식품 연구에서 흔히 사용되는 물과 주정(70% 에탄올)을 사용하여 추출된 발계(SCR)의 열수 추출물(SCRW)과 에탄올 추출물(SCRW)의 총 플라보노이드 및 폴리페놀 함량, 항산화 활성, 항암활성을 측정하였다. SCRW와 SCRE는 DPPH(SCRW; 72.9%, SCRE; 42.4%)와 ABTS(SCRW; 81.6%, SCRE; 50.3%) 자유 라디칼을 효과적으로 소거하였으며, 양성 대조군인 BHA(53.8% DPPH, 49.5% ABTS)보다 더 높은 소거활성을 나타냈다. 또한 인체 유래 신장 정상세포(HEK293)에 대해서는 높은 생존율을 나타내 독성이 없음을 확인한 반면, 인체 유래의 암세포(유방암세포; MCF-7, 폐암세포; A549, 위암세포; AGS)에 대해서는 대조군으로 사용된 항암제 CPA와 유사하거나 더 높은 세포성장 억제효과가 확인되었다. 특히 SCRE는 AGS에 대하여 $1,000{\mu}g/mL$ 농도에서 53.6%로 탁월한 위암 세포 성장저해 효과를 나타냈다. 본 연구 결과를 통해, 발계 추출물의 높은 항산화 및 항암 활성이 확인되어 약리활성에 대한 기초연구 자료로 제시 할 수 있을 것으로 사료되며, 기능성 소재로써의 이용 가치를 높일 수 있을 것으로 판단된다.
The effect of oxidative stress on the alterations of different antioxidant enzyme activities was investigated in human skin melanoma cell line (SK-MEL-2). Oxidative stress was induced by the exposure to hydrogen peroxide ($H_2O$$_2$). SK-MEL-2 cells were treated with antioxidants such as vitamin E and selenomethionine in combination with $H_2O$$_2$. SK-MEL-$_2$ cells were exposed to various concentrations of $H_2O$$_2$ and measured the time course of changes in cell viability and antioxidant enzyme activities for 24 hr. Oxidative stress was induced by the exposure to 2.5mM hydrogen peroxide ($H_2O$$_2$) resulted in declining significantly for 24 hr. GPX and CAT activities peaked at 3 hr and returned to control levels by 24 hr. On the contrary, SOD activity was inactive before 6 hr but recovered at 24 hr. In case vitamin E (Vit E) and selenomethionine (Se-Met) were used at nontoxic concentrations (25$\mu$M Vit E/500$\mu$M Se-Met) to oxidative stress was induced by the exposure to hydrogen peroxide ($H_2O$$_2$) led to a 3- and 5-fold increase on the viability comparing to control and caused an increase in GPX activity respectively.
고려인삼학회 1998년도 Advances in Ginseng Research - Proceedings of the 7th International Symposium on Ginseng -
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pp.63-70
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1998
Superoxide dismutase (SOD) and catalase constitute the first coordinated unit of defense against reactive oxygen species. Here, we examined the effect of ginseng saponins on the induction of SOD and catalase gene expression. To explore this possibility, the upstream regulatory promoter region of Cu/Zn superoxide dismutase (SODI) and catalase genes were linked to the chloramphenicol acetyl-transferase (CATI structural gene and introduced into human hepatoma HepG2 cells. Total saponin and panaxatriol did not activate the transcription of SODI and catalase genes but panaxadiol increased the transcription of these genes about 2-3 fold. Among the Panaxadiol ginsenosides, the Rb2 subtraction appeared to is a major induce of SODI and catalase genes. Using the deletion analyses and mobility shift assays, we showed that the 5051 gene was greatly activated by ginsenoside Rba through transcription factor AP2 binding sites and its induction. We also examined the effect of the content ratio of panaxadiol extracted from various compartment of ginseng on the transcription of 5031 gene. Saponin extract that contains 2.6-fold more PD than PT from the fine root Increased the SODI induction about 3-fold. These results suggest that the panaxadiol fraction and its ginsenosides could induce the antioxidant enzymes, which are important for maintaining cell viability by lowering level of oxygen radical generated from intracellular metabolism.
청국장에서 분리한 B. subtilis KC-3(KCCM 42923)균을 이용하여 발효한 두유의 발효정도에 따른 이화학적 특성, 항산화효과 및 AGS 인체위암세포 억제효과 차이를 살펴보았다. 발효진행 된 pH 5.5, pH 5.25, pH 5.0 발효두유의 이화학적 특성을 pH, 균수, 산도, 점도, 아미노태 및 암모니아태 질소를 통해 살펴본 결과, 발효가 진행됨(pH 6.8에서 5.0)에 따라 균수는 $8.5{\times}10^4\;cfu/mL$에서 $7.5{\times}10^7\;cfu/mL$까지 증가하고, 산생성과 점도는 높아졌다. 두유는 발효에 의해 단백질이 분해되면서 아미노태 질소 및 암모니아태 질소도 증가하는 경향을 보였다. 발효두유의 항산화 효과를 살펴보기 위해 DPPH, ${\cdot}OH$, SOD 유사활성능을 측정해 본 결과, 두유에 비해 발효두유의 항산화 활성이 높아졌고, 발효진행에 따라 그 활성이 더 증가하여 발효두유는 두유에 비해 항산화 효과를 가지는 것으로 나타났다. 또한 AGS 인체위암세포에서 성장 억제 효과를 가지는 것으로 나타났다. 발효두유는 두유에 비해 항산화 및 AGS 인체위암세포 성장 억제능을 가지며 이는 발효가 진행됨에 따라(pH 감소) 증가하는 것으로 나타났다.
Retinoic acids (RAs) modulate growth, differentiation, and apoptosis in normal, pre-malignant & malignant cells. In the present study, the effects of RA isomers (all-trans RA, 13-cis RA, and 9-cis RA) on the cell signal transduction of human breast cancer cells have been studied. The relationship between RAs and an enzymatic antioxidant system was also determined. Estrogen-receptor (ER) positive MCF-7 and ER-negative MDA-MB-231 human breast cancer cells were treated with different doses of each RA isomers, all-trans RA, 13-cis RA, or 9-cis RA. Treatment of RA isomers inhibited cell viability and induced apoptosis of MCF-7 cells as a result of increased caspase activity in cytoplasm and cytochrome C released from mitochondria. All-trans RA was the most effective RA isomer in both cell growth inhibition and induction of apoptosis in MCF-7 cells. However, no significant effect of RA isomers was observed on the cell growth or apoptosis in ER-negative MDA-MB-231 cells. In addition, activities of antioxidant enzymes such as catalase and glutathione peroxidase were decreased effectively after treatment of RA in MCF-7 cells, whereas SOD activity was rarely affected. Thus, the present data suggest that all-trans RA is the most potential inducer of apoptosis and modulator of antioxidant enzymes among RA isomers in MCF-7 human breast cancer cells.
본 실험은 홍삼, 사상자, 산수유를 이용하여 주름 예방 효과가 있는 건강기능 식품을 개발하기 위한 기초자료로 활용하기 위하여 개별추출물과 이들의 혼합물 WM1, WM3 (KTNG0345)에 대하여 사람의 섬유아세포를 이용한 세포증식, 콜라겐 생합성 정도, MMP-1 효소활성, 항산화 활성을 조사하였다. 사용된 시료는 $1{\sim}10\;{\mu}g/ml$의 농도로 첨가하여 세포를 배양했을 때 $83{\sim}100%$의 세포증식율을 나타내어 세포 독성을 나타내지 않았으며, 콜라겐 생합성 정도는 대조군이 474.8 ng/ml이었고 retinoic acid는 568.3 ng/ml이었으며, 5 ug/ml의 농도를 기준으로 할 때 홍삼은 533.9ng/ml, 사상자는 539.3 ng/ml, 산수유는 514.1 ng/ml이었다. 홍삼과 생약을 68:232의 비율로 혼합한 WM1은 474.6 ng/ml이었고 홍삼과 생약을 136:164의 비율로 혼합한 WM3는 561.4 ng/ml로 증가하였다. MMP-1활성은 10 ug/ml의 농도에서 홍삼(ER)은 31.9 ng/ml, 사상자(WT)는 32.85 ng/ml, 산수유(WC)는 32.0 ng/ml, WM1은 31.3 ng/ml이었고 WM3(KTNG0345)는 28.85 ng/ml으로 대조군의 88% 수준으로 감소하였다. SOD활성에서는 1000 ug/ml의 농도로 처리하였을 때 65-97% 항산화활성을 나타내었다. 이들의 결과를 종합해 보면 홍삼과 사상자, 산수유 및 이들 혼합물은 human dermal fibroblas에 대하여 세포 독성을 나타내지 않으면서 콜라겐 생합성을 촉진하고 MMP-1의 활성을 억제하였으며 홍삼과 생약 엑기스를 136:164의 비율로 혼합했을 때 그 효과가 증진되었다. WM3 (KTNG0345)는 지표성분으로서 ginsenoside-$Rb_1$, torilin, loganin을 각각 10.85 mg/g, 0.128 mg/g, 3.92 mg/g 함유하였다.
바위솔의 추출물로부터 항산화 활성 및 동물 항암세포를 이용한 생물학적 특성을 조사 해 본 결과는 다음과 같다. 생육지별 DPPH 프리라디칼 소거 및 xanthine/xanthine oxidase 억제 활성비교에서 재배지에서 수확한 시료의 활성이 $6.07(IC_{50}:{\mu}g/m{\ell})$로 가장 높았다 생육시기별 DPPH 프리라디칼 소거 및 xanthine/xanthine oxidase 억제의 활성은 9월 수확물이 가장 활성이 높았다. 실리카겔 컬럼크로마토그래피를 이용한 항산화물질 분리결과에서 S-4 분획물의 DPPH와 xanthine oxidase 억제활성이 $5.02(IC_{50}\;:\;{\mu}g/m{\ell})$와 $6.18(IC_{50}:{\mu}g/m{\ell})$을 나타냄으로써 높은 분리효율를 보였다. 항산화활성이 가장 높았던 LH-4 분획물의 주요화합물은 GC/MS에 의하여 지방산, 폴리페놀화합물 및 페놀유도체로 동정되었으며 alpha-androsta-7,14-diene과 1,2,3-benzenetriol이 주 물질이었다. POD 및 SOD 활성은 생육지간에 재배지, 산, 바닷가 순으로, 생육시기간에는 시기가 늦을수록 높게 나타났다 SOD 동위효소의 밴드수는 전 생육지, 전 생육시기에서 공히 2개의 밴드가 나타났으나, 그 세기는 재배지와 9월의 수확물이 가장 높은 활성을 나타내었다. 정제된 LH-4 분획물은 HL-60 세포의 종양증식을 억제시켰으며 종양유발유전자와 IPTG로 콜로니 형성을 유도한 암세포(2-12 cells)에서 분획물 400ppm 처리와 negative control 처리간의 colony형성은 유의차가 없었다.
본 연구에서는 천년초 줄기 물추출물의 전처치가 사염화탄소로 유발한 흰쥐의 간 손상에 대해 보호효과를 나타내는지 알아보고자 하였다. 천년초 추출액은 건조 고형분량을 측정하고 1g/kg 및 0.5g/kg 체중이 되는 양을 일정시간에 1일 1회 14일동안 경구투여 하였다. $CCl_4$는 올리브유로 희석하여(1:4) 0.5ml/kg체중이 되도록 시료 마지막 투여 종료 3시간 후에 대조군을 제외한 모든 군에 복강주사하였다. 사염화탄소 처치에 의해 혈청 AST, ALT 및 ALP 활성이 대조군과 비교하여 각각 4.3, 4.7 및 1.2배 증가하였다. 반면, 천년초 줄기 추출물을 1g/kg 투여한 군의 AST, ALT 및 ALP의 활성은 $CCl_4$군과 비교하여 각각 약 36%, 41% 및 22% 감소하였다. 사염화탄소에 의해 간의 지질과산화 반응이 증가하였으며 SOD 및 GST활성이 감소하였다. 1g/kg의 천년초 줄기 추출물의 투여는 간의 지질과산화 반응을 감소시키고 SOD 및 GST의 활성을 회복시키는 결과를 보였다. 또한, 천년초 줄기 추출물은 $132.2{\mu}mol$ vit. C eq/g의 OH 라디칼 소거활성을 나타내었으며 페놀화합물의 함량이 6.52mg/g이다. 이러한 결과는 천년초 줄기 추출물의 항산화 활성 및 사염화탄소로 부터 간손상을 예방하는 효과가 있음을 보여주고 있다.
To ascertain the effects of hair dyeing application on oxidative stress in human, a mixture of permanent black colored hair dye with the same amount of oxidant containing 6% hydrogen peroxide was used. A hair dyeing with contacting the scalp (conventional dyeing) and a hair dyeing with 3 to 4mm away from the scalp (alternative dyeing) were applied to each 15 young healthy women. Blood was taken from the brachial vein at two sampling times, just before and 6 hours alter the hair dyeing, and antioxidant enzyme activities and antioxidant contents were measured in red blood cells. After dyeing, malondialdehyde(MDA) contents for conventional dyeing group was shown to a tendence of more increased than alternative dyeing group. After dyeing, reduced glutathione (GSH) contents for conventional dyeing group was shown to a tendence of more decreased than alternative dyeing group. After dyeing, superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities were significantly decreased in conventional dyeing group (p < 0.01), however, SOD and CAT activities were not significantly decreased in alternative dyeing group. After dyeing, there was no significant decrease in glutathione peroxidase (GPX) activity both for conventional dyeing group and alternative dyeing group. Therefore, after dyeing, the degree of oxidative stress in red blood cells for alternative dyeing group was appeared to be lower than conventional dyeing group.
Objectives : The purpose of this study is to investigate the anti-oxidative effect of electroacupuncture at Shinmaek($BL_{62}$) in rats. Methods : In order to cause oxidative stress, AAPH was administered to the abdominal cavity of rats, after we stimulated $BL_{62}$ of the rat by electroacupuncture. Blood test and anti-oxidative test(LDL-cholesterol, GOT, GPT SOD, GSH, catalase, NO, MDA) were performed at the end of treatment. Results: 1. SOD, glutathione, catalase activity were significantly increased in the $BL_{62}-EA$ group compared with the holder group. 2. NO density was significantly decreased in the $BL_{62}-EA$ group compared with the holder group. 3. Glutathione was significantly increased in the $BL_{62}-EA$ group compared with the sham-EA group. Conclusion : These results suggest that electroacupuncture at $BL_{62}$ has an anti-oxidant effect in human.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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