Kim, Kwang-Sik;Song, Ji-Hoon;Kang, Hee-Kyoung;Kang, Ji-Hoon;Park, Deok-Bae;Lee, Sung-Ho;Lee, Young-Ki
Development and Reproduction
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v.14
no.3
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pp.171-177
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2010
A recent report demonstrated that in human aging brain after menopause/andropause luteinizing hormone (LH) is localized in the cytoplasm of pyramidal neurons of hippocampus and a significant increase of LH is also detected in the cytoplasm of pyramidal neurons and neurofibrillary tangles of Alzheimer's disease brain compared to age-matched control brain. It was suggested that the decreased steroid hormone production and the resulting LH expression in the neurons vulnerable to Alzheimer's disease pathology may have some relevance to the development of Alzheimer's disease. It is, however, unclear whether the presence of LH in neurons of human aging and Alzheimer's disease brain is due to intracellular LH expression or to LH uptake from extracellular sources, since gonadotropins are known to cross the blood brain barrier. Moreover, there is no report by using the brain of experimental animal that LH is expressed in such neurons as found in the human brain. In the present study, we found that LH immunoreactivity is localized in the pyramidal neurons of cerebral cortex and hippocampus of 12 and 18 months old rats but can not detect any immunoreactivity for LH in the young adult (3-5 months old) rats. To confirm that these LH immunoreactivity results from de novo synthesis in the brain but not the uptake from extracellular space, we performed RT-PCR and found that mRNA for LH is detected in several regions of brain including cerebral cortex and hippocampus. These findings suggest us that LH expression in old rat brain may play an important role in aging process of rat brain.
Ginsenoside Rg1 is one effective anticancer and antioxidant constituent of total saponins of Panax ginseng (TSPG), which has been shown to have various pharmacological effects. Our previous study demonstrated that Rg1 had anti-tumor activity in K562 leukemia cells. The aim of this study was designed to investigate whether Rg1 could induce apoptosis in TF-1/Epo cells and further to explore the underlying molecular mechanisms. Here we found that Rg1 could inhibit TF-1/Epo cell proliferation and induce cell apoptosis in vitro in a concentration and time dependent manner. It also suppressed the expression of EpoR on the surface membrane and inhibited JAK2/STAT5 pathway activity. Rg1 induced up-regulation of Bax, cleaved caspase-3 and C-PAPR protein and down-regulation of Bcl-2 and AG490, a JAK2 specific inhibitor, could enhance the effects of Rg1. Our studies showed that EpoR-mediated JAK2/STAT5 signaling played a key role in Rg1-induced apoptosis in TF-1/Epo cells. These results may provide new insights of Rg1 protective roles in the prevention a nd treatment of leukemia.
Secretory leukocyte protease inhibitor (SLPI) plays an important role in promoting the invasion and metastasis of a range of cancer cells. However, there are no reports of the expression and function of SLPI in oral carcinoma cells. In this study, the oral carcinoma cell line KB was used to determine whether SLPI affects the proliferation, migration and invasion of oral carcinoma cells. RT-PCR and Western blotting revealed high levels of endogenous SLPI expression in KB cells as well as a strong increase in SLPI secretion after wounding compared to immortalized normal oral keratinocytes (INOK). The wound healing assay revealed more migration of KB cells than INOK cells, and the SLPI treatment increased the migration of KB cells. KB cell proliferation was increased significantly by the SLPI protein but decreased by SLPI-siRNA. SLPI strongly increased the migration and invasion of KB cells. On the other hand, SLPI-siRNA decreased the migration and invasion of KB cells. This suggests that SLPI plays an important role in the metastasis of oral carcinoma cells.
Purpose: The entry of bacteria or harmful substances through the epithelial seal of human gingival keratinocytes (HGKs) in the junctional epithelium (JE) is blocked by specialized intercellular junctions such as E-cadherin junctions (ECJs). However, the influence of roughened substrates, which may occur due to apical migration of the JE, root planing, or peri-implantitis, on the development of the ECJs of HGKs remains largely unknown. Methods: HGKs were cultured on substrates with varying levels of roughness, which were prepared by rubbing hydrophobic polystyrene dishes with silicon carbide papers. The activity of c-Jun N-terminal kinase (JNK) was inhibited with SP600125 or by transfection with JNK short hairpin RNA. The development of intercellular junctions was analyzed using scanning electron microscopy or confocal laser scanning microscopy after immunohistochemical staining of the cells for E-cadherin. The expression level of phospho-JNK was assessed by immunoblotting. Results: HGKs developed tight intercellular junctions devoid of wide intercellular gaps on smooth substrates and on rough substrates with low-nanometer dimensions (average roughness $[Ra]=121.3{\pm}13.4nm$), although the ECJs of HGKs on rough substrates with low-nanometer dimensions developed later than those of HGKs on smooth substrates. In contrast, HGKs developed short intercellular junctions with wide intercellular gaps on rough substrates with mid- or high-nanometer dimensions ($Ra=505.3{\pm}115.3nm$, $867.0{\pm}168.6nm$). Notably, the stability of the ECJs was low on the rough substrates, as demonstrated by the rapid destruction of the cell junction following calcium depletion. Inhibition of JNK activity promoted ECJ development in HGKs. JNK was closely associated with cortical actin in the regulation of ECJs in HGKs. Conclusions: These results indicate that on rough substrates with nanometer dimensions, the ECJs of HGKs develop slowly or defectively, and that this effect can be reversed by inhibiting JNK.
Autophagy is a homeostatic degradation process that is involved in tumor development and normal development. Autophagy is induced in cancer cells in response to chemotherapeutic agents, and inhibition of autophagy results in enhanced cancer cell death or survival. Chloroquine (CQ), an anti-malarial drug, is a lysosomotropic agent and is currently used as a potential anticancer agent as well as an autophagy inhibitor. Here, we evaluate the characteristics of these dual activities of CQ using human colorectal cancer cell line HCT15. The results show that CQ inhibited cell viability in dose- and time-dependent manner in the range between 20 to 80 uM, while CQ did not show any antiproliferative activity at 5 and 10 uM. Cotreatment of CQ with antitumor agent NVP-BEZ235, a dual inhibitor of PI3K/mTOR, rescued the cell viability at low concentrations meaning that CQ acted as an autophagy inhibitor, but CQ induced the lethal effect at high concentrations. Acridine orange staining revealed that CQ at high doses induced lysosomal membrane permeabilization (LMP). High doses of CQ produced cellular reactive oxygen species (ROS) and cotreatment of antioxidants, such as NAC and trolox, with high doses of CQ rescued the cell viability. These results suggest that CQ may exert its dual activities, as autophagy inhibitor or LMP inducer, in concentration-dependent manner.
Objectives : To Compare the degree of survival rate of gingival fibroblasts, which is concerned with teeth adherence based on the type of avulsed tooth's storage solution. Methods : Different media gingival fibroblasts were stored in Dulbecco's modified Eagle's medium(DMEM), Hank's balanced salt solution(HBSS), milk, saline, and green tea in for 1, 2, 3 hours. And, MTT assay was conducted to compare survival rate of human gingival fibroblasts. Results : 1. The survival rate of gingival fibroblasts in DMEM and HBSS was higher than thoes in other storage media( Milk> Saline> Green tea). 2. The survival rate of gingival fibroblasts in milk, saline and green tea decreased as time passed. 3. Because of low osmotic pressure, green tea showed decrease of survival rate of gingival fibroblasts. Conclusion : DMEM and HBSS were the most effective storage media for gingival fibroblast. Among milk, saline, green tea, milk is most effective storage media for keeping gingival fibroblasts. Milk is recommended for storage media of avulsed tooth for keeping viability of cells.
Kim, Doo-Hyun;Kim, Heung-Joong;Jeong, Moon-Jin;Son, Ho-Hyun;Park, Joo-Cheol
Restorative Dentistry and Endodontics
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v.29
no.4
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pp.399-408
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2004
Odontoblasts are responsible for the formation and maintenance of dentin. They are known to synthesize unique gene products including dentin sialophosphoprotein (DSPP). Another unique genes of the cells remain unclear. OD314 was isolated from the odontoblasts/pulp cells of rats and partially characterized as an odontoblast-enriched gene (Dey et al., 2001). This study aimed to elucidate the biological function of OD314, relating to odontoblast differentiation and dentinogenesis. After determining the open reading frame (ORP) of OD314 by transient transfection analysis using green fluorescent protein (GPP) expression vector, mRNA in-situ hybridization, immunohistochemistry, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and western analysis were performed. The results were as follows: 1. In in-situ hybridization, OD314 mRNAs were expressed in odontoblasts of developing coronal and root pulp. 2. OD314 was a novel protein encoding 154 amino acids, and the protein was mainly expressed in cytoplasm by transient transfection analysis. 3. Mineralized nodules were associated with multilayer cell nodules in the culture of human dental pulp cells and first detected from day 21 using alizarin-red S staining. 4. In RT-PCR analysis, OD314, osteocalcin (OC) and DSPP strongly expressed throughout 28 days of culture. Whereas, osteonectin (ON) mRNA expression stayed low up to day 14, and then gradually decreased from day 21. 5. Western blots showed an approximately 17 kDa band. OD314 protein was expressed from the start of culture and then increased greatly from day 21. In conclusion, OD314 is considered as an odontoblast-enriched gene and may play important roles in odontoblast differentiation and dentin mineralization.
Park, Joon-Cheol;Lim, Su-Yeon;Jang, Tae-Kyu;Bae, Jin-Gon;Kim, Jong-In;Rhee, Jeong-Ho
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.38
no.1
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pp.42-46
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2011
Objective: This study was aimed to investigate endometrial histology and to find predictable clinical factors for endometrial disease (hyperplasia or cancer) in women with polycystic ovary syndrome (PCOS). Methods: We investigated the endometrial histology and analyzed the relationship between endometrial histology and clinical parameters, such as LH, FSH, estradiol, testosterone, fasting and 2 hours postprandial glucose and insulin, insulin resistance, body mass index, endometrial thickness, menstrual status from 117 women with PCOS. Statistical analysis was performed with chi square and t-test, p-value<0.05 was considered as statistically significant. And receiver operating characteristic curve was used to find predictable clinical factors for endometrial disease and to decide the cuff off values. Results: In 117 women with PCOS, endometrial histologic profiles are as follows: proliferative phase in 90 women (76.9%), endometrial hyperplasia in 25 women (21.4%), and endometrial cancer in 2 women (1.7%). Of 25 women with endometrial hyperplasia, simple hyperplasia without atypia, complex hyperplasia without atypia and complex hyperplasia with atypia were diagnosed in 15 (12.8%), 6 (5.1%), 4 (3.4%) women, respectively. Age and endometrial thickness were significantly related with endometrial disease, p=0.013 and p=0.001, respectively. At the cut off level of 25.5 years in age, sensitivity and specificity predicting for endometrial disease were 70.4% and 55.6%, respectively (p=0.023). At the cut off level of 8.5 mm in endometrial thickness, sensitivity and specificity were 77.8% and 56.7%, respectively (p=0.000). Conclusion: In women with PCOS, the incidence of endometrial hyperplasia and cancer were 21.4% and 1.7%. The age and endometrial thickness may be used as clinical determining factors for endometrial biopsy.
Certain hexavalent chromium compounds when administered via inhalation have the potential to induce lung injury in human and experimental animals. In present study, the inhalation effect of hexavalent chromium on morphological change and weight change of rat organ were investigated. Rats were exposed to hexavalent chromium ($Na_2CrO_4{\cdot}4H_2O$) at concentration of $0.36mg/m^3$ (group 1), $1.8mg/m^3$ (group 2), ascorbic acid and $1.8mg/m^3$ (group 3) and filtered air (group 0, control group) for I week, 2 weeks and 3 weeks. The weight of lung and kidney in group 2 and group 3 significantly higher than in control group at same exposure period. The epithilial cells of bronchiole in group 1, 2, 3 were more flatten than group 0. In the lung, the number of macrophage was significantly increased and morphologically changed macrophages were observed in group 1, 2, 3. The morphological change of the lung did not significant between group 2 and group 3, however, in group 1 was milder than in group 2 and group 3. The severity of morphological change were depend on exposure period in the lung. The morphological changes by hexavalent chromium of the liver and kidney were also observed These results suggest that inhalation of hexavalent chromium effects on not only respiratory organ, but also the liver and the kidney via blood stream.
The human anatomy is the fundamental subject which is required lots of time and efforts for medical students. But most of the oriental medical students think it little important field. And moreover they have no active attitudes in their courses. In order to improve the present situation, the results obtained from this study are as follows: 1. As a Law of Cadaver Conservation revised systemically, there's need to have enough cadavers for dissection. 2. The teaching method must be converted into the laboratory technique with the strengthening human anatomy. 3. With opening a neuroanatomy course in oriental medical curriculum, the quality of nervous system is expected to increase. 4. Under the current medical system, there's need to have discussion deeply about the histology course.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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