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Dynamic Profile of the Copper Chaperone CopP from Helicobacter Pylori Depending on the Bound Metals

  • Hyun, Ja-shil;Park, Sung Jean
    • 한국자기공명학회논문지
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    • 제20권3호
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    • pp.76-81
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    • 2016
  • Copper is an elemental ion in living organisms. CopP from Helicobacter Pylori (HpCopP) is a copper(I)-binding protein and was suggested as regulator of copper metabolism in vivo. Previously, the metal binding property of HpCopP for Ag(I), Cu(I), and Cu(II) as well as the tertiary structure of HpCopP was shown. In this study, the dynamic profiles of HpCopP depending on metal binding were studied using ${^1H}-^{15}N$ steady-state NOE analysis. The heteroNOE experiment was performed for apo-CopP or metal-bound CopP. The obtained NOE values were analyzed and compared to figure out the effect of metals on the structural flexibility of HpCopP. As a result, Ag(I) and Cu(I) ions improved the rigidity of the structure while Cu(II) ion increased the flexibility of the structure, suggesting the oxidation of the CXXC motif decreases the structural stability of HpCopP.

3T3-L1 지방전구세포에서 합토글로빈에 의한 염증성 cytokine 발현 조절 (The Effect of Haptoglobin on Expression of Inflammatory Cytokines in 3T3-L1 Preadipocytes.)

  • 조진경;김남훈;오미경;박선주;김인숙
    • 생명과학회지
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    • 제18권4호
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    • pp.537-541
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    • 2008
  • 백색지방조직(white adipose tissue)은 에너지 저장뿐만 아니라 다양한 adipokines을 분비하는 중요한 내분비 기관이다. 급성기반응 단백질로 알려져 있는 합토글로빈(haptoglobin)도 adipokine의 한 종류로서 지방세포에서 합성되고 분비된다. 그러나 adipokine으로서의 기능과 지방조직에서의 역할은 아직까지 규명되지 않았다. 본 연구에서는 3T3-L1 지방전구세포를 합토글로빈 유전자로 transfection 시켜 합토글로빈을 과발현하는 세포를 만들고 세포증식, 염증관련 인자들의 발현조절 및 단구세포의 유인성을 조사하였다. 그 결과, 합토글로빈은 3T3-L1 세포의 성장에는 별 영향을 미치지 않았으나 IL-6와 COX-2 발현을 저해하고 HO-1 합성을 증가하였다. 또한 THP-1 단구세포를 이용한 invasion assay에서는 합토글로빈이 단구세포의 이동을 저해하였다. 이러한 결과들은 합토글로빈이 지방조직에서 항염증 반응에 관여함을 시사한다. 만성적 염증상태(chronic low-grade inflammatory state)로 인식되고 있는 비만은 염증관련 인자들에 의한 인슐린저항성이 유도되는 바, 합토글로빈은 비만 관련 인슐린저항성을 방지하고 인슐린민감성을 향상시키는 데에도 기여할 것으로 생각된다.

Inhibitory Effect of Ponciretin on Helicobacter pylori VacA Toxin-induced Vacuolation in HeLa Cells

  • KIM JONG-MI;SHIN JI-EUN;BAE EUN-AH;HAN MYUNG JOO;KIM DONG-HYUN
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
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    • 제16권1호
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    • pp.46-51
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    • 2006
  • The inhibitory effects of flavanone derivatives on Helicobacter pylori (HP) growth, infection and VacA toxininduced vacuolation were investigated. Among flavanones tested, ponciretin potently inhibited the growth of HP with a MIC value of 0.01 mg/ml and VacA toxin-induced vacuolation in HeLa cells with $IC_{50}$ value of 0.078 mM. However, other flavanones inhibited neither HP growth nor VacA toxininduced vacuolation. All flavanones tested did not inhibit HP infection to KATO III cells. Ponciretin also inhibited activation of procaspase-3 to caspase-3 in HeLa cell induced by HP VacA toxin, but did not affect Bax and Bcl-2 protein levels. These findings indicate that ponciretin inhibits growth as well as vacuolation by HP VacA toxin, which induces cell death via proteolytic activation of a cascade of caspases.

헬리코박터 파일로리에서 fdxA 유전자에 의한 메트로니다졸 내성 조절 기전 연구 (Mechanism of Metronidazole Resistance Regulated by the fdxA Gene in Helicobacter pylori.)

  • 남원희;이선미;김은실;김진호;정진용
    • 생명과학회지
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    • 제17권5호
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    • pp.723-727
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    • 2007
  • 본 연구는 H. pylori에서 metronidazole내성에 관여하는 유전자를 발견하고 이들 유전자들의 상호 조절 기전을 밝힘으로서 위장질환의 원인균인 H. pylori를 퇴치하기 위한 기본바탕을 마련하고자 수행되었다. 우선적으로 metronidazole 내성을 조절하는 유전자인 fdxA(ferredoxin)에 의한 metronidazole 내성 조절 기전을 밝히기 위하여 다음의 연구를 수행하였다. Type I 균주인 26695균주의 fdxA 유전자에 chloramphenicol 내성 유전자를 삽입하여 결손돌연변이주를 구축하였다. fdxA의 비활성화에 의한 rdxA 및 frxA 유전자의 발현을 알아보기 위하여 2-D electrophoresis와 MALDI-TOP-MS을 이용하여 fdxA 유전자의 비활성화에 의해 over-expressed protein과 under-expressed protein을 검색하였다. 본 실험의 결과로 type I 균주인 26695에서 fdxA 유전자를 비활성화시킨 결과 frxA 유전자의 발현양이 증가함을 northern으로 확인하였으며, 또한 fdxA유전자의 downstream에 위치한 유전자들이 H. pylori의 생존에 중요한 역할은 한다는 것을 알 수 있었다. 또한 2-D electrophoresis와 MALDI-TOP-MS을 이용하여 fdxA 유전자의 inactivation에 의해 over-expressed protein으로 nifU-like protein(HP0221), frxA(HP0642), nonheme ferritin(HP0653)와 아직 기능이 밝혀지지 않은 hypothetical protein(HP0902) 등이 발견되었다. 그리고 5'-methylthioadenosine/S-adenosylhomocysteine nucleosidase(HP0089), (3R)-hydroxymyristoyl ACP dehydratase(HP1376)과 thioredoxin(HP1458)등이 under-expressed protein으로 발견되었다.

STRUCTURAL PERTURBATIONS INDUCED BY PHOTODYNAMIC ACTION OF PORPHYRIN AGGREGATES ON PLASMA MEMBRANE AND MICROSOMES OF GLIOBLASTOMA CELLS

  • Sreentvasan, Rajesh;Joshi, Preeti G.;Joshi, Nanda B.
    • Journal of Photoscience
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    • 제4권2호
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    • pp.41-48
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    • 1997
  • The plasma membrane and microsomes, isolated from the cells treated with hematoporphyrm derivative (HpD) for 1 and 24 h, accumulated the aggregated porphyrin. The quantity of aggregated porphyrin was same in the plasma membrane and microsomes after isolating them from cells treated with HpD for 1 h whereas the microsomes accumulated higher quantity of aggregated porphyrin when cells were treated with HpD for 24 h. Photodynamic action of aggregated porphyrin on plasma membrane and microsomes was investigated using lipid specific fluorescent probes: 1,6-diphenyl-1,3,5-hexatrine (DPH) and 1-(4-trimethylammonium), 6-diphenyl-1,3,5-hexatrine(TMA-DPH). The time dependent anisotropy of these probes in the membranes was measured and the decay of anisotropy was analyzed using wobbling in cone model. Upon irradiation both the plasma membrane and the microsomes showed an increase in the limiting anis~)tropy and order parameter and a decrease in the cone angle of the lipid probes. The increase in the limiting anisotropy was pronounced in membranes isolated from the cells treated with HpD for 24 h. Photoinduced change in the limiting anisotropy was dependent on the duration of incubation of cells with HpD before isolating the membranes. In both the membranes. the membrane core was affected more as compared to the outer leaflet. In addition to the structural changes, a decrease in Na$^+$-K$^+$-ATPase and NADPH cyt c reductase activity was also observed upon irradiation of HpD treated cells. Inhibition in NADPH cyt c reductase was more when cells were treated with HpD for 24 h, however, Na$^+$-K$^+$-ATPase activity did not depend on the duration of the treatment of cells with HpD before irradiation. Our results suggest that the extent of photoinduced perturbations in the membranes varies as a function of duration of the treatment of cells with HpD and the membrane core is more susceptible to the photodynamic action of aggregated porphyrin.

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Three-dimensional Graphene Aerogels for Electrochemical Energy Storage

  • Yun, Sol;Park, Ho Seok
    • 한국진공학회:학술대회논문집
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    • 한국진공학회 2014년도 제46회 동계 정기학술대회 초록집
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    • pp.485.1-485.1
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    • 2014
  • In this research, we report the synthesis of three-dimensional (3D) hierarchical porous graphene aerogels (hpGAs) for application to electrochemical energy storage. For electrochemical systems, the specific capacitance is a key parameter to evaluate the characteristics of electrode materials. By taking full advantage of large surface area, 3D hpGAs would achieve the larger specific capacitance over rGO film and GAs. Microscopic structures and topologies of hpGAs were investigated using field emission scanning electron microscopy and transmission electron microscopy. X-ray photoelectron spectroscopy was used to determine the chemical compositions of rGO film, GAs, and hpGAs. Raman spectra were recorded from 100 to 2500 cm-1 at room temperature using a Raman spectroscopy equipped with a ${\times}100$ objective was used. The specific area and pore distribution of GAs and hpGAs were obtained using a Brunauer-Emmett-Teller apparatus.

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소아에서 4제요법 후 enzyme immunoassay에 의한 Helicobacter pylori 대변 항원 검출법의 유용성에 대한 연구 (Role of enzyme immunoassay for the Detection of Helicobacter pylori Stool Antigen in Confirming Eradication After Quadruple Therapy in Children)

  • 양혜란;서정기
    • Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition
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    • 제7권2호
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    • pp.153-162
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    • 2004
  • 목적: H. pylori 대변항원(Helicobacter pylori stool antigen; HpSA) 검사는 H. pylori 감염 여부를 진단하는 데 이용되는 비침습적 검사이지만, 소아에서 제균요법 후 H. pylori 대변항원검사의 유용성에 대한 연구가 거의 이루어지지 못한 상태이다. 본 연구에서는 소아에서 H. pylori의 제균 여부를 확인하는 데 있어 enzyme immunoassay에 의한 HpSA 검사의 진단 정확도를 평가하고자 하였다. 연구방법: 2001년 1월부터 2003년 10월까지 서울대학교병원 소아과에서 146명의 소아(평균 연령 $9.3{\pm}4.3$세)를 대상으로 총 164회의 H. pylori 대변항원검사(Primier platinum HpSA)를 시행하였다. H. pylori 감염여부를 확인하기 위해 모든 환아에서 H. pylori 대변항원검사와 상부위장관내시경에 의한 위점막 생검을 병행하였다. H. pylori 감염이 확인되어 사제요법(omeprazole, amoxicillin, metronidazole, bismuth subcitrate)을 1주 동안 시행 받은 환아들에서는 치료 종결 후 최소 4주가 경과하였을 때 위내시경과 H. pylori 대변항원검사를 반복 실시하였다. H. pylori 대변항원검사는 OD값이 0.16 이상일 때 양성, 0.14~0.16 사이는 감염 미확정, 0.14 미만은 음성으로 판정하였다. 결과: 1) 제균 전 시행한 131회의 위내시경 조직검사 결과 28명이 H. pylori 양성이었고 나머지 103명은 H. pylori 음성이었다. 동시에 시행한 H. pylori 대변항원검사 결과에서 30명이 H. pylori 양성이었고, 101명이 음성으로 판정되었다. 따라서 제균요법 시행 전 H. pylori 대변항원검사의 민감도, 특이도, 양성 예측치, 음성 예측치는 각각 96.4%, 97.1%, 90% 그리고 99%이었다. 2) 제균요법 4주 후 33명의 환아에서 시행한 위내시경에 의한 조직검사에서 H. pylori는 24명에서 음성이었으나 9명은 여전히 양성이었다. 동시에 시행한 H. pylori 대변항원검사는 10명에서 양성, 23명에서 음성이었다. 따라서 제균요법 후 H. pylori 대변항원검사의 민감도, 특이도, 양성 예측치, 음성 예측치는 각각 88.9%, 91.7%, 80% 그리고 95.7%이었다. 결론: 소아에서 H. pylori 대변항원검사는 제균 후에도 높은 진단 정확도를 보였다. 따라서 H. pylori 대변항원검사는 소아에서 제균요법 후 균 박멸여부를 확인하는 데에도 매우 유용한 비침습적인 검사방법이라고 하겠다.

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1H, 15N and 13C resonance assignment and secondary structure prediction of ss-DNA binding protein 12RNP2 precursor, HP0827 from Helicobacter pylori

  • Jang, Sun-Bok;Ma, Chao;Chandan, Pathak Chinar;Kim, Do-Hee;Lee, Bong-Jin
    • 한국자기공명학회논문지
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    • 제15권1호
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    • pp.69-79
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    • 2011
  • HP0827 has two RNP motif which is a very common protein domain involved in recognition of a wide range of ssRNA/DNA.We acquired 3D NMR spectra of HP0827 which shows well dispersed and homogeneous signals which allows us to assign 98% of all $^1H_N$, $^{15}N$, $^{13}C_{\alpha}$, $^{13}C_{\beta}$ and $^{13}C$=O resonances and 90% of all sidechain resonances. The sequence-specific backbone resonance assignment of HP0827 can be used to gain deeper insights into the nucleic acids binding specificity of HP0827 in the future study. Here, we report secondary structure prediction of HP0827 derived from NMR data. Additionally, ssRNA/DNA binding assay studies was also conducted. This study might provide a clue for exact function of HP0827 based on structure and sequence.

무 농약 단감분말로 제조한 미트로프의 5℃ 냉장 저장 중 품질 변화 (Changes of Quality Properties of Pork Loaves with Chemical-free Sweet Persimmon Powder during Chilled Storage at 5℃)

  • 하창주;진상근;남영욱;양미라;고병순;김일석
    • Journal of Animal Science and Technology
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    • 제50권2호
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    • pp.237-246
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    • 2008
  • 미트로프 제품에 열풍건조 단감분말(HP)과 동결건조 단감분말(FP)을 각각 3%(HP-3%, FP-3%)와 6%(HP-6%, FP-6%)를 첨가하도, 무첨가구를 대조구로 제조한 후 함기포장하여 5℃에 저장하면서 품질평가를 실시하였다. 수분과 조회분은 FP-6%가 유의적으로 높았고(p<0.05), 조단백질 및 조지방은 모든 제품에서 유의적인 차이가 없었다(p>0.05). pH는 대조구가 처리구보다 높았으며(p<0.05), 처리구간에서는 차이가 없었다(p>0.05). 모든 제품에서 저장기간이 경과함에 따라 TBARS값은 증가하는 경향이었으며, 처리구들 간에서는 HP-6%와 FP-6%가 유의적으로 높게 나타났다(p<0.05). 각 소재물들의 첨가비율이 높을수록 높은 TBARS와 적색도는 증가하였다. 미생물 분석결과 저장 전 기간 동안 모든 제품에서 총균수는 3.11 log10 CFU/g를 유지하여 양호하였다. 전체적인 기호도는 대조구에 비해 처리구들이 더 좋았고 첨가량에 의한 차이는 없었다(p>0.05). 이상의 결과로써 다양한 생리활성물질을 가지는 열풍 또는 동결건조 단감분말은 기능성 식품의 소재로써 미트패티류 제품에 적용할 수 있음을 확인하였다.

개질 셀룰로오즈 및 재생 셀룰로오즈 중공사막 혈액투석여과기의 설계 및 투석여과성능 (Design and Diafiltration Performance of Modified Cellulose and Regenerated Cellulose Hollow Fiber Membrane Hemodiafilter)

  • 김재진;박진용
    • 대한의용생체공학회:의공학회지
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    • 제14권3호
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    • pp.221-226
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    • 1993
  • Modules of hemodiafilter were manufactured by using MC-Hp200 and RC-HP4DOA hoi low fiber membranes of Enka Co. in a unique design. The performances of she hemodiafillers were evaluated by measuring the molecular weight cut-off, ultrafiltration rate, clearance, and pressure drop across the hemodiafiter. As a whole, the performances of the RC-HP400A module were superior to those of the MC-Hp200 module. The modules prepared in thls study showed the satisfactory performances for hemodiafiltration.

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