This study was carried out to develop the methodology of chromosome preparation from blood cultures in mammals which included human, mouse, cattle and pig. For karyotyping, 0.5-5.0ml of peripheral blood were collected and cultured. The satisfactory results were obtained from macroculture and microculture in all species. In culture, the patterns of cell growth were no difference among media except serum concentration and mitogen supplement. The presence of mitogen and fetal bovine serum in medium significantly affected the mitotic index. The optimal culture condition was 37$^{\circ}C$ for 3 days. And the concentration of colcemid and reincubation time also affected the chromosome morphology. In harvest, chromosome patterns were mainly affected on hypotonic treatment which included treated time and temperature, dropwise of fixative solution, and drying after slide preparation.
Chromosomes, as the genetic vehicles, provide the basic material for a large proportion of genetic investigations. The human chromosome analysis is widely used to diagnose genetic disease and various congenital anomalies. Many researches on automated chromosome karyotype analysis has been carried out, some of which produced commercial systems. However, there still remains much room for improving the accuracy of chromosome classification. In this paper, we propose an optimal pattern classifier by neural network to improve the accuracy of chromosome classification. The proposed pattern classifier was built up of two-step multi-layer neural network(TMANN). We are employed three morphological feature parameters ; centromeric index(C.I.), relative length ratio(R.L.), and relative area ratio(R.A.), as input in neural network by preprocessing twenty human chromosome images. The results of our experiments show that our TMANN classifier is much more useful in neural network learning and successful in chromosome classification than the other classification methods.
One of the frequent occurrences in rearrangements is chromosome inversion. Pericentric inversion is considered to be the variant of normal karyotype. We investigated the karyotypes of 1195 cases being referred to prenatal diagnosis using standard GTG banding for karyotype preparation. The chromosomal analysis revealed a total of 15 (1.26%) inversions. The characteristics of inversion type [(inv(4), inv(8), inv(9), inv(11)) were investigated on the basis of chromosomal analyses of fetuses and their parents. The results from chromosomal examination of the parents, whose fetuses were diagnosed as inversion, show that either parent might be the carrier. Inversion in human chromosome is commonly seen in normal humans and the frequency estimated to be 1 to 2% in general population and the exact amount of this phenomenon is still unclear. These results indicate that inv(8), inv(9), and inv(11) are phenotypically normal. However these may often cause clinical problems in offspring of the carrier, such as fetal wastage repeated spontaneous abortions and infertility with unknown mechanisms related to sex. We describe an inversion of human chromosome and its clinical correlation with human genetic disease.
각 염색체에 특이한 DNA probe를 이용하는 FISH기법은 방사선에 의해 유발된 상호전좌 및 삽입 등의 염색체의 구조적 변화를 측정하는 매우 효과적인 방법으로서 그 활용성이 증가되고 있다. 본연구는 방사선 피폭시 생물학적 선량측정법으로서 FISH기법을 활용하기 위하여 사람의 1, 2, 4번 염색체에 특이한 probe를 이용하여 고선량 단일 피폭시 유발된 각종 염색체 이상빈도를 관찰하고 이를 PAINT분류체계에 의해 분석하였다. 방사선 조사에 의한 염색체 이상빈도는 상호전좌(t)와 이동원염색체(dic)의 수가 선량 증가에 따라 같이 증가하는 것을 알 수 있으며 color junction의 수도 선량에 따라 증가하는 것을 알 수 있었다. 상호전좌의 빈도는 이동원 염색체의 빈도보다 상대적으로 높게 나타났다. 삽입(ins), 무동원염색체(ace), 및 환상염색체(r)의 수도 선량 증가에 따라 같이 증가하는 것을 알 수 있었다. 기존의 염색체재배열 분석방법과 비교해 볼 때 FISH기법은 다양한 형태의 염색체재해열을 보다 쉽게 관찰할 수 있게 하며 생물학적 선량제로서 중요한 역할을 할 것이라 기대된다.
본 연구에서는 염색체의 영상패턴을 인식하고 분류하는 방법을 개선하기 위해 패턴인식의 특징정보로 사용되는 비선형적인 염색체 영상을 선형적으로 재구성하는 영상 재구성 알고리즘을 사용하여 선형화된 특징정보를 추출하여 패턴분류기인 신경회로망의 입력정보로 사용한다. 중앙축 변환방법과, 영상 재구성방법을 사용하여 임상적으로 정상인으로 판명된 20명의 염색체 영상의 특징정보를 추출하였다. 중앙축 변환방법에 의하여 추출된 특징정보의 패턴조합과 영상 재구성방법에 의하여 추출된 특징정보의 패턴조합을 구성하였으며, 10명에 대하여 추출한 특징정보를 계층적인 신경회로망(Hierarchical Multilayer Neural Network : HMNN)의 학습입력으로 사용하여 염색체를 분류하기 위한 패턴인식기를 구현하였다. 그리고 나머지 10명에 대하여 학습입력과 동일하게 조합된 패턴조합을 HMNN의 분류입력으로 사용하여 수행한 결과 약 98.26%의 우수한 인식률을 나타내는 최적화된 패턴인식기를 구현할 수 있었다.
Chromosome rearrangement induced by bleomycin were identified by fluorescence in situ hybridization with probe for chromosome 4. The frequency of color junctions, translocations, dicentric and acenttic fragments increased with bleomycin dose. Different types of balanced translocation and dicentric were scored and compared. The frequency of cells exhibiting multiple aberration was higher compared to that of cells exposed to Gamma radiation suggesting that effect of bleomycin might be similar to that of high LET radiation.
본 연구는 염색체 1, 2, 4, 7, 8, 9 및 21번 염색체의 DNA probe를 이용하여 2Gy의 방사선을 조사한 후 DNA 양을 감안한 기대치와 관찰치의 차이를 비교함으로서 각 염색체의 방사선에 대한 감수성을 평가하여 궁극적으로 방사선 피폭시 생물학적 선량계로서 FISH기법의 타당성을 평가하고자 하였다. 1번 및 4번 염색체의 경우 상호전좌와 이동원 염색체의 관찰치가 기대치보다 더 높게 나타났으며 이와 반대로 2, 7, 8 및 9번 염색체의 경우 상호전좌와 이동원염색체의 관찰치 모두 기대치보다 낮게 나타났다. 2번 및 4번 염색체의 경우 1번 염색체보다 더 많은 acentric fragment의 빈도를 나타내었다. 1, 2, 및 4번 염색체 3종을 조합했을 때 상호전좌의 경우 관찰치와 기대치는 세포 100개당 25.5 및 25.40으로 차이가 없었으며 이동원염색체의 경우 13.25 및 13.2로 역시 거의 차이가 없게 나타났다. 따라서 본 연구결과 방사선 피폭시 발생하는 염색체이상 빈도는 염색체마다 DNA 양에 비례해 나타나지 않을 수 있어 각 염색체마다 방사선 감수성에 차이가 있을 것으로 판단된다. 또한 방사선 피폭시 생물학적 선량계로서 1, 2 및 4번을 동시에 관찰 할 경우 염색체 FISH 법을 활용하기 위하여 적절한 염색체 조합이라고 판단된다.
Endocrine disruptors have been implicated in carcinogenesis in animal studies, but carcinogenetic effects on human remain controversial. In order to examine the genotoxicity of two common endocrine disruptors, Bisphenol A and Diethylstilbestrol, cytogenetic endpoints including chromosome aberration (CA), sister chromatid exchange (SCE), micronuclei (MN) analyses and DNA damage by single cell gel electrophoresis (SCGE) were assessed. The effects of Bisphenol A and Diethylstilbestrol on the frequencies of CA and MN were increased in a dose-dependent manner and that of Bispheol A was more significant by Kendall'$\tau$test. Bisphenol A and Diethylstilbestrol also increased the frequency of SCE. Bisphenol A and Diethylstilbestrol induced DNA damage in a dose-dependent manner and the DNA damage induced by Diethylstilbestrol in human blood lymphocytes was more significant.
Long-non coding RNAs (LncRNAs) constitute a wide and extremely diverse family of RNA transcripts that are greater than 200 base pairs in length and are not translated into proteins. X-inactive specific transcript (XIST) was the first long non-coding RNA to be discovered, back in 1991. Its function in X-chromosome inactivation has been extensively studied for three decades, though other functional roles of XIST that involve a variety of fascinating mechanisms remain to be elucidated. Here, we review the emerging oncogenic role of XIST in various human cancers.
染色體의 構造的인 異常에 미치는 Methyl methanesulfonata (MMS)와 thymidine 相似體 (BUdR, IUdR)의 영향을 究明하기 위해 사람의 白血球 培養細胞에 2.0mM의 BUdR 또는 IUdR을 24時間 前 처리하고 이어 농도를 달리한 MMS $(0.0\\sim 2.0 mM)$를 1時間 처리한 뒤 24時間째 染色體標本을 작성하여 아래와 같은 결과를 얻었다. 1. MMS를 단독 처리한 對照區에서는 관찰된 染色體 異常型의 대부분이 예상외로 染色分體 異常型을 나타냈다. 2. BUdR 또는 IUdR의 단독처리도 染色體異常을 유발한다. 또한 MMS와 이중 처리한 경우에는 단독 처리보다 染色體異常型이 훨씬 증가한다. 따라서 thymidine 相似體는 MMS에 의한 染色體 異常型을 變化시켜주는 感受性物質로 作用함이 판명되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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