Despite a considerable amount of investigation there continues to be disagreement concerning the proteins present in human seminal plasma. Recently their identification has assumed a greater importance following evidence that infertility in men and women may have an immunological cause (Katsh, 1959; Quinlivan, 1969). Seminal plasma is composed of fluids secreted by the prostate, seminal vesicles, ampullae, ducti deferentes, bulbourethral (Cowper's) glands, urethral(Littre's) glands and the epididymes. Prostatic juice, one of the major components of seminal plasma, has an important role in secretion of acid phosphatase and prostaglandin. A few studies have been reported of human prostatic juice, since, in human subjects, there were some problems in studying prostatic juice due to quite small amount of secretion and possibility of contamination with fluids from the seminal vesicles and ejaculatory ducts. The purpose of the present study was to determine the basic components of proteins in human prostatic juice. Prostatic juice was obtained from normal healthy man of $20{\sim}30\;year-old$ by massage of the prostate, and protein components were separated by means of disc electrophoresis. The results are summarized as follows; 1) Total numbers of protein fractions of normal human serum and prostatic juice are $14{\sim}18$ bands and $9{\sim}12$ bands, respectively. Prostatic juice produces two deeply staining bands which appear similar to those formed by $beta-_1$ globulin and albumin. 2) $Alpha-_1$ globulin area in the fractions of prostatic juice shows 4 bands and one more band is found than that of serum. On the other hand, the fractions of immunoglobulin and $alpha-_2$ globulin areas are eight in serum and it has three bands more than that of prostatic juice. 3) $Alpha-_1$ globulin area in the prostatic juice is more deeply stained than that of serum. In contrast with $alpha-_1$ globulin area, immunoglobulin and $alpha-_2$ globulin areas in the prostatic juice show weaker staining than serum.
Anisakiasis is a zoonotic disease induced by anisakid nematodes, and endoscopic inspection is used for a diagnosis or remedy for it. Anisakis simplex, Anisakis physeteris, and Pseudoterranova decipiens had been reported to be the major species causing human infections, particularly, in Japan. However, in Korea, recent studies strongly suggested that Anisakis pegreffii is the major species of human infections. To support this suggestion, we collected anisakid larvae (n=20) from 20 human patients who were undergone gastrointestinal endoscopy at a health check-up center in Korea, and molecular identification was performed on the larvae using PCR-RFLP analysis and gene sequencing of rDNA ITS regions and mtDNA cox2. In addition, anisakid larvae (n=53) collected from the sea eel (Astroconger myriaster) were also examined for comparison with those extracted from humans. The results showed that all human samples (100%) were identified as A. pegreffii, whereas 90.7% of the samples from the sea eel were A. pegreffii with the remaining 9.3% being Hysterothylacium aduncum. Our study confirmed that A. pegreffii is the predominant species causing human anisakiasis in Korea, and this seems to be due to the predominance of this larval type in the fish (sea eels) popularly consumed by the Korean people. The possibility of human infection with H. aduncum in Korea is also suggested.
Kim, Min-Kyoung;Cho, Youl-Hee;Kim, Jung-Mogg;Chun, Moon-Woo;Lee, Seung-Ki;Lim, Yoong-Ho;Lee, Chul-Hoon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.13
no.4
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pp.607-612
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2003
To elucidate the action mechanism of MCS-C2, a novel analogue of toyocamycin and sangivamycin, its effect on the expression of cell cycle-related proteins in the human myelocytic leukemia cell line HL-60 was examined using Western blotting and a flow cytometric analysis. MCS-C2, a selective inhibitor of cyclin-dependent kinases, was found to inhibit cell growth in a time- and dose-dependent manner, and inhibits cell cycle progression by inducing the arrest at G1 and G2/M phases, in HL-60 cells. The flow cytometric analysis revealed an appreciable arrest of cells in the G2/M phase of the cell cycle after treatment with MCS-C2. The HL-60 cell population increased gradually from 13% at 0 h, to 28% at 12 h in the G2/M phase, after exposure to $2{\;}\mu\textrm{M}$ MCS-C2. Furthermore, Western blot analysis demonstrated that MCS-C2 induced the cell cycle arrest at G1 phase through the inhibition of pRb phosphorylation. Hypophosphorylated pRb accumulated after treatment with $5{\;}\mu\textrm{M}$ MCS-C2 for 12 h, whereas, the level of hyperphosphorylated pRb was reduced. Thus, treatment of the cell with MCS-C2 suppressed the hyperphosphorylated form of pRb with a commensurate increase in the hypophosphorylated form.
Background: The beneficial effects of compound K (CK) on different chronic diseases have been shown to be at least related to antioxidant action. Nevertheless, since its antioxidant activity in human retinal pigment epithelial (RPE) cells is still unknown, here we investigated whether CK alleviates oxidative stress-stimulated damage in RPE ARPE-19 cells. Methods: The cytoprotective consequence of CK in hydrogen peroxide (H2O2)-treated cells was evaluated by cell viability, DNA damage, and apoptosis assays. Fluorescence analysis and immunoblotting were performed to investigate the inhibitory action of CK on reactive oxygen species (ROS) production and mitochondrial dysfunction. Results: H2O2-promoted cytotoxicity, oxidative stress, DNA damage, mitochondrial impairment, and apoptosis were significantly attenuated by CK in ARPE-19 cells. Furthermore, nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2) phosphorylation level and its shuttling to the nucleus were increased, which was correlated with upregulated activation of heme oxygenase-1 (HO-1). However, zinc protoporphyrin, a blocker of HO-1, significantly abrogated the preventive action of CK in H2O2-treated ARPE-19 cells. Conclusion: This study indicates that activation of Nrf2/HO-1 signaling by CK plays an important role in rescuing ARPE-19 cells from oxidative cellular damage.
Release characteristics of five different types of hydrophilic albumin microspheres (HAM) containing different ratios of methotrexate-albumin (MTX-HSA) conjugates to free MTX: 1 : 0 (HAMC), 3 :1 (HAMC 3F), 1 :1 (HAMCF), 1:3 (HAMCF3) and 0 : 1 (HAMF) were investigated in the absence or presence of protease using dissolution tester. In all the HAMs studied except HAMC, the MTX was released bi-exponentially in the absence of protease; an initial fast release period up to approximately 6h, and thereafter the release rate was very much slower. The fast release of MTX from the HAMs (such as HAMC3F, HAMCF, HAMCF3 and HAMF) at the initial phase in probably due to the release of "physically associated" MTX from the core of the HAMs. The initial rate constants were 7.2, 8.7, 8.5 and 5.9 times greater than the second rate constants for HAMF, HAMCF3, HAMCF and HAMC3F, respectively. MTX release from HAMC was very slow and mono-phasic. It was at most 2.2% of the total entrapped amount by 24 h. The protease accelerated the release of MTX from the HAMs. The percentages of MTX released from HAMs up to 24 h were 100, 89.0, 75.0, 66.0 and 61.0% for HAMF, HAMCF3, HAMCF, HAMC3F and HAMC, respectively in the presence of protease and the corresponding values in the absence of protease were 30.2 19.0, 10.0, 6.5 and 2.2%, respectively. In vitro release of MTX in the presence of protease varied according to the ratios of MTX-HSA conjugates to MTX; the data set from HAMF, HAMCF3 and HAMCF fits better to monophasic first-order profile more adequately than to zero-order profile, that of HAMC3 monophasic first-order, and that of HAMC to bi-phasic zero-order. Above results suggested that zero-order release rate can be achieved by adjusting the ratio of MTX-HSA conjugates to MTX in the preparation of HAMs such as HAMC3F.as HAMC3F.
In this study, we analyzed signal transduction by equine follicle-stimulating hormone receptor (eFSHR) on sti- mulation with recombinant $eelFSH{\beta}/{\alpha}$ ($rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$), natural porcine FSH (pFSH), and natural human FSH (hFSH). cAMP stimulation in CHO-K1 cells expressing eFSHR was determined upon exposure to different doses (0-1450 ng/mL) of these hormones. The $EC_{50}$ value of $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ was 53.35 ng/mL. The Rmax values of $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ and pFSH were 28.12 and 2.88 ng/mL, respectively. The activity of $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ was much higher than that of natural pFSH. However, signal transduction in CHO PathHunter Parental cells expressing eFSHR was not enhanced by stimulation with natural hFSH. Thus, $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ was completely active in cells expressing eFSHR. However, natural hFSH did not invoke a signal response in cells expressing eFSHR. Particularly, natural pFSH was weakly active in the same cells. These results showed that $eelFSH{\beta}/{\alpha}$ has potent activity in cells expressing eFSHR. Thus, $rec-eelFSH{\beta}/{\alpha}$ may efficiently bind to eFSHR, where as natural hFSH does not bind to eFSHR.
Kim, Ye Seul;Lee, Soo Yong;Yoon, Jung Won;Kim, Dasol;Yu, Sangbin;Kim, Jeong Su;Kim, Jae Ho
BMB Reports
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v.53
no.10
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pp.545-550
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2020
Combination therapy using chloroquine (CQ) and azithromycin (AZM) has drawn great attention due to its potential anti-viral activity against SARS-CoV-2. However, clinical trials have revealed that the co-administration of CQ and AZM resulted in severe side effects, including cardiac arrhythmia, in patients with COVID-19. To elucidate the cardiotoxicity induced by CQ and AZM, we examined the effects of these drugs based on the electrophysiological properties of human embryonic stem cell-derived cardiomyocytes (hESC-CMs) using multi-electrode arrays. CQ treatment significantly increased the field potential duration, which corresponds to prolongation of the QT interval, and decreased the spike amplitude, spike slope, and conduction velocity of hESC-CMs. AZM had no significant effect on the field potentials of hESC-CMs. However, CQ in combination with AZM greatly increased the field potential duration and decreased the beat period and spike slope of hESC-CMs when compared with CQ monotherapy. In support of the clinical data suggesting the cardiovascular side effects of the combination therapy of CQ and AZM, our results suggest that AZM reinforces the cardiotoxicity induced by CQ in hESC-CMs.
Background: Biological and pharmacological activities of dryocrassin ABBA, a phloroglucinol derivative extracted from Dryopteris crassirhizoma, have attracted attention. In this study, the apoptotic effect of dryocrassin ABBA on human hepatocellular carcinoma HepG2 cells was investigated. Materials and Methods: We tested the effects of dryocrassin ABBA on HepG2 in vitro by MTT, flow cytometry, real-time PCR, and Western blotting. KM male mice were used to detect the effect of dryocrassin ABBA on H22 cells in vivo. Results: Dryocrassin ABBA inhibited the growth of HepG2 cells in a concentration-dependent manner. After treatment with 25, 50, and $75{\mu}g/mL$ dryocrassin ABBA, the cell viability was 68%, 60% and 49%, respectively. Dryocrassin ABBA was able to induce apoptosis, measured by propidium iodide (PI)/annexin V-FITC double staining. The results of real-time PCR and Western ting showed that dryocrassin ABBA up-regulated p53 and Bax expression and inhibited Bcl-2 expression which led to an activation of caspase-3 and caspase-7 in the cytosol, and then induction of cell apoptosis. In vivo experiments also showed that dryocrassin ABBA treatment significantly suppressed tumor growth, without major side effects. Conclusions: Overall, these findings provide evidence that dryocrassin ABBA may induce apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells through a caspase-mediated mitochondrial pathway.
Saponin is a main component of ginseng widely known as an oriental traditional medicinal ingredient. A variety of biological effects of saponin has been reported, but its action related to skin regeneration has remained unclear so far. In this study, the effect of saponin on matrix metalloproteinase as well as its antioxidant effect in cell free system was examined in human dermal fibroblasts. First of all, as a result of investigating the effect of saponin on cell viability using MTT assay, it was shown to increase cell viability below 10 ${\mu}g$/ml, but it also showed cytotoxicity above 25 ${\mu}g$/ml. The antioxidant effect of saponin was exerted by inhibition of $H_2O_2$ in addition to reducing power above 1 ${\mu}g$/ml. In particular, saponin showed a protective effect on DNA oxidation. Furthermore, it was observed that saponin activates MMP-2 and increases MMP-1 activity in gelatin and casein zymography analyses, respectively, indicating that saponin could have potential a therapeutic agent for anti-aging and skin regeneration.
Kim, Eung-Bo;Lee, Kyu-Jin;So, Sang-Kyun;Joung, Yeun-Ho;Park, Jung Ho;Kim, Nam Hee
Journal of Biomedical Engineering Research
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v.38
no.6
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pp.277-284
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2017
This paper presents an implantable pH measurement electrode for wireless gastroesophageal reflux measurement. Usually, gastroesophageal reflux is diagnosed by a catheter-type wire connection between the esophagus and the diagnostic device which brings many side effects such as restriction of daily living, pain, and discomfort in the nasal cavity and pharynx of patients. In order to solve these issues, researchers have been studied a wireless measurement method and a micro-sized pH electrode for human body insertion is necessary. Commercial glass packaged pH meter is formed by a sensing and a reference electrodes in a KCl solution. However, if the glass meter is inserted into the human body, there are risks of leakage of the solution, breakage of the glass package, injury of the body elements. Therefore, the solution should be solidified on the micro-sized noble metal wire which has a characteristic of biocompatible. After solidified wire fabrication, the designed meter was tested for feasibility of measurement and the result was well agreed with pH values of commercial pH meter. Potentials in pH 1 to 12 solution was measured to obtain the sensitivity of the sensor with linearity. And we have designed a simulation of gastroesophageal reflux with symptom frequency, interval, and duration time in pH 2 solution. The proposed sensor has capable to get the same potential for 24 measurements in 3 days, and it has sensed same pH values of 2 for one hour with every 10 minutes. Furthermore, the sensor was survived for 48 hours with reasonable potentials in the acid solution.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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