The aim of this study was to modify phytase YiAPPA via protein surficial residue mutation to obtain phytase mutants with improved thermostability and activity, enhancing its application potential in the food industry. First, homology modeling of YiAPPA was performed. By adopting the strategy of protein surficial residue mutation, the lysine (Lys) and glycine (Gly) residues on the protein surface were selected for site-directed mutagenesis to construct single-site mutants. Thermostability screening was performed to obtain mutants (K189R and K216R) with significantly elevated thermostability. The combined mutant K189R/K216R was constructed via beneficial mutation site stacking and characterized. Compared with those of YiAPPA, the half-life of K189R/K216R at 80℃ was extended from 14.81 min to 23.35 min, half-inactivation temperature (T5030) was increased from 55.12℃ to 62.44℃, and Tm value was increased from 48.36℃ to 53.18℃. Meanwhile, the specific activity of K189R/K216R at 37℃ and pH 4.5 increased from 3960.81 to 4469.13 U/mg. Molecular structure modeling analysis and molecular dynamics simulation showed that new hydrogen bonds were introduced into K189R/K216R, improving the stability of certain structural units of the phytase and its thermostability. The enhanced activity was primarily attributed to reduced enzyme-substrate binding energy and shorter nucleophilic attack distance between the catalytic residue His28 and the phytate substrate. Additionally, the K189R/K216R mutant increased the hydrolysis efficiency of phytate in food ingredients by 1.73-2.36 times. This study established an effective method for the molecular modification of phytase thermostability and activity, providing the food industry with an efficient phytase for hydrolyzing phytate in food ingredients.
The protective effects of sea tangle (Laminaria japonica) extract and fucoidan components on the attack of oxygen radicals in kidney were studied, Sprague-Dawley (SD) male rats (210 $\pm$ 5 g) were with fed experimental diets of Dasi-Ex group (sea tangle extract powder of $4.0\%$ added to control diet), Euco-I, II and III groups (fucoidan powder of 1, 2 and $3\%$, respectively, added to Dasi-Ex group) for 45 days, Hydroxyl radical formations were significantly decreased ($10\~15\%$ and $15\~30\%$) in mitochondria and microsomes of Dasi-Ex and Fuco-I, II, III groups compared with control group. Hydrogen peroxide formations were also significantly decreased ($10\~15\%$) in microsomes of Dasi-Ex and Fuco-I, II, III groups compared with control group. Significant differences in mitochondrial basal oxygen radical (BOR) and microsomal induced oxygen radical (IOR) formations of Dasi-Ex and Fuco-I groups could not be obtained, but mitochondrial BOR and microsomal IOR formations were significantly decreased ($12\~15\%$ and $13\~14\%$) in Fuco-II and III groups compared with control group. BOR formations were significantly decreased ($12\~25\%$) in microsomes of Dasi-Ex and Fuco-I, II, III groups, and IOR formations were also significantly decreased ($10\~15\%$) in mitochondria of Fuco-I, II, III groups compared with control group, Significant differences in mitochondrial Mn-SOD activities of Dasi-Ex group could not be obtained, but mitochondrial Mn-SOD activities were dose-dependently increased by $8\%,\;16\%$ and $36\%$ in Fuco-I, II and III groups compared with control group, Mn-SOD activities an microsome were significantly increased about $20\%$ in Dasi-Ex group, while they were remarkably increased about $40\%$ in Fuco-I, II and III groups compared with control group. lipid peroxide contents were significantly decreased about $15\%$ and $15\~25\%$ in mitochondria and microsomes of Fuco-II and III groups. Membrane fluidities resulted in marked increases ($20\~35\%$ and $17\~24\%$) in mitochondria and microsomes of Dasi-Ex and Fuco-I, II and III groups. These results suggest that administrations of fucoidan added to sea tangle may play a pivotal role in attenuating attack of oxygen radicals in kidney.
We conducted this research to observe the changes of surface morphology and composition of clay minerals influenced by various concentrations of fluoric acid. Hydrofluoric acid (HA), a solution of hydrogen fluoride (HF) in water, is a colourless solution that is highly corrosive, capable of dissolving many materials, especially oxides. To do this, we treated several concentrations of HA on the ground soil samples collected from the agricultural experimental station located at Chungnam National University to observe the influence of fluoric acid on the changes of surface structures and elemental composition of clay particles. Generally, microscopic examination showed that the HA can not only attack an edge of clay particles but also start at any point where structural defects and weaknesses predisposed sites to acid. The orderly flake arrangement of clay minerals may reflect certain crystal symmetry elements. The ESEM-EDS results of element composition of clay particles influenced by HA indicated the changes of structures of clay minerals. It is also clear from the formation of etch figures and element composition of clay particles that the product layer at least partially dissolved or disintegrated in the presence of acid. Conclusively, the clay structures can be strongly influenced by concentrations of HA, resulting in changes of physical and chemical properties that can determine the behavior of solute transport as well as mobility of ions in soils.
Journal of the Korean Society of Fisheries and Ocean Technology
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v.27
no.4
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pp.278-285
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1991
The authors propose to use the slot system in order to improve of the efficiency for the cambered otter boards. The experiment is divided into 2 parts, one is the efficiency model test, and the other is the visualization model test. The hydrodynamic characteristics of the model otter boards were tested by efficiency model test to measure the shearing, drag force of the models and visualization test using hydrogen bubble method to observe the streak-line and time-line of flow around the models, and milk spout method to observe the separation zone in the wake behind the models. This study tested for 5 models such ad without slot, slot position 0.2C, 0.4C, 0.6C and 0.8C. The results obtained are as follows: \circled1 The maximum C sub(L) of model otter board with slot position 0.6C in attack angle 27$^{\circ}$ was the highest of all models, it's value was 1.59. \circled2 In general, the L/D ratio of the one slot otter boards were 16~28% higher than otter board without slot. \circled3 The slot position 0.6C was better than any other slot position, and it's conformed by visiualization. \circled4 As to the model otter board with slot position 0.6C, flow speed of the back side was faster 1.3 to 1.7 times than in the front side. \circled5 The size of the separated zone in case of the model otter board with 0.6C was smaller than that of any other models.
This study investigate the use of ultraviolet(UV) light with hydrogen peroxide($H_2O_2$) for Methyl Tert Butyl Ether(MTBE) degradation in photolysis reactor. The process in general demands the generation of OH radicals in solution at the presence of UV light. These radicals can then attack the MTBE molecule and it is finally destroyed or converted into a simple harmless compound. The MTBE removal by photolysis were mathematically described as the independent variables such as irradiation intensity, initial concentration of MTBE and $H_2O_2$/MTBE ratio, and these were modeled by the use of response surface methodology(RSM). These experiments were carried out as a Box-Behnken Design(BBD) consisting of 15 experiments. Regression analysis term of Analysis of Variance(ANOVA) shows significantly p-value(p<0.05) and high coefficients for determination values($R^2$=94.60%) that allow satisfactory prediction of second-order regression model. And Canonical analysis yields the stationery point for response, with the estimate ridge of maximum responses and optimal conditions for Y(MTBE removal efficiency, %) are $x_1$=25.75 W of irradiation intensity, $x_2$=7.69 mg/L of MTBE concentration and $x_3$=11.04 of $H_2O_2$/MTBE molecular ratio, respectively. This study clearly shows that RSM is available tool for optimizing the operating conditions to maximize MTBE removal.
A literature review is made on the physical and chemical characteristics of clay minerals in acidic solutions from the mineralogical and hydrometallurgical viewpoints. Some of the important characteristics of clays are their ability to cation exchange, swelling, and incongruent dissolution in acidic solutions. Various clay minerals can take up metallic ions from solution via cation exchange mechanism. Generally, cation exchange capacity increases in the following order : kaolinite, halloysite, illite, vermiculite, and montmorillonite. In acidic solutions, the cation uptake such as copper by clay minerals is strongly inhibited by hydrogen and aluminum ions and thus is not economically significant factor for recovery of metals such as uranium and copper. In acidic solutions, the cation uptake is substial. Swelling is minimal at lower pH, possibly due to lattice collapse. Swelling may be controllable with montmorillonite type clays by exchanging interlayer sodium with lithium and/or hydroxylated aluminum species. The effect of add on clay minerals are : 1. Division of aggregates into smaller plates with increase in surface area and porosity. 2. Clay-acid reactions occur in the following order: (i) $H^+$ replacement of interlayer cations, (ii) removal of octahedral cations, such as Al, Fe, and Mg, and (iii) removal of tetrahedral Al ions. Acid attack initiates, around the edges of the clay particles and continued inward, leaving hydrated silica gel residue around the edges. 3. Reaction rates of (ii) and (iii) are pseudo-1st order and proportional to acid concentration. Rate doubles for every temperature increment of $10^{\circ}C$. Implications in in-situ leaching of copper or uranium with acid are : 1. Over the life span of the operation for a year or more, clays attacked by acid will leave silica gel. If such gel covers the surface of valuable mineral surfaces being leached, recovery could be substantially delayed. 2. For a copper deposit containing 0.5% each of clay minerals and recoverable copper, the added cost due to clay-acid reaction is about 1.5c/lb of copper (or 0.93 lbs of $H_2SO_4/1b$ of copper). This acid consumption by clay may be a factor for economic evaluation of in-situ leaching of an oxide copper deposit.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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