When ginsenoside Rg5, a main component isolated from red ginseng, was incubated with three human fecal microflora for 24 h, all specimens showed hydrolyzing activity: all specimens produced ginsenoside Rh3 as a main metabolite, but a minor metabolite $3{\beta},12{\beta}$-dihydroxydammar-21(22),24-diene (DD) was observed in two specimens. To evaluate the antiallergic effect of ginsenoside Rg5 and its metabolites, the inhibitory effect of ginsenoside Rg5 and its metabolite ginsenoside Rh3 against RBL-2H3 cell degranulation, mouse passive cutaneous anaphylaxis (PCA) reaction induced by the IgE-antigen complex, and mouse ear skin dermatitis induced by 12-O-tetradecanoilphorbol-13-acetate (TPA) were measured. Ginsenosides Rg5 and Rh3 potently inhibited degranulation of RBL-2H3 cells. These ginsenosides also inhibited mRNA expression of proinflammatory cytokines IL-6 and $TNF-{\alpha}$ in RBL-2H3 cells stimulated by IgE-antigen. Orally and intraperitoneally administered ginsenoside Rg3 and orally administered ginsenoside Rg5 to mice potently inhibited the PCA reaction induced by IgE-antigen complex. However, intraperitoneally administered ginsenoside Rg5 nearly did not inhibit the PCA reaction. These ginsenosides not only suppressed the swelling of mouse ears induced by TPA, but also inhibited mRNA expression of cyclooxygenase-2, $TNF-{\alpha}$, and IL-4 and activation of transcription factor NF-kB. These inhibitions of ginsenoside Rh3 were more potent than those of ginsenoside Rg5. These findings suggest that ginsenoside Rg5 may be metabolized in vivo to ginsenoside Rh3 by human intestinal microflora, and ginsenoside Rh3 may improve antiallergic diseases, such as rhinitis and dermatitis.
We have cloned a novel mouse zinc finger protein gene Znf313 by rapid amplification of cDNA ends (RACE) according to the homologue of human ZNF313 gene. The cDNA is 2,163 base pairs (bp) in length and encodes a 229 amino acids (aa) protein with a $C_3HC_4$ ring finger domain and three $C_2H_2$ domains. 89% and 93% nucleotide (nt) and aa sequence identity is observed with its human homologue. Revealed by Northern blot and RT-PCR, full mRNA consists of 2.16 kb and widely expresses in tissues as a single transcript, most abundantly in heart, liver, kidney and testis. The expression of Znf313 in testis is detected in all development stages. Western blot analysis also reveals that Znf313 is expressed in the tissues. Immunohistochemical staining and subcellular localization demonstrate that Znf313 is expressed both in the cytoplasm and nucleus whereas predominantly localized in the nucleus. Present data suggests that Znf313 gene might play a fundamental role in gene transcription and regulation in organism and relates to spermatogenesis.
The synthesis of the Mannich base as a ligand (L) N-(morpholino (phenyl) methyl) acetamide is the subject of this study. Elemental analyses, FT-IR spectra, UV-vis, 1H-NMR, and magnetic measurements were used to confirm the synthesis of the [Ni(L)2]Cl2 complex, thermal analysis (TG/DTG), atomic absorption, and scanning, and structurally explained as electron microscopy (SEM), and X-ray powder diffraction (XRD) methods. The melting point of the complex and its molar conductivity were also measured. The suggested geometries of the complexes formed have a tetrahedral structure, according to the data acquired using various techniques. Theoretical approaches to the complex formation have been investigated. For molecular mechanics and semi-empirical calculations, the HYPERCHEM6 program had been used. The effect of the novel Ni(II) complex on the cancer cell Hepa-2 (human hepatocellular ademocarcinoma), that is the human laryngeal cancer, was studied. It has been found that these ligand and complex have potent effects on the cancer cell. The antibacterial activity of the free ligand and its complex was evaluated against two kinds of human pathogenic bacteria. The first category is Gram-positive (Staphylococcus aureas, epiderimids), whereas the second group is Gram-negative (Psedamonas aeruginosa, Escherichia coli) (from the diffusion method). Finally, it was discovered that various chemicals had varied growth-inhibiting effects on bacteria.
Gang Tian;Chuanjie Liu;Qi Gong;Zhiping Yu;Haitao Wang;Daoqiang Zhang;Haibo Cong
International Journal of Stem Cells
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v.15
no.2
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pp.195-202
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2022
Background and Objectives: Apoptosis is an outstanding determinant of glucocorticoid (GC)-induced osteonecrosis of the femoral head (ONFH). Human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSCs) have been demonstrated to be associated with apoptosis in diseases models. However, the role of hUC-MSCs in GC-induced ONFH via regulating apoptosis still needs further study. Methods and Results: In the present study, a GC-induced ONFH model was built in vivo through a consecutive injection with lipopolysaccharide (LPS) and methylprednisolone. The necrosis and apoptosis of the femoral head was evaluated by histological and Terminal-deoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick End Labeling (TUNEL) assay. The level of collagen and TRAP positive cells were determined by Masson and TRAP staining, respectively. M1 macrophage polarization was assessed using immunofluorescence assay. The level of proinflammatory cytokines including tumor necrosis factor (TNF)-α, Interleukin (IL)-1β and IL-6 of femoral head was determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits. The protein expression of AKT, mTOR, p-AKT and p-mTOR was detected using western blot assay. The results showed that hUC-MSCs treatment prominently promoted the GC-induced the decrease of the collagen level and the increase of TRAP positive cells. Besides, hUC-MSCs treatment decreased necrosis and apoptosis, macrophage polarization, the level of TNF-α, IL-1β and IL-6, the protein expression of p-AKT and p-mTOR, and the radio of p-AKT to AKT and p-mTOR to mTOR of femoral head in vivo. Conclusions: Therefore, the present study revealed that hUC-MSCs improved the necrosis and osteocyte apoptosis in GC-induced ONFH model through reducing the macrophage polarization, which was associated with the inhibition of AKT/mTOR signaling pathway.
Human granulocyte colony-stimulating factor (hG-CSF) is a hematopoiesis agent that principally affects the differentiation of neutrophils in the bone marrow. At present, recombinant hG-CSF is used successfully in the treatment of chemotheraphy-induced neutropenia and its indication has been expanded to bone marrow transplantation and aplastic anemia. In this study, we have constructed rhG-CSF secretion plasmid pYRC1 in which OmpA signal sequence/hG-CSF gene was expressed under the control of the T7 promoter. rhG-CSF produced in E. coli BL21 (pYRC1) grown at $37{\circ}C$ was found in aggregates. However, 15% of the periplasmic protein was soluble rhG-CSF when the E. coli BL21 (pYRC1) was cultured at $25^{\circ}C$ for 7 h in the modified MBL medium containing 10 g/$\ell$ glucose with 10 $\mu$M IPTG induction. The production of soluble rhG-CSF in E. coli BL21 (pYRC1) using fed batch culture was also studied. In the fed batch culture system, the final yield of rhG-CSF produced from E. coli BL21 (pYRC1) was increased from 4.4 mg/$\ell$to 24 mg/$\ell$by controlling the specific growth rate from $0.43 h^{-1}$ to $0.14 h^{-1}$, and optimizing the time of induction.
Kim, In-Young;Jeong, Seo-Jin;Kim, Eun-Sook;Kim, Seung-Hee;Moon, A-Ree
BMB Reports
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v.40
no.5
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pp.825-831
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2007
Tumor cell invasion and metastasis are often associated with matrix metalloproteinases (MMPs), among which MMP-2 and MMP-9 are of central importance. We previously showed that H-Ras, but not N-Ras, induced invasion of MCF10A human breast epithelial cells in which the enhanced expression of MMP-2 was involved. MMP-2 is produced as a latent pro-MMP-2 (72 kDa) to be activated resulting the 62 kDa active MMP-2. The present study investigated if H-Ras and/or N-Ras induces pro-MMP-2 activation of MCF10A cells when cultured in two-dimensional gel of type I collagen. Type I collagen induced activation of pro-MMP-2 only in H-Ras MCF10A cells but not in N-Ras MCF10A cells. Induction of active MMP-2 by type I collagen was suppressed by blocking integrin ${\alpha}2$, indicating the involvement of integrin signaling in pro-MMP-2 activation. Membrane-type (MT)1-MMP and tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP)-2 were up-regulated by H-Ras but not by N-Ras in the type I collagen-coated gel, suggesting that H-Ras-specific up-regulation of MT1-MMP and TIMP-2 may lead to the activation of pro-MMP-2. Since acquisition of pro-MMP-2 activation can be associated with increased malignant progression, these results may help understanding the mechanisms for the cell surface matrix-degrading potential which will be crucial to the prognosis and therapy of breast cancer metastasis.
Kang, Soo Young;Hong, Che Ry;Kang, Hyun Mi;Cho, Eun Young;Lee, Hyun Ju;Choi, Eun Hwa;Lee, Hoan Jong
Pediatric Infection and Vaccine
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v.20
no.3
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pp.168-177
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2013
Purpose: To identify the clinical and epidemiological characteristics of human metapneumovirus infections (hMPV) in children compared to respiratory syncytial virus A (RSV A) and B (RSV B). Method: A retrospective review of medical records was performed in 36 patients with hMPV infection, 106 with RSV A infection, and 51 with RSV B infection, from September 2007 to July 2012. Results: The peak incidence of hMPV infection was observed in May, whereas for RSV infections in November and December. hMPV infection occurred in older patients compared to RSV A and B infection ($29.9{\pm}32.5$ months vs. $13.6{\pm}15.4$ months, P<0.001; $29.9{\pm}32.5$ months vs. $12.1{\pm}13.5$ months, P<0.001, respectively). hMPV infection was more often associated with fever compared to RSV A (97.2% vs. 67.9%, P<0.001), while wheezing was less frequent compared to RSV A and B infection (16.7% vs. 47.2%, P=0.001; 16.7% vs. 37.3%, P=0.037, respectively). hMPV infection was more often diagnosed as pneumonia compared to RSV A infection (72.2% vs. 50.0%, P=0.047) while bronchiolitis was less frequent than in RSV A (5.6% vs. 34.9%, P=0.001) or RSV B infection (5.6% vs. 29.4%, P=0.006). In addition, intravenous antibiotic was more often prescribed for patients with hMPV infection than those with RSV A and B (69.4% vs. 39.6%, P=0.002; 69.4% vs. 43.1, P=0.015, respectively). Conclusion: This study identified characteristics of hMPV infection compared to RSV A and B infection. Seasonality in spring, higher age group, and higher proportion of pneumonia in hMPV infections may be a useful guide for management of respiratory viral infections in children.
The effects of human or mouse leukemia inhibitory factor(hLIF or mLIF) were examined as a means of increasing the development of in vitro matured(IVM) and in vitro fertilized (IVF) oocytes into morulae or blastocysts. Cell numbers of blastocysts were also counted using Hochest dye staining. Two-to 8-cell embryos derived from bovine IVM/IVF oocytes were cultured 5 to 6 days in CRI aa with or without mLIF or hLIF. All culture media were contained 3mg/ml bovine serum albumin. In experiment 1, the proportion of embryos developed to morulae and blastocysts in CRI aa containing 5,000U/ml mLIF(37.8%) was slightly higher than those of CRIaa containing 1,000U/ml mLIF(34.6%) and 0 U/ml mLIF(27.4%; P>0.05). In experiment 2, 0, 1,000 and 5,000U/ml of hLIF added to CR1aa media yielded 27.6%, 43.0% and 35.5% morulae and blastocysts, respectively(p>0.05). These were no significant increases in cell number among treatments(p>0.05). These results were indicating that mLIF or hLF can increase the proportion of embryos that develop into morulae and blastocysts without and increase in the cell number.
Jeong J. Y.;Koo B. C.;Kim N. H.;Kwon M. S.;Park S. H.;Kim T. O.
Reproductive and Developmental Biology
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v.28
no.3
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pp.197-202
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2004
Human PTH (parathyroid hormone) is known to be efficacious for curing osteoporesis. In this study, we attempted to construct genetically modified porcine cell lines that can ultimately be used for donor cells in nuclear transfer-mediated transgenesis. By using retrovirus vectors carrying tetracycline-regulatory expression system and WPRE (woodchuck hepatitis virus posttranscriptional regulatory element) sequence, we could control PTH expression with tetracycline and boost the promoter activity. Considering that low or constitutive expression of the transgene has been one of major problems that needs to be solved in transgenic animal studies, our results could be helpful in successful production of transgenic pigs as bioreactors.
A new series of highly water soluble platinum(II) complexes {Pt(II)[1,3-bis(phenylthio) propane](trans- -1,2-diaminocyclohexane) (PC-1) and Pt(II)[1,3-bis-(phenythio)propane] cis-1,2-diaminocyclohexane(PC-2)} were synthesized, and characterized by their elemental analysis and by various spectroscopic techniques[infrared(IR), 13C-nuclear magnetic resonance (NMR)]. In vitro antitumor activity of new Pt(II) complexes was tested against P-388 and L-1210 mouse lymphocytic leukemia cell lines, PC-14 / P, PC-14/ADM and PC-14 / CDDP human pulmonary adenocarcinima, DU-145 human prostate carcinoma, HT-1376 human bladder carcinoma, ZR-75-1 human breast carcinoma, MKN-45/P and MKN-45/CDDP human gastric adenocarcinoma cell lines using colorimetric MTT[3-(4,5-dimethyl thiazol-2-yl)-2.5-diphenyltetrazoliumbromide] assay for cell survival and proliferation. PC-1 showed active against L-1210, P-388 leukemia, human lung, stomach, prostate, bladder and breast cancer cell lines, and the antitumor activity of these compounds were comparable or superior to those of PC-2 and displatin. The nephrotoxicities of PC-1 and PC-2 were found quite less than that of cisplatin using MTT and [3H] thymidine uptake in rabbit proximal tubule cells and human kidney cortical cells. Based on these results, this novel platinum (II) complex compound (PC-1) represents a valuable lead in the development of a new anticancer chemotherapeutic agent capable of improving antitumor activity and low nephrotoxicity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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