• 생명과학회지
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• 제30권4호
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• pp.402-409
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• 2020

신경괴사증바이러스(NNV)는 25 nm의 작은 입자 크기에 RNA1 (3.4 kb, RdRp), RNA2 (1.4 kb, capsid protein) 두 가닥의 RNA를 유전정보를 가진다. NNV는 1980년대 말 처음 보고된 이후 전 세계적으로 120여종의 어류에 감염을 일으키며 심각한 피해를 일으키고 있는 바이러스이다. NNV 감염에 의한 피해를 최소화하고 효율적인 백신들을 개발하기 위해서는 무엇보다 NNV 감염에 따른 세포내 신호전달체계를 이해할 필요가 있다. NNV는 세포내 감염 이후 숙주가 가진 바이러스 복제에 필요한 요소들을 이용할 수 있도록 숙주세포의 cell cycle arrest 등의 기작을 이용하는 것으로 알려졌다. 반면에 숙주 세포는 NNV와 감염된 세포를 제어하기 위해 RIG-1-like receptor signaling pathway 등을 통해 NNV 감염을 인지한 다음 IFN signaling pathway를 통해 항바이러스 작용에 필요한 ISG들을 발현시킨다. 또한 감염된 세포들을 사멸시키기 위해 ER stress를 통한 unfolded protein response (UPR), mitochondria-mediated cell death 작용을 통해 감염된 세포의 apoptosis를 유발한다. NNV 감염 기작에 대한 세포신호전달연구는 아직 초기단계이며 검증해야 할 pathway들이 아직도 많이 남아있는 상황이다. 따라서 NNV 감염과 연관된 다양한 세포신호전달체계를 탐색하고 질병 특이적인 세포신호전달체계를 이해함으로써 신속하고 정확한 진단법 및 백신 개발에 많은 도움이 될 것으로 생각된다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제35권1호
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• pp.47-54
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• 1997

윤충 감염시 증가되는 기생충 특이 IgE 항체는 항기생충 작용을 하는 것으로 알려져 있으나 총 IgE 항체의 90% 이상을 차지하는 비특이성 IgE 항체의 역할에 대해서는 잘 알려져 있지 않다 이 실험에서는 폐흡충 감염 마우스에 anti-lgE 단일크론 항체를 처치한 후 혈청내 IfgE. 비장 B 세포 의 $Fc{\varepsilon}RII/CD23$의 발현 및 충체수를 관찰하여 비특이성 IgE가 숙주의 방어면역에 미치는 역할을 알아보았다. Anti-lgE를 처치한 폐흡충 감염 마우스의 혈청내 총 IgE 항체의 양은 실험 기간 동안 억제되어(($<{\;}1{\;}{\mu\textrm{g}/ml}$) PBS로 처치한 감염군에 비해 유의한 수준(P < 0.05)으로 감소되었다 또 한 Anti-IgE를 처치한 폐흡충 감염 마우스에서의 $Fc{\varepsilon}RII/CD23$ 양성인 비장 B 세포수 및 그 발현도 PBS로 처치한 감염군에 비해 실험 기간 동안 유의한 수준(P < 0.05)으로 감소되었다. 충체 회수율에 있어서도 anti-lgE를 처치한 감염 마우스는 6주에 44%로 PBS로 처치한 감염군(75%)에 비해 유의한 수준(P < 0.05)으로 감소하였다. 이상의 결과를 종합할 때 폐흡충 감염 마우스에서 높게 증가되는 비특이성 IgE는 숙주의 방어면역을 방해하여 오히려 충체를 보호하는 역할을 하는 것으로 생각된다.

• 한국가금학회지
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• 제47권1호
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• pp.9-19
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• 2020

본 연구는 고병원성 조류 인플루엔자 바이러스(high pathogenic avian influenza virus; HPAIV)와 저병원성 조류인플루엔자 바이러스(low pathogenic avian virus; LPAIV)가 감염된 오리의 폐세포에서 보고된 기존 전사체 데이터를 재분석하여 조류 인플루엔자 감염에 대응하는 숙주의 공통 전사체를 발굴하고, 생물정보 분석을 실시하여 바이오 마커로서 가능성을 제시하기 위하여 수행하였다. 이전 연구에서 생산된 microarray 데이터 세트를 재분석하여, HPAIV와 LPAIV가 각각 감염된 오리의 폐세포에서 각각 총 731 및 439개의 차등발현 유전자를 발굴하였다. 이들 차등발현 유전자 중에서, 227개의 유전자가 HPAIV와 LPAIV가 감염된 세포에서 공통적으로 조절되어, 193개의 유전자는 발현이 증가한 반면, 34개의 유전자는 발현이 감소하였다. 생물정보 분석을 통하여 차등발현 유전자들의 기능에 대한 주석달기를 실시하여, 리보솜과 단백질 대사 및 유전자 발현 관련 GO가 풍부해짐을 확인하였다. REACTOME 분석을 통하여 단백질 및 RNA 대사 경로 및 콜라겐 생합성과 변형을 포함한 조직 복구 경로가 조절됨을 확인하였다. 보다 구체적으로, 번역 및 RNA 품질 관리 경로에 관여하는 단백질을 코딩하는 유전자는 HPAIV 및 LPAIV 감염에 반응하여 발현의 증가 또는 감소하는 방향으로 조절되어 AIV가 숙주 번역 기계를 억제함으로써 숙주 방어 시스템을 회피할 수 있거나 번역을 위해 세포질로 내보내기 전에 AIV가 억제될 수 있음을 시사한다. AIV 감염은 바이러스 감염으로 인한 조직의 병변 형성을 조절하는 경로를 활성화시킬 수 있음을 시사한다.

• 미생물학회지
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• 제46권2호
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• pp.134-139
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• 2010

전 세계 인구의 1/3을 감염시키고 있는 결핵균은 21세기에도 인류를 위협하는 병원균이다. 결핵균에 대항하는 Th1 면역 반응은 결핵균의 세포 내 성장을 제어하는 것으로 알려져 있으나, 이는 결핵균 감염을 자연 치유하는 수준에는 미치지 못한다. 본 연구에서는 C57BL/6 마우스에 병원성 결핵균인 H37Rv를 감염시켰을 때 숙주의 면역 반응에 대항하여 결핵균이 자신의 유전자 발현을 변화시킨다는 사실을 규명하기 위하여, 결핵균 유전자 중 16S rRNA, acr, fbpA, aceA, ahpC 등의 발현을 real-time RT-PCR을 이용하여 연구하였다. 16S rRNA의 copy number는 감염 후 30일까지 급격하게 증가하였는데 이는 CFU 측정 결과와 일치하고 있다. 결핵균 유전자 중 주된 항원으로 작용하는 유전자인 fbpA의 copy number를 CFU로 나눈 값으로 표현한 발현 양상은 감염 후 10일까지 증가하다가 감소되었다. Heat shock protein인 ${\alpha}$-crystallin을 coding하는 acr은 감염 후 지속적으로 높아졌으나, 산화적 스트레스 환경에서 발현되는 효소들인 ahpC와 aceA의 발현은 감염 후 20일 동안 높아졌다가 30일에는 약간 감소하였으나 비교적 높은 수준을 유지하였다. 이상의 결과는 결핵균이 숙주의 면역 반응이 개시되면 결핵균의 주된 항원 중 하나인 Ag85A를 코딩하는 유전자인 fbpA의 발현 수준을 낮춰 숙주의 Th1 먼역 반응이 낮아지도록 유도한다는 증거로 볼 수 있으며, 면역 반응이 활발해 짐에 따라 큰포식세포 내에서 산화적 스트레스로부터 균을 보호하기 위하여 ahpC와 aceA의 발현이 높아진 것으로 해석된다. 따라서 본 연구는 결핵균이 유전자 발현을 숙주의 면역 반응에 대항하여 스스로 변화시켜 적대적인 숙주 세포 내에서 살아 남을 수 있는 생존 전략을 구사한다는 가능성을 제시한다.

• IMMUNE NETWORK
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• 제11권3호
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• pp.155-162
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• 2011

Background: Toll-like receptor 3 (TLR3) recognizes double-stranded RNA (dsRNA) and induces inflammation. In this study we attempted to ascertain if there are endogenous host molecules controlling the production of cytokines and chemokines. Two candidates, ribosomal protein L19 and L22, were analyzed to determine if they influence cytokine production followed by TLR3 activation. In this study we report that L19 acts upon production of IP-10 or IL-8 differently in glioblastoma cells. Methods: L19 or L22 was transfected into HEK293-TLR3, A549 or A172 cells. After treatment with several inhibitors of NF-${\kappa}B$, PI3K, p38 or ERK, production of IL-8 or IP-10 was measured by ELISA. siRNA was introduced to suppress expression of L19. After Vesicular stomatitis virus infection, viral multiplication was measured by western blot. Results: L19 increased ERK activation to produce IL-8. In A172 cells, in which TLR3 is expressed at endosomes, L19 inhibited interferon regulatory factor 3 (IRF3) activation and IP-10 production to facilitate viral multiplication, whereas L19 inhibited viral multiplication in A549 cells bearing TLR3 on their cell membrane. Conclusion: Our results suggest that L19 regulates TLR3 signaling, which is cell type specific and may be involved in pathogenesis of autoimmune diseases and chronic inflammatory diseases.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제27권10호
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• pp.1844-1854
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• 2017

Trichomonas vaginalis is a pathogen that triggers severe immune responses in hosts. T. vaginalis ${\alpha}$-actinin 2 ($Tv{\alpha}$-actinin 2) has been used to diagnose trichomoniasis. $Tv{\alpha}$-actinin 2 was dissected into three parts; the N-terminal, central, and C-terminal portions of the protein (#1, #2, and #3, respectively). Western blot of these $Tv{\alpha}$-actinin 2 proteins with pooled patients' sera indicated that #2 and #3, but not #1, reacted with those sera. Immunofluorescence assays of two different forms of T. vaginalis (trophozoites and amoeboid forms), using anti-$Tv{\alpha}$- actinin 2 antibodies, showed localization of $Tv{\alpha}$-actinin 2 close to the plasma membranes of the amoeboid form. Fractionation experiments indicated the presence of $Tv{\alpha}$-actinin 2 in cytoplasmic, membrane, and secreted proteins of T. vaginalis. Binding of fluorescence-labeled Trichomonas to vaginal epithelial cells and prostate cells was decreased in the antibody blocking experiment using anti-$Tv{\alpha}$-actinin 2 antibodies. Pretreatment of T. vaginalis with anti-$rTv{\alpha}$-actinin 2 antibodies also resulted in reduction in its cytotoxicity. Flow cytometry, ligand-binding immunoblotting assay, and observation by fluorescence microscopy were used to detect the binding of recombinant $Tv{\alpha}$-actinin 2 to human epithelial cell lines. Specifically, the truncated N-terminal portion of $Tv{\alpha}$-actinin 2, $Tv{\alpha}$-actinin 2 #1, was shown to bind directly to vaginal epithelial cells. These data suggest that ${\alpha}$-actinin 2 is one of the virulence factors responsible for the pathogenesis of T. vaginalis by serving as an adhesin to the host cells.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제12권4호
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• pp.576-582
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• 2002

Probiotics are live microbial feed supplements which beneficially affect the host animal by improving its intestinal microflora. To select the best Lactobacillus spp. as a chicken probiotic, probiotic characteristics of 10 selected Lactobacillus strains isolated from chicken cecum or obtained from KCTC were investigated. The strains were examined for resistance to pH 2.0 and 0.3% oxgall, and adhesion to cecal mucus and cecal epithelial cells. All strains grew in MRS containing 0.3% oxgall. However, Lb. plantarum AYM-10, Lb. fermentum YL-3, AYM-3, and Lb. paracasei YL-6 showed relatively high resistance to 0.3% oxgall. Lb. fermentum YL-3, YM-5, AYM-3, and Lb. paracasei YL-6 survived 4 hours of incubation at pH 2.0. Lb. fermentum YL-3, KCTC 3112, and Lb. plantarum AYL-5 were strongly adhesive to cecal mucus, while the rest showed moderate or low adhesion. Lb. plantarum AYM-10, AYL-1, and AYL-5 had good adhering properties to cecal epithelial cells (30.7$\pm$10.82, 40.2$\pm$20.90, and 14.5$\pm$4.22, respectively). Lb. fermentum YL-3, AYM-3, and KCTC 3547 showed Intermediate adhesion ability, and Lb. plantarum showed better adhesion ability to cecal epithelial cells than Lb. fermentum. Attached Lb. fermentum YL-3 to cecum after 60 min incubation was confirmed using CLSM. Lb. fermentum YL-3 attached to a matrix which was composed of a mucus layer adjacent to intracrypts and pericryptal region. Some Lb. fermentum YL-3 bound to mucosal epithelial cells. From these results, Lb. fermentum YL-3 was selected as a chicken probiotic. In vivo trials of chicks inoculated with Lb. fermentum YL-3 had decreased Salmonella population in cecal contents and livers (p<0.5).

• 동의생리병리학회지
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• 제18권2호
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• pp.580-585
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• 2004

BJYGC is often clinically used as a treatment of allergic rhinitis. This study was aimed to find out the effect BJYGC would have on the helper T cell, and how it can promote the subsets of helper T cells to regain their balance that they lost due to immunological diseases. Splenocytes were prepared from BALB/c mice was cultured without stimulation in the presence of BJYGC for 48 hr. The viability of CD4 T cells from Balb/c mouse were measured at various concentrations of BJYGC using the MTS assay. It was somewhat increased up to concentration of 400 ㎍/ml, but did not show any significant difference. Proliferation was measured using the MTS assay, CD4 Th cells were stimulated with anti-CD3/28 in the presence of BJYGC for 48 hr. As evidence for rapid T cell activation, CD25 expression by flow cytometry was evaluated at 10, 50, 100 and 200 ㎍/㎖ of BJYGC. Th cell differentiation experiments were performed to examine whether BJYGC can affect the Th polarization process. CD4 T cells were activated in culture under neutral, Th1-polarized or Th2-polarized conditions in the presence of BJYGC at 10, 100 and 200 ㎍/㎖. Cytokine production was measured by ELISA. This experiment proved that BJYGC could inhibit the secretion of both IL-4 and IFN-γ in neutral condition and polarized condition, too. Considering that BJYGC shows an excellent effect on treating allergies, the author can conclude that its pharmacological action may be associated with decreased IL-4 and, it may also regulate IFN-γ depending the host's need. Also, it was discovered that Th1 cell was pathologic in chronic inflammatory tissue specific diseases, such as insulin dependent diabetes mellitus, multiple sclerosis, RA, and uveitis. We are counting on the BJYGC to be able to control the tendency of Th1 cell predominancy in an immune reaction.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제28권3호
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• pp.482-490
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• 2018

Candida albicans infections are often problematic to treat owing to antifungal resistance, as such infections are mostly associated with biofilms. The ability of C. albicans to switch from a budding yeast to filamentous hyphae and to adhere to host cells or various surfaces supports biofilm formation. Previously, the ethanol extract from Paeonia lactiflora was reported to inhibit cell wall synthesis and cause depolarization and permeabilization of the cell membrane in C. albicans. In this study, the P. lactiflora extract was found to significantly reduce the initial stage of C. albicans biofilms from 12 clinical isolates by 38.4%. Thus, to assess the action mechanism, the effect of the P. lactiflora extract on the adhesion of C. albicans cells to polystyrene and germ tube formation was investigated using a microscopic analysis. The density of the adherent cells was diminished following incubation with the P. lactiflora extract in an acidic medium. Additionally, the P. lactiflora-treated C. albicans cells were mostly composed of less virulent pseudohyphae, and ruptured debris was found in the serum-containing medium. A quantitative real-time PCR analysis indicated that P. lactiflora downregulated the expression of C. albicans hypha-specific genes: ALS3 by 65% (p = 0.004), ECE1 by 34.9% (p = 0.001), HWP1 by 29.2% (p = 0.002), and SAP1 by 37.5% (p = 0.001), matching the microscopic analysis of the P. lactiflora action on biofilm formation. Therefore, the current findings demonstrate that the P. lactiflora ethanol extract is effective in inhibiting C. albicans biofilms in vitro, suggesting its therapeutic potential for the treatment of biofilm-associated infections.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제16권7호
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• pp.1078-1083
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• 2006

Capsaicin is the active ingredient in chili pepper and has an inhibitory effect on Helicobacter pylori growth and $NF-{\kappa}B$ activation. The present study examined the effect of capsaicin on interleukin (IL)-8 production by H. pylori ATCC 43504-infected MKN-45 cells, a gastric epithelial cell line. The viability of the MKN-45 cells treated with capsaicin at 0, 50, 100, 250, and $500\;{\mu}M$ was 99, 98, 99, 99, and 85%, respectively. A capsaicin concentration as low as $50\;{\mu}M$ significantly inhibited the IL-8 production induced by H. pylori ATCC 43504 infection (43.2% of control) during 24 h of incubation. However, low concentrations of capsaicin $(50\;and\;100{\mu}M)$ did not significantly inhibit the IL-8 production by $TNF-{\alpha}-$ or PMA-treated MKN-45 cells. Therefore, the overall inhibitory effect of capsaicin on H. pylori ATCC 43504 was the sum of H. pylori ATCC 43504 growth inhibition, host cell survival, and $NF-{\kappa}B$ signal cascade inhibition.