Background: Aberrant promoter hypermethylation has been recognized in human breast carcinogenesis as a frequent molecular alteration associated with the loss of expression of a number of key regulatory genes and may serve as a biomarker. The E-cadherin gene (CDH1), mapping at chromosome 16q22, is an intercellular adhesion molecule in epithelial cells, which plays an important role in establishing and maintaining intercellular connections. The aim of our study was to assess the methylation pattern of CDH1 and to correlate it with the expression of E-cadherin, clinicopathological parameters and hormone receptor status in breast cancer patients of Kashmir. Materials and Methods: Methylation specific PCR (MSP) was used to determine the methylation status of CDH1 in 128 invasive ductal carcinomas (IDCs) paired with the corresponding normal tissue samples. Immunohistochemistry was used to study the expression of E-cadherin, ER and PR. Results: CDH1 hypermethylation was detected in 57.8% of cases and 14.8% of normal adjacent controls. Reduced levels of E-cadherin protein were observed in 71.9% of our samples. Loss of E-cadherin expression was significantly associated with the CDH1 promoter region methylation (p<0.05, OR=3.48, CI: 1.55-7.79). Hypermethylation of CDH1 was significantly associated with age at diagnosis (p=0.030), tumor size (p=0.008), tumor grade (p=0.024) and rate of node positivity or metastasis (p=0.043). Conclusions: Our preliminary findings suggest that abnormal CDH1 methylation occurs in high frequencies in infiltrating breast cancers associated with a decrease in E-cadherin expression. We found significant differences in tumor-related CDH1 gene methylation patterns relevant to tumor grade, tumor size, nodal involvement and age at diagnosis of breast tumors, which could be extended in future to provide diagnostic and prognostic information.
Background: The study was aimed to evaluate the prevalence and genotype distribution of HPV infection in vulvar squamous cell carcinoma (SCC) in northern Thailand and the clinicopathological difference with regard to HPV infection status. Materials and Methods: Formalin-fixed paraffin-embedded tissue samples of vulvar SCC diagnosed between January 2006 and December 2012 were collected. HPV infection was detected by nested polymerase chain reaction (PCR) with primers MY09/11 and GP5+/6+. HPV genotyping was performed using the Linear Array Genotyping Test, followed by type-specific PCR targeting the E6/E7 region of HPV16/18/52 if the Linear Array test was negative. The histologic slides of vulvar lesions and the medical records were reviewed. Results: There were 47 cases of vulvar SCC included in the study (mean patient age $57.9{\pm}13.2$ years). HPV infection was detected in 29 cases (62%), all of which had single HPV infections. HPV16 accounted for 23 (49%). The patients with HPV-positive SCC had a significantly younger mean age than those with HPV-negative tumors (52.7 years vs 66.2 years, p<0.001). There was no significant difference in tumor stage distribution with regard to the status of HPV infection. The presence of vulvar intraepithelial neoplasia (VIN) of usual type (basaloid or warty) was significantly more frequent in HPV-positive cases compared with HPV-negative cases (62% vs 6%, p<0.001), whereas differentiated-type VIN was more common in HPV-negative cases (24% vs 0%, p=0.019). Conclusions: HPV infection was detected in 62% of vulvar SCC in northern Thailand. HPV16 was the predominant genotype similar to the data reported from other regions. HPV-positive SCC occurred in younger patients compared with HPV-negative SCC, and was associated with usual-type VIN. Vaccination against HPV16/18 may potentially prevent almost one half of vulvar SCC in northern Thailand.
Background: Exposure to cigarette may affect human health and increase risk of a wide range of diseases including pulmonary diseases, such as chronic obstructive pulmonary disease (COPD), asthma, lung fibrosis and lung cancer. However, the molecular mechanisms of pathogenesis induced by cigarettes still remain obscure even with extensive studies. With systemic view, we attempted to identify the specific gene modules that might relate to injury caused by cigarette smoke and identify hub genes for potential therapeutic targets or biomarkers from specific gene modules. Materials and Methods: The dataset GSE18344 was downloaded from the Gene Expression Omnibus (GEO) and divided into mouse cigarette smoke exposure and control groups. Subsequently, weighted gene co-expression network analysis (WGCNA) was used to construct a gene co-expression network for each group and detected specific gene modules of cigarette smoke exposure by comparison. Results: A total of ten specific gene modules were identified only in the cigarette smoke exposure group but not in the control group. Seven hub genes were identified as well, including Fip1l1, Anp32a, Acsl4, Evl, Sdc1, Arap3 and Cd52. Conclusions: Specific gene modules may provide better understanding of molecular mechanisms, and hub genes are potential candidates of therapeutic targets that may possible improve development of novel treatment approaches.
목적 : 반월상연골 동종 이식술을 시행 후 2차 관절경적 소견 및 자기 공명 영상을 통해 이식물의 관절 내 변화를 관찰 하고자 하였다. 대상 및 방법 : 1999년 10월부터 2002년 6월까지 반월상 연골 동종 이식술을 시행후 이차 관절경 검사를 9례를 대상으로 하였다. 6례에서 동결 보존(cryopreserved) 반월상 연골을, 3례에서 신선 동결(fresh-frozen)반월상 연골을 이식물로 사용하였다. 내측은 골편 고정술을, 외측은 골교 고정술을 사용하였다. 술후 평균13개월째 이차 관절경 검사를 시행 하였으며 임상적 평가는 lysholm score, 자기 공명 영상 및 이차 관절경 검사소견으로 평가 하였다. 결과 : 이식된 반월상연골은 변연부에 견고하게 고정되었고 혈관 증식 역시 양호하였다. 그러나 1례에서 후각부에 경도의 마모를 보였으며, 타원에서 시술 후 내원하였던 1례에서 비해부학적 위치에의 이식으로 인한 전각부에 파열소견이 관찰되었다. Lysholm score는 술전 평균64점에서 술후 87점으로 향상 되었다. 결론 : 2차 관절경검사상 이식한 반월상연골이 변연부에 견고하게 고정 되었음을 확인 할 수 있었으며 임상적으로도 증상이 호전되었으나, 향후 관절염의 진행을 예방 할 수 있는지의 여부는 보다 장기간의 추시관찰이 필요하리라 사료되었다.
본 연구에서는 울금(Curcuma longa L.)의 다양한 추출물을 대상으로 5-alpha reductase의 활성 저해 정도를 측정하였다. 5-Alpha reductase는 T에서 활성형 남성호르몬인 DHT로 전환을 담당하며, 전립선비대에서는 혈액에서 DHT 농도가 높다. Rat의 전립선조직 균질액과 5-alpha reductase를 과발현시킨 LNCaP 세포 균질액을 대상으로 측정한 결과, $100{\mu}g/mL$의 농도에서 울금의 열수추출물(CL-HW)과 20% 에탄올추출물(CL-E20)이 5-alpha reductase 활성을 효과적으로 저해하였다. 특히 CL-HW는 $100{\mu}g/mL$의 농도에서 80% 이상의 유의적 억제효과를 보였으며, CL-E20은 $50{\mu}g/mL$의 농도부터 80% 이상의 감소효과를 보였다. 이 같은 결과에서 CL-HW 및 CL-E20은 5-alpha reductase의 억제활성이 있으며, 이는 전립선비대 치료소재로 개발될 수 있는 가능성이 있음을 제안한다.
Gong, W.H.;Tang, Z.L.;Han, J.L.;Yang, S.L.;Wang, H.;Li, Y.;Li, K.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제21권11호
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pp.1544-1550
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2008
The retinoids (vitamin A and its derivatives) play a critical role in vision, growth, reproduction, cell differentiation and embryonic development. Using the IMpRH panel, porcine cellular retinol binding protein genes 5 and 7 (RBP5 and RBP7) were assigned to porcine chromosomes 5 and 6, respectively. The complete coding sequences (CDS) of the RBP5 and RBP7 genes were amplified using the reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) method, and the deduced amino acid sequences of both genes were compared to human corresponding proteins. The mRNA distributions of the two genes in adult Wuzhishan pig tissues (lung, skeletal muscle, spleen, heart, stomach, large intestine, lymph node, small intestine, liver, brain, kidney and fat) were examined. A total of nine single nucleotide polymorphisms (SNPs) were identified in two genes. Three of these SNPs were analyzed using the polymerase chain reaction-restriction-fragment length polymorphism (PCR-RFLP) method in Laiwu, Wuzhishan, Guizhou, Bama, Tongcheng, Yorkshire and Landrace pig breeds. Association analysis of genotypes of these SNP loci with economic traits was done in our experimental populations. Significant associations of different genotypes of $RBP5-A/G^{63}$, $RBP5-A/G^{517}$ and $RPB5-T/C^{intron1-90}$ loci with traits including maximum carcass length (LM), minimum carcass length (LN), marbling score (MS), back fat thickness at shoulder (SBF), meat color score (MCS) and hematocrit (HCT) were detected. These SNPs may be useful as genetic markers in genetic improvement for porcine production.
Hossein, Mohammad Shamim;Kim, Yeun Wook;Park, Seon Mi;Koo, Ok Jae;Hashem, Md Abul;Bhandari, Dilip P;Jeong, Yeon Woo;Kim, Sue;Kim, Ji Hye;Lee, Eu Gine;Park, Sun Woo;Kang, Sung Keun;Lee, Byeong Chun;Hwang, Woo Suk
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제20권3호
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pp.334-339
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2007
Reactive oxygen species (ROS) generate during electrical activation of oocytes which has detrimental effects on embryo survival when overwhelmed. The present study was designed to investigate the ability of L-ascorbic acid, a novel water soluble antioxidant, to reduce the ROS level in developing embryos and their subsequent effects on embryo development in vitro. The compact cumulus oocyte complexes (COCs) were cultured in tissue culture medium (TCM)-199 supplemented with 10 ng/ml epidermal growth factor, 4 IU/ml pregnant mare serum gonadotropin (PMSG), and human chorionic gonadotropin (hCG) and 10% (v/v) porcine follicular fluid (pFF) for 44 h. After maturation culture, the denuded oocytes were activated with a single DC pulse of 2.0 kV/cm in 0.3 M mannitol solution containing 0.5 mM of HEPES, 0.1 mM of $CaCl_2$ and 0.1 mM of $MgCl_2$ for $30{\mu}s$ using a BTX Electro-cell Manipulator. The activated oocytes were cultured in modified North Carolina State University-23 (mNSCU-23) medium for 168 h. The level of $H_2O_2$ in each embryo was measured by the dichlorohydrofluorescein diacetate (DCHFDA) method at 48 h after activation. The blastocyst formation rate was significantly higher when culture medium was supplemented with 50 and $100{\mu}M$ L-ascorbic acid (31.2 and 38.7%, respectively) compared to non-supplemented (16.1%) group. Accordingly, significantly more cells in blastocyst were found for 50 and $100{\mu}M$ L-ascorbic acid (50.0 and 56.4, respectively) compared to 0 and $200{\mu}M$ L-ascorbic acid (36.5 and 39.8, respectively). L-ascorbic acid reduces the $H_2O_2$ level in developing embryos in a dose-dependant manner. The $H_2O_2$ level (pixels/ embryos) was 191.5, 141.0, 124.0 and 163.3 for 0, 50, 100 and $200{\mu}M$ L-ascorbic acid, respectively. So, we recommend to supplement 50 or $100{\mu}M$ L-ascorbic acid in porcine in vitro culture medium.
The lastest concepts in bonding are "total etch", in which both enamel and dentin are etched with an acid to remove the smear layers, and "wet dentin" in which the dentin is not blown dry but left moist before application of the bonding primer. Ideally, the application of a bonding agent to tooth structure should be insensitive to minor contamination from oral fluids. Clinically contaminations such as saliva, gingival fluid, blood and handpiece lubricant are often encountered by dentists during preparation of a restoration. The aim of this study was to evaluate the effect of contamination by hem-ostatic agents on shear bond strength of compomer restorations. One hundred and ten extracted human maxillary and mandibular molar teeth were collected. The teeth were cleaned from soft tissue remnant and debris and stored in physiologic solution until they were used. Small flat area on dentin of the buccal surface were wet ground serially with 400, 800 and 1200 abrasive paper on automatic polishing machine. The teeth were randomly divided into 11 groups. Each group was conditioned as follows: Group 1 : Dentin surface was not etched and not contaminated by hemostatic agents. Group2 : Dentin surface was not etched but was contaminated by Astringedent (Ultradent product Inc., Utah, U.S.A.). Group3 : Dentin surface was not etched but was contaminated by Bosmin (Jeil Phann, Korea.). Group4 : Dentin surface was not etched but was contaminated by Epri-dent (Epr Industries, NJ, U.S.A.). Group5: Dentin surface was etched and not contaminated by hemostatic agents. Group 6 : Dentin surface was etched and contaminated by Astringedent. Group7 : Dentin surface was etched and contaminated by Bosmin. Group8 : Dentin surface was etched and contaminated by Epri-dent. Group9 : Dentin surface was contaminated by Astringedent. The contaminated surface was rinsed by water and dried by compressed air. Group10 : Dentin surface was contaminated by Bosmin. The contaminated surface was rinsed by water aud dried by compresfed air. Group 11 : Dentin surface was contaminated by Epri-dent. The contaminated surface was rinsed by water and dried by compresfed air. After surface conditioning, F2000 was applicated on the conditoned dentin surface. The teeth were thermocycled in distilled water at $5^{\circ}C\;and\;55^{\circ}C$ for 1000 cycles. The samples were placed on the binder with the bonded compomer-dentin interface parallel to the lmife-edge shearing rod of the Universal testing machine(Zwick 020, Germany) running at a cross head speed of 1.0mmimin. There were no significant differences in shear bond strength between groups 1 and group 3 and 4, but group 2 showed significant decrease in shear bond strength compared with group 1. There were no significant differences in shear bond strength between group 5 and group 7 and 8, but group 6 showed significant decrease in shear bond strength compared with group 5. There were no significant differences in shear bond strength between group 5 and group 9, 10 and 11.
The purpose of this study was to evaluate the effect of EDTA irrigant according to application time and temperature. 31 human mature extracted teeth with a single canal were sectioned with microtome in 3mm thickness and gained 62 samples of root canals. They were distributed randomly into 6 groups of 10 specimens each and control group of 2 specimens. Each specimen was prepared with GT rotary file (Dentsply, Maillefer Co., Swiss) and irrigated with 3 ml sodium hypochlorite every minute. Then smear layer was removed with EDTA solution (PULPDENT$^{\circledR}$, PULPDENT Co., USA.) except two control specimens. Specimens of each group were irrigated with 17% EDTA. The time and temperature of application were as follows : (Table omitted) All specimens were split longitudinally and prepared for examination by scanning electron microscopy. A set of reference micrographs was used to award a debris score as follows: 0 = no smear layer, all tubules clean and open; 1 = no superficial smear layer, tubule openings visible, but some contain debris plug or soft tissue remnants: 2 = moderate smear layer, some tubules open and others closed; 3 = heavy smear layer, most/all tubule openings obscured. Results were evaluated with Kruskal-Wallis test to determine whether there was statistically significant difference among six groups. Pairs of groups were analyzed using the Student-Newman-Keuls Method and Mann-Whitney test. The results were as follows : 1. Control specimens showed heavy smear layer at the canal walls 2. Among the groups applied with EDTA for 2 minutes, group 1 showed the heaviest smear layer, and there was statistically significant difference between group 1 and the other groups(p<0.05). 3. Among the groups applied with EDTA for 5 minutes, group 4 and group 6 showed smear layer but there was no significant difference between them. 4. Among the groups applied with EDTA for the same temperature, group 1 showed heavier smear layer than group 4, and there was statistically significant difference(p<0.05). 5. Among the groups applied with EDTA for the same temperature, group 2 showed heavier smear layer than group 5 and group 3 showed heavier smear layer than group 6. But there was no statistically significant difference among them. From the results above, it could be concluded, EDTA solution is effective in removing of smear layer when it is applied for 5 minutes. If EDTA is applied for 2 minutes, it should be applied above room temperature.
암은 전 세계적으로 사망률이 높은 질병으로 현재 자궁암 치료는 cisplatin, 5-fluorouracil (5FU) 등의 항암화학요법과 방사선 요법 등을 복합적으로 병행하고 있다. 최근 항암효과를 가지고 있는 자연식품의 섭취에 관심이 커지면서 커리의 주성분인 curcumin (CMN), 녹차의 주성분인 카테킨, 토마토의 주성분인 리코펜 등의 약리효과에 대한 연구가 활성화되고 있다. CMN은 동물실험 결과 항염증의 활성이 있고, 피부, 대장, 유방, 전립선 등에서 암으로의 진행을 억제한다는 보고가 있으나 인체 자궁암에서는 그 효과가 밝혀져 있지않다. 본 연구는 항암제 5FU와 CMN이 인체 자궁암세포 HeLa에 미치는 영향을 apoptosis의 유도로 평가하고, p53유전자 발현율과의 상관관계로 확인하고자 시행하였다. CMN은 HeLa 세포의 성장을 억제하였으며, 5FU로 유도된 apoptosis의 발생률과 p53유전자의 발현률을 현저하게 증가시키는 것으로 나타났다(p<0.05). 이러한 연구결과는 CMN이 자궁암 치료제의 가능성이 있으며, 또한 5FU와 복합적으로 사용하면 항암제를 단독으로 투여하는 경우보다 자궁암 치료에 보다 효과적임을 강력히 시사하는 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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