Ganciclovir resistance of human cytomegalovirus is associated with mutations in the viral UL97 gene and poses severe problems for immunocompromised patients. In this study, PCR-based restriction fragment length polymorphism and sequencing analyses detected the UL97 D605E mutation in all five clinical isolates from patients with ganciclovir-resistant human cytomegalovirus infection during prolonged ganciclovir therapy, whereas the M460V mutation was only present in 1 of 5 isolates. On the other hand, the detection rates of the D605E mutation in the stored available DNA samples from the donor and allogeneic stem cell transplantation recipients were 66.7% and 93.7%, respectively, suggesting that the presence of D605E mutation was not associated with the ganciclovir exposure. Although the D605E mutation may not be related to ganciclovir resistance, we suggest that this mutation could be an important molecular marker of human cytomegalovirus evolution in East Asian countries. Moreover, the restriction fragment length polymorphism method using the restriction enzyme HaeIII, which is generally used to detect the UL97 A591V mutation, could also detect the D605E mutation and may therefore be a useful tool for future research on the investigation of UL97 gene mutations.
Reactivation of human cytomegalovirus (HCMV) from latency is often fatal to immunocompromised individuals. To understand the effect of HCMV on human monocytes where HCMV establishes latency, two human monocyte cell lines at different stages in differentiation, THP-1 and HL-60 were infected with HCMV. While the viability and morphology of HL-60 cells were not significantly affected by HCMV, the viability of THP-1 cells was dramatically decreased by HCMV infection. THP-1 cells infected with HCMV became aggregated and adhered to the surface of culture dishes, probably due to the increased expression of adherence molecules CD11b on the infected THP-1 cells. THP-1 cells established a latent HCMV infection were induced to differentiate by treatment with TPA and hydrocortisone. Recovery of infectious HCMV from the culture supernatant of differentiated THP-1 cells was dependent on the time of induction of differentiation after HCMV infection. Thus, in vitro model of reactivation of HCMV from latently infected monocytes was established.
Antiviral activities of papaverine and nucleoside analogs, 9-[(1,3-dihydroxy-2-propoxy)methyl]guanine (DHPG) and acyclovir, against human cytomegalovirus (HCMV) infection were compared in vitro. Papaverine and DHPG were effective in reducing infectious HCMV yields with $ED_{50}{\s}$ (effective dose 50: the concentraion at which 50% of virus yields was obtained) of approximately 1.02 and $0.45{\mu}{\M}$, respectively; while acyclovir was less effective with an $ED_{50}$ of about $10.4{\mu}{\M}$The relative cytotoxicity of these drugs was evaluated under the same conditions used to measure infectious HCMV yields. Papaverine and DHPG demonstrated little cellular toxicity as measured by their effect on the viability of confluent cells at concentrations in the range of those demonstrating potent inhibition of HCMV replication. Similarly, protein synthesis was largely unaffected by these drugs in stationary mock-infected cells as measured by the incorporation of isotopically labelled amino acids. In contrast, cellular DNA synthesis was invariably reduced in the presence of either drug. HCMV-specific DNA synthesis was also strongly inhibited by papaverine and DHPG.
Proceedings of the Korean Institute of Information and Commucation Sciences Conference
/
2010.10a
/
pp.660-662
/
2010
To control replication of human cytomegalovirus (HCMV) effectively, inhibitors of peptide nucleic acids (PNA) with a gene delivery agent, PEI (polyethylenimine) against HCMV were applied. The transfection of these PNA inhibitors with PEI agent into host cells showed synergic inhibition effect of HCMV replication. These inhibition effect was confirmed by methods of RT-PCR, CPE, real-time-PCR, and Western blot.
The effect of human cytomegalovirus (HCMV) on three human monocyte cell lines at different stages of differentiation was investigated. While the viability of HL-60 cells or U-937 cells was not significantly affected by HCMV infection, the viability of THP-1 cells was reduced. Acridine orange/ethidiurn bromide staining revealed that the reduction of THP-1 cell viability was due to increased apoptotic death following HCMV infection. Apoptosis in HL-60 cells was not affected by HCMV infection, and induction of apoptosis of U-937 cells by HCMV was intermediate between HL-60 and THP-1 cells. Since HL-60 cells are the least differentiated and THP-1 cells are the most differentiated, the induction of apoptosis of human monocytes appears to be related to the degree of cell differentiation. Flow cytometric and confocal microscopic studies using fluorescent calcium indicator Fluo-3 suggested a significant increase in intracellular free calcium concentration ([Ca$\^$2+/]i) in THP-1 cells undergoing apoptosis by HCMV infection. Again [Ca$\^$2+/]i in HCMV-infected HL-60 cells was not critically altered, and that in HCMV-infected U-937 cells was intermediate between THP-1 cells and HL-60 cells. Calcium influx blockers such as verapamil and nifedipine partially reversed HCMV-induced apoptosis in THP-1 cells.
Background: The association of colorectal cancer with human cytomegalovirus (HCMV) is a controversial issue in cancer research. This study aimed to identify the HCMV virus in colorectal cancer tissues and to investigate the association of HCMV with colorectal cancer. In this study, 50 cancer tissue samples and 50 samples without colon cancer were studied in order to identify the HCMV virus through nested-polymerase chain reaction. The virus was identified in 15 cases of colorectal cancer tissues (15/50) and in 5 cases of normal tissues (5/50). Eight cases of adenocarcinoma tissues were in a moderately differentiated stage, and 7 cases had well-differentiated stage tissues that were positive for viral DNA. The findings were statistically evaluated at a significance level of p<0.05. The HCMV virus could playa role in creating malignancy and the progress of cancer through the process of oncomodulation.
This 54-year-old Korean coal miner soBered from continuous watery diarrhea and weight loss after corticosteroid treatment(${\beta}-methasone$, 4 mg daily for 1 week) due to hip-bone fracture in January 1991. Except for the short therapy f steroid, no other histories were contributory. The malabsorption syndrome was aggravated while the case was treated under the impression of amebiasis or intestinal tuberculosis. AIDS antibody test by EIA was negative and quantitative analysis of serum immunoglobulins was in normal ranges. Nine months after the onset of symptoms, the case was diagnosed as malabsorption syndrome caused by complected and aggravated infection by Strengyleides stercoralis, Isospora and cytomegalovirus in the small intestine, which were proved by stool examination and duodenal biopsy. His clinical course became worse even after high-dosaged and prolonged albendazole treatment for strongyloidiasis with supportive quid therapy. The patient was discharged in hopeless status in November, 1991 and died after one week at home.
Infection of human fibroblast (HF) cells with human cytomegalovirus (HCMV) result in changes in the intracellular level of second messengers. Since nitric oxide (NO) production has been known to be related with other second messengers, it is probable that HCMV infection of HF cells may involve NO. To test this possibility, the amount of NO was measured following ogenous addition of NO generators such as sodium nitroprusside (SNP) or S-nitroso-N-a-cetylpenicillamine (SNAP) immediately after HCMV infection, however, inhibited virus multiplication. Furthermore, immunoblot experiment using monoclonal antibody to HCMV major immediate early (MIE) proteins or CAT assay using pCMVIE/CAT (plasmid containing CAT gene driven by HCMV MIE promoter) revealed that SNP or SNAP blocked the MIE gene expression. SNP was more effective than SNAP in hibiting HCMV multiplication or MIE gene expression. SNP produced more NO than SNAP in inhibiting HCMV multiplication or MIE gene expression. SNP produced more NO than SNAP. Although the mechanism for the inhibition of HCMV multiplication and MIE gene expression by NO is still elusive some correlation with NO-mediated inhibition of HCMV-induced increase in cytosolic free Ca$\^$2+/ concentration ([Ca$\^$2+/]) was observed. The increase of [Ca$\^$2+/] following HCMV infection was inhibited by SNP, and less effectively by SNAP. Raising [Ca$\^$2+/ with bromo-A23187 partially reversed the SNP block of MIE gene expression. Thus, there appear to e some relationships among NO. [Ca$\^$2+/], and HCMV MIE gene expression.
For rapid and sensitive measurement of antiviral activities, application of a recombinant virus containing firefly luciferase gene was attempted. Recombinant human cytomegalovirus (HCMV) containing luciferase gene driven by HCMV late gene pp28 promoter (HCMV/pp28-luc) was used to test the antiviral activities of three known compounds and the result was compared with results from the conventional plaque assay for measuring the production of infectious viruses. When human fibroblast cells were infected with HCMV/pp28-luc, luciferase activity was observed at 2 days after infection and reached maximum at 6 days after infection, whereas the production of infectious virus was maximal at 4 days after infection. The antiviral activities of ganciclovir, acyclovir, and papaverine were measured in HFF cells infected with HCMV/PP28-luc and the luciferase activity was compared with the infectious virus titers. Luciferase activity decreased as the concentration of ganciclovir or papaverine increased, while there was a slight decrease in luciferase activity with acyclovir. The level of the decrease in Luciferase activity was comparable to the level of decrease in the production of infectious virus. Therefore, the antiviral assay using recombinant virus HCMV/pp28-luc resulted in sensitivity similar to the conventional plaque assay with a significant reduction in assay time.
The relationship between second messenger cGMP and human cytomegalovirus (HCMV) replication was investigated. First, the intracellular level of cGMP ([cGMP]i) in HCMV-infected cells was measured. The [cGMP]i increased at early times after HCMV infection, reached maximum level at 12 hr and returned to basal level at 24 hr after virus infection, while [cGMP]i in mock-infected cells remained relatively unchanged. Increasing [cGMP]i resulted in enhanced transcription of HCMV major immediate early gene. For early gene expression, cGMP had varying effect. Expression of 1.2 kb RNA decreased and 2.2 kb RNA increased with increasing cGMP, while 2.7 kb RNA gene expression was not affected. HCMV early genes are regulated by immediate early gene, and the effect of cGMP on the regulatory effect of major immediate early gene on early genes was investigated. In the absence of cGMP, major immediate early gene repressed 2.7 kb RNA gene expression, while 1.2 kb RNA and 2.2 kb RNA early genes were not significantly affected. In the presence of $1\;{\mu}M$ cGMP, however, major immediate early gene stimulated the expression of three early genes.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.