.
Hydrophilic poly(acrylonitrile) [PAN] membrane with good molecular weight cut-off characteristics were prepared by using the phase inversion method. Permeability and molecular weight cut-off of the membranes were measured through the ultrafiltration test. On the surface of the PAN support membranes, poly(acrylic acid) [PAA] was deposited by dip-coating. The water permeability of the PAN support membrane had $0.17~31\textrm{mm}^3/m^{2} \cdot s \cdot Pa$, the molecular weight cut-off 42, 000~150, 000. The transport characteristics of the prepared composite membranes were significantly affected by the variation of the support membrane mophology. The permeability of the composite membrane was decreased with increasing molecular weight cut-off of the support membrane, and the separation factor was slightly changed depending on the feed concentration.
A rapid, accurate and precise method for the determination of 22 amino acids in Isatidis Radix by Hydrophilic Interaction Ultra-High-Performance Liquid Chromatography Coupled with Triple-Quadrupole Mass Spectrometry (HILIC-UPLC-MS/MS) was established. Chromatographic separation was carried out on a Acquity UPLC BEH Amide column ($2.1mm{\times}100mm$, $1.7{\mu}m$) with gradient elution of acetonitrile (containing 0.05% formic acid and 2 mM ammonium formate) and water (containing 0.15% formic acid and 10 mM ammonium formate) at a flow rate of 0.4 mL/min; Waters Xevo$^{TM}$ TQ worked in multiple reaction monitoring mode. All components were separated in 17 min. All calibration curves were linear ($R^2$ > 0.991) over the tested ranges. The limits of detection (LOD) and limits of quantitation (LOQ) for these compounds were 0.21-79.55 and 0.72-294.23 ng/mL, respectively. The average recoveries were in the range of 93.75-104.16% with RSD value less than 6.56%. Therefore, this method could be an alternative assay for the determination of 22 amino acids in Isatidis Radix due to its rapidness, sensitivity, less sample and solvent consumption.
Heat shock proteins serve as chaperone by preventing the aggregation of denatured proteins and promote survival of pathogens in harsh environments. In this study, heat shock gene encoding a 84-kDa (p84) protein, which is one of the three major heat shock proteins in S. pneumoniae, was cloned and characterized. PCR with a forward primer derived from N-terminal amino acid sequence of the p84 and a reverse primer derived from the conserved second ATP-binding region of Clp family was used for amplification of the gene encoding the p84 and subsequently the PCR product was used for sequence determination. Sequence analysis of the p84 gene demonstrated that it is a member of ClpL. The deduced amino acid sequence of pneumococcal ClpL shows homology with other members of the Clp family, and particularly, even in variable leader region, with bovine Clp-like protein and L. lactis ClpL. S. pneumoniae clpL is the smallest clop member (701 amono acids) containing the two conserved ATP-binding regions, and hydrophilic N-terminal variable region of pneu-mococcal Clp ATPase is much shorter than any known Clp ATPases. Histidine tagged ClpL was overexpressed and purified from E. coli. Immunoblot analysis employing antisera raised against pneumococcus p84 demonstrated no cross-reactivity with Clp analog in Eschericha coli, Staphylococcus aureus and human HeLa cells. Preimmunization of mice with ClpL extended mice life partially but did not protect them from death.
Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition
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v.23
no.4
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pp.604-613
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1994
Hydrophilic brown pigments(HBPs) produced during fermentation and aging the domestic Meju and Doenjang were separated by dialysis and chromatography , and their antioxidant activity were measured . The chemical properties of HBP were determined by UV and IR spectrophotometry. HBPs contents were found to be 93.1 mg/g and 183.2mg/g in Meju fermentated for 30 days and 80 days , respectively. The ratio of dialysate to diffusate of the HBPs were appeared to be 70 : 30 and 87 :13 in the Meju fermented for 30 days and 80 days, respectively. and the rtio in the Doenjang aged for 60 days was 91 :9 , indicating that dialysate slowly days, respectively, and the ratio in the Doenjang aged for 60 days was 91 : 9, incidatin that dialysate slowly increased by the fermentation . Both portion exhibited strong antioxidant activity, but more stronger antioxidant activity was found in the dialysate. DEAE-celluose column chromatography showed that dialysate contained more materials eluted by 0.01-0.03M HCI solution than 0.01M acetate buffer, but diffusate showed opposite results. The degree of browning reaction and antioxdiant activity found in the fraction eluted by HCI solution was stronger than that of the fraction eluted by acetate buffer. The fraction eluted from DEAE-cellulose column chormatogrphy was further fractionaged by TLC and found that strong antioxidant activity was present in the fractions which did not possess fluorescenece and showed a negative ninhydrin reaction. TLC fractions of HCI eluant in Meju exhibited a strong absorbance at 260-280nm, but most of other fractions did not show any absorbance at UV region. TLC fractions from dialysate and diffusate showed fairly identical IR spectrum with absorbance at 3400cm-1, 2800cm-3000cm -1, 1600cm, -1 1400cm-1 and 1100 cm-1 , however, in addition to these absorbances, the spectrum from HCI eluant of Meju exhibited a strong absorbance at 1750cm , indicating the carbonic acid or carbonate ester.
Proceedings of the Polymer Society of Korea Conference
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2006.10a
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pp.268-268
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2006
Due to their multipotency, stem cells can differentiate into a variety of specialized cell types, such as chondrocytes, osteoblasts, myoblasts, and nerve cells. As an alternative to mature tissue cells, stem cells are of importance in tissue engineering and regenerative medicine. Since interactions between scaffold and cells play an important role in the tissue development in vitro, synthetic oligopeptides have been immobilized onto polymeric scaffolds to improve specific cell attachment and even to stimulate cell differentiation. In this study, chondrogenic differentiation of stem cells was evaluated using surface-modified PLLA scaffolds, i.e., either hydrophilic acrylic acid (AA)-grafted PLLA or RGD-immobilized one. Porous PLLA scaffolds were prepared using a gas foaming method, followed by plasma treatment and subsequent grafting of AA to introduce a hydrophilicity (PLLA-PAA). This was further processed to fix RGD peptide to make an RGD-immobilized scaffold (PLLA-PAA-RGD). Stem cells were seeded at $1{\times}10^{6}$ cells per scaffold and the cell-PLLA constructs were cultured for up to 4 weeks in the chondrogenic medium. Using these surface-modified scaffolds, adhesion, proliferation, and chondrogenic differentiation of stem cells were evaluated. The surface of PLLA scaffolds turned hydrophilic (water contact angle, 45 degrees) with both plasma treatment and AA grafting. The hydrophilicity of RGD-immobilized surface was not significantly altered. Cell proliferation rate on the either PLLA-PAA or PLLA-PAA-RGD surface was obviously improved, especially with the RGD-immobilized one as compared to the control PLLA one. Chondrogenic differentiation was clearly identified with Safranin O staining of GAG in the AA- or RGD-grafted PLLA substrates. This study demonstrated that modified polymer surfaces may provide better environment for chondrogenesis of stem cells.
Park, In-Woo;Hwang, Gye-Soon;Hong, Young-Ki;Bae, Han-Soo;Bae, Kie-Seo
Textile Coloration and Finishing
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v.21
no.1
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pp.38-45
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2009
First of all, the properties imparted to PET fabrics are resistance to and recovery from creasing or wrinkling when wet or dry; high resistance to stretch in the filament yarns but not in the staple; high abrasion resistance; good texture and appearance; resistance to heat ageing; good chemical resistance and good resistance, behind glass, to sunlight. But, the low moisture regain of PET fabric conduces to static troubles in textile processing. Furthermore, garments made from PET may, during wear, develop electric charges which attract to the fabric particles of soil(dirt, swarf, dust) flying in the air, so that the cuffs of shirts, for example, become soiled quickly and are not easily laundered clean. The sericin constitutes 25$\sim$30% of silk protein and surrounds the fibroin fiber with sticky layer that supports the formation of a cocoon. The useful biochemical properties of sericin protein are oxidation resistant, antibacterial, UV resistant, hydrophilic property, and good affinity with hydrophobic material. These properties can be used as an improving reagent or a coating agent for natural and synthetic fibers, fabrics, and other intermediate products. The sericin is also applied to cross-link, and can be blended with other materials. In this study, we modified the surface of PET fabric by mixture of sericin finishing agent; sericin, polyuretane binder and 1,2,3,4-butanetetracarboxylic acid (BTCA) cross-link agent. Also, we investigated the finshing effect; moisture regain, stiffness, handle, drape and electrostatic. The moisture regain of PET fabric treated with sericin finishing agent was higher than that of untreated PET fabric. As a result of evaluating influence about handle of PET fabrics treated with sericin finishing agent, it was confirmed that the sericin finishing agent could be use as a linen like finishing agent.
Purpose: The aim of this study was to investigate the combined effects of physical and chemical surface factors on in vivo bone responses by comparing chemically modified hydrophilic sandblasted, large-grit, acid-etched (modSLA) and anodically oxidized hydrophobic implant surfaces. Methods: Five modSLA implants and five anodized implants were inserted into the tibiae of five New Zealand white rabbits (one implant for each tibia). The characteristics of each surface were determined using field emission scanning electron microscopy, energy dispersive spectroscopy, and confocal laser scanning microscopy before the installation. The experimental animals were sacrificed after 1 week of healing and histologic slides were prepared from the implant-tibial bone blocks removed from the animals. Histomorphometric analyses were performed on the light microscopic images, and bone-to-implant contact (BIC) and bone area (BA) ratios were measured. Nonparametric comparison tests were applied to find any significant differences (P<0.05) between the modSLA and anodized surfaces. Results: The roughness of the anodized surface was $1.22{\pm}0.17{\mu}m$ in Sa, which was within the optimal range of $1.0-2.0{\mu}m$ for a bone response. The modSLA surface was significantly rougher at $2.53{\pm}0.07{\mu}m$ in Sa. However, the modSLA implant had significantly higher BIC than the anodized implant (P=0.02). Furthermore, BA ratios did not significantly differ between the two implants, although the anodized implant had a higher mean value of BA (P>0.05). Conclusions: Within the limitations of this study, the hydrophilicity of the modSLA surface may have a stronger effect on in vivo bone healing than optimal surface roughness and surface chemistry of the anodized surface.
To investigate surface properties and interception performances of the new modified PVDF membrane coated with Graphene Oxide (GO) and nano-$TiO_2$ (for short the modified membrane) via the interface polymerization method combined with the pumping suction filtration way, filtration experiments of the modified membrane on Humic Acid (HA) were conducted. Results showed that the contact angle (characterizing the hydrophilicity) of the modified membrane decreased from $80.6{\pm}1.8^{\circ}$ to $38.6{\pm}1.2^{\circ}$. The F element of PVDF membrane surface decreased from 60.91% to 17.79% after covered with GO and $TiO_2$. O/C element mass ratio has a fivefold increase, the percentage of O element on the modified membrane surface increased from 3.83 wt% to 20.87%. The modified membrane surface was packed with hydrophilic polar groups (like -COOH, -OH, C-O, C=O, N-H) and a functional hydrophilic GO-polyamide-$TiO_2$ composite configuration. This configuration provided a rigid network structure for the firm attachment of GO and $TiO_2$ on the surface of the membrane and for a higher flux as well. The total flux attenuation rate of the modified membrane decreased to 35.6% while 51.2% for the original one. The irreversible attenuation rate has dropped 71%. The static interception amount of HA on the modified membrane was $158.6mg/m^2$, a half of that of the original one ($295.0mg/m^2$). The flux recovery rate was increased by 50%. The interception rate of the modified membrane on HA increased by 12% approximately and its filtration cycle was 2-3 times of that of the original membrane.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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