Glycosidation of 20(S)-protopanaxadiol obtained by the alkaline hydrolysis of total ginsenosides with 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-${\alpha$-D-glucopyranosyl bromide in the presence of $CdCO_3$ in benzene-dioxane gave a mixture of acetylated monoglucosides and diglucosides in a total yield of 68%. Under the same condenstion condition, 20-dehydroxyglucosides were formed by dehydration of 12-O-glucosides. The structures of produced glycosides were elucidated as 3-O-${\beta$-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxadiol, 12-O-${\beta$-D-glucopyranosyl-dammar-20(22), 24-dien-$3{\beta},12{\beta}$-diol, 3,12-di-O-${\beta}$-D-glucopyranosyl-dammar-20(22), 24-dien-$3{\beta},\;12{\beta}$-diol, respectively.
It was studied in order to improve the yield of serrapeptase production in fermentation that organic nitrogen sources play important roles not only as inducer, repressor and activator, but also nitrogen sources. From the investigation of the effect of Na-caseinate on the induction of serrapeptase production, it was elucidated that real inducer was leucine and strong repressor was cysteine, which were produced through hydrolysis of proteins. Serrapeptase production was strongly induced by Na-caseinate in culture time 12 hrs, but was weakly induced before and after that time. Therefore fed batch culture where partial amount of Na-caseinate is added in 12 hrs, is better than batch culture where total amount of Na-caseinate is added at the beginning. Cysteine, methionine, MgSO$_{4}$, and so on, sulfur-containing materials, repressed the serrapeptase production. In the addition of mineral salts, chlorinated salts is better than sulfated salts because of sulfur repression. The synergic effect of soybean meal with Na-caseinate on the serrapeptase production resulted from Mn$^{2+}$ contained in soybean meal, of which the optimal concentration is 4 mM in enzyme production.
The natural crosslinking agent genipin has been applied widely in biomedicines and foods nowadays. Because of the special hemiacetal ring structure in its molecule, it can only be prepared by hydrolysis of geniposide according to biocatalysis. In this research, strategies including aqueous-organic biphasic catalysis and substrate fed-batch mode were adopted to improve the biocatalysis process of genipin. A 10 L ethyl acetate-aqueous biphasic system with geniposide fed-batch led to a satisfying genipin yield. With Fusarium solani ACCC 36223, 15.7 g/l genipin in the ethyl acetate phase was obtained, corresponding to space-time yields of 0.654 g l-1 h-1.
The syntheses of urocanic acid esters was optimized, starting from p-toluenesulfonic acid salt of this acid and long chain fatty alcohols in the organic solvent and extracting water from it by means of azeotropic Compound. The salts of these urocanic acid esters showed amphoteric properties, but their micellization enhances their rate of hydrolysis leading to the free amine. Nevertheless the long chain gives to the esters themselves an amphoteric character allowing their solubilization in micellar media and in microemulsions the result, yield could enhanced.
The reaction of 2-aminobenzamide with phthalic acid anhydride In dioxane produced a bicyclic product 2,8-dioxoisoindole(1,2,a) quinazoline (I) in addition to hydrolysis product 2(2-Carboxyphenyl)-1,2-2H-quinazoline-4-one (II). The yields were 64% and 30% respectively. On the other hand, the same reaction in DMF afforded compound (I) and 2(2N-dimethyl carbamyl phenyl)-1,4-2H-quinazoline-4-one (III) in 30% and 60% yield respectively. The compound III was also obtained by the reaction of compound II with dimethylamine. However the reaction of 2-aminobenzamide with neat succinic acid anhydride gave only bicyclic product 2,8-oxopyrrolidine (2,1,a)-1,4-2H-quinazoline (IV) in 93%.
In the previous research about ethanol production, we confirmed that SFW(saccharified foodwastes) medium(0.56g-ethanol/g-glucose) is mere efficient than YM medium(0.538g-ethanol/g-glucose). Ethanol production using SFW needs large enzyme cost due to the enzymatic hydrolysis of foodwastes, although the enzymes was obtained from our economical enzyme production methods, using the intact whole culture broth of Trichoderma harzianum FJ1. Therefore, in this research we used synchronous saccharification and fermentationmethod to produce ethanol using foodwastes. Ethanol production yield was 0.45g-ethanol/g-reducing sugar in synchronous saccharification and for-mentation by a fed-batch mode.
For the purpose of developing more effective chelating agents, we have synthesized a diethylene triamine pentaacetic acid(DTPA) analogue by using an amino acid. S-(N-Boc-aminophenyl)-Cys(t-Bu4-DTPA) methylester was prepared in 6 steps with total yield of 47.9%. For the sake of introducing a biomolecule to the DTPA derivative, a selective hydrolysis was performed with 3 M HCl/Ethylacetate = 1 : 3 ($25{^{\circ}C}$, 30 min, vigorous stirring). $^{166}Ho$-Cys-DTPA and $^{166}Ho$-Biotin-Cys-DTPA were prepared by mixing $^{166}Ho$ with DTPA derivatives at room temp in a HCl solution (pH = 5) and the radiochemical stabilities (> 99%) were maintained for over 6 hrs in vitro.
Purified preparation of .betha.-amylase is obtained from radish root by the means of fractional precipitation with ammonium sulfate. Purified preparation saccharifies the starch, .betha.-maltose being formed. Dextrinization in the true sense does not take place. Hydrolysis ceases when approximately 50% of the theoretical yield of maltose is obtained and there remains a substance (to be .betha.-limit dextrin) which gives a blue-violet with iodine, no glucose being formed. Stability of preparation is optimal at pH 4-9 and more completely inactivated at 65.deg. in fifteen minutes. .betha.-Amylase of radish exhibits optimal activity at and near pH 5.0, which varied depending upon the buffer. Calcium and chloride ions do not effect the activities of enzyme. The results of experiments with oxidizing, alkylating and mercaptide-forming reagents which have been reported to be specific for sulfhydryl groups confirm that free sulfhydryl groups are essential to the activity of .betha.-amylase from radish.
The bacteriolytic enzyme produced from Bacillus subtilis SH-1 was purified and characterized, and its molecular weight was determined. The bacteriolytic enzyme activity was increased about 66.5 times via purification with recovery yield of 18.5%. The optimum pH and temperature of this enzyme were 9.0 and 50$\circ$C. The enzyme was stable within a pH range of 6.0-10.0 and unstable above 60 . The molecular weight of the enzyme was estimated to be 23,000 dalton in a form of monomer with no other subunits. Effect of the enzyme on the lysis of bacteria engaged in food posion was tested. The lysis degree was below 31% against Gram negative bacteria and above 48% in Gram positive bacteria. The values higher than 73% were obtained against Vibrio sp. and Listeria sp. As the turbidity of dissolved peptidoglycan clecreases, the free amino group levels were increased. And, based on hydrolysis of casein, this enzyme was thought to be an endopeptidase.
From the crude saponin obtained from the pods of Gleditschia officinalis seven spots were identified by TLC and quantity of gleditschia B was the highest among them. Ten kinds of prosapogenins were identified from the partial hydrolysates of crude saponin and found that prosapogenin E contain oleanolic acid as a sapogenin and prosapogenin F does echinocystic acid as the sapogenin. Hydrolysis of crude saponin yield glucose and rhamnose and the same sugar were also identified from the mixture of prosapogenin E and F.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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