Ha, Doo-Bong;Lee, Chung-Choo;Park, Young-Chul;Lim, Woon-Ki;Yoo, Byoung-Je
The Korean Journal of Zoology
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v.28
no.3
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pp.179-193
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1985
In order to find factors which are essential for the differentiation of chick embryonic myoblasts in culture, chick embryo extract was fractionated by ammonium sulfate or/and Sephadex G-75, and the effects of each fraction on the proliferation and fusion of the myoblasts were examined. The results obtained were as follows: (1) High concentration of embryo extract in the culture medium enhanced the cell proliferation and delayed the fusion of myoblasts. (2) The Sephadex G-75 fractions of embryo extract having proteins of molecular weight between 40,000 and 22,000 enhanced the proliferation and fusion of myoblasts when added to culture media. (3) The fraction of embryo extract precipitated in $60\\sim95%$ saturated ammonium sulfate solution enhanced evidently both the proliferation and fusion of myoblasts. Elution of this effective fraction by Sephadex G-75 showed similar elution profile and effects on the myoblast differentiation as those observed by Sephadex G-75 chromatography of the whole embryo extract, suggesting that the Sephadex fractions and ammonium sulfate fractions contain the same factors that enhance the proliferation and fusion of myoblasts.
Physicochemical properties, intestinal microbial growth, and inhibitory effects of alcohol-insoluble polysaccharide (AIP) extracted from cucumber peel were investigated. AIP was composed of 14.54% crude protein, 1.04% crude lipid, 13.74 % crude ash, 9.1% soluble dietary fiber, and 41.2% insoluble dietary fiber. AIP showed low bulk density (0.18 g/mL) and water-holding capacity (6.39 g/g), and high oil-holding capacity (3.96 g/g). Pectic substance fractions [water-soluble pectic substance (WSP), ethylenediaminetetraacetic acid-soluble pectic substance (ESP), and alkali-soluble pectic substances (ASP)] and hemicellulose fractions [1 M KOH-soluble hemicellulose (KHP1) and 4 M KOH-soluble hemicellulose (KHP4)] were obtained from sequential chemical fractionation of AIP. WSP showed higher total sugar contents than total uronic acid contents, whereas opposite results were observed in ESP and ASP. Molecular weight distributions of three pectic substance fractions were in order of ASP>ESP>WSP. Ion exchange chromatogram pattern of WSP was different from those of ESP and ASP. Major component of WSP was fraction eluted by 0.05 M ammonium acetate buffer, whereas that of ESP and ASP was fraction eluted by 0.2 M NaOH. WSP and ASP showed growth-promoting activities against Lactobacillus brevis, Bifidobacterium bifidum, and B. longum, whereas B. bifidum and B. longum for ESP. KHP1 and KHP4 fractions had significant growth-promoting activities against B. bifidum.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.45
no.2
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pp.93-98
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2022
To assess the feasibility of silk sericin for non-textile application, the storage stability and biological safety of sericin were examined. It was extracted at 37℃, 70℃, 100℃, and 121℃ for 1, 3, and 5 h to elucidate the effect of extraction condition on the stability and safety of silk sericin. The solubility was increased till approximately 26% with extraction temperature of 121℃ for 1 h. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) showed that the molecular weight distribution depended on the extraction conditions. Extracted sericin displayed typical UV absorption bands upon spectrometric analysis. To examine the reproducibility of its obtained conformation, sericin was extracted thrice and its circular dichroism (CD) spectra was measured each time. Most CD spectra showed reproducibility regardless of temperature and time except under 100℃ extraction condition. The diversity of CD spectrum showed gradual reduction and was finally coincident with extraction time from 1 to 5 h. Notably, sericin has a negative peak of approximately 200 nm attributed to random coil conformation, regardless of extraction condition. However, at the 100℃ extraction condition, sericin showed both bands to be negative bands of approximately 200 and 220 nm, respectively. Sericin was centrifuged to determine the stability of storage conditions. The sericin extracted at 100℃ and 121℃ for 1 h was found to form gel rapidly within 1 h, but at 121℃ condition, the gel fraction was approximately 20% within 1 h which retained its phase regardless of storage time. The gel fraction of sericin extracted at 100℃ for 5 h increased with time, however at the 121℃ for 5 h condition, the gel fraction was measured to be less than 10% regardless of increase in storage time. PetriflimTM AC plates test showed that sericin was safe from aerobic bacteria activity by extraction under high temperature.
Seahorse Hippocampus abdominalis a marine teleost fish, has long been used as one of the essential materials in traditional Chinese medicine. However, the uses of seahorse have been limited due to its high cost, despite its beneficial biological activities. Seahorse has not been widely explored for its biofunctional properties and active components. In the present study, the enzymatic hydrolysates of seahorse were prepared by using two digestive enzymes (trypsin and pepsin) and five food grade enzymes (neutrase, protamex, alcalase, kojizyme, and flavourzyme). The enzymatic hydrolysates indicated higher hydrolysis yields than its water extract. Among them, the distilled water-pepsin hydrolysate (DP) which was obtained by distilled water extraction followed by pepsin hydrolysis, showed the highest yield and protein content as well as the highest alkyl radical scavenging activity. Also, it provided protective effects against oxidative stress induced by AAPH in vero cell and zebrafish. Further fractionation based on the molecular weight was carried out to identify it’s active components, and < 5 kDa (less than 5 kDa) molecular weight fraction was confirmed to have the highest antioxidant activity. In conclusion, this study suggests that DP of seahorse has antioxidant properties, and might be a novel and useful material from the marine origin for healthy functional foods and cosmetics.
In the present study, we investigated the tolerance of Commelina communis to growth in Cu-contaminated soil and water We examined the germination rate, root and shoot growth of seedlings, fresh biomass in soil and water, and ability to eliminate Cu. We found that C. communis eliminated 41% of Cu in soil containing 50 mg Cu/kg and removed over 50% of Cu from water containing 100 mg Cu/L Cu. In addition, the plants could accumulate 90 mg Cu/g when grown in soil containing 50 mg Cu/kg and 140 mg Cu/g when grown in soil containing 100 mg Cu/kg thus higher levels of Cu removal were observed in soils containing higher Cu concentrations. In water, the maximal accumulation rate was 4.9 mg Cu/g root and 1.2 mg Cu/g shoot in water containing 20 mg Cu/L, and 7 days after exposure, Cu absorption saturated. Further, the growth rate of C. communis was not affected by up to 100 mg Cu/kg in the soil. Therefore, the phytotoxic effect of Cu on plants increased as the concentration of Cu was raised, although to different extents depending on whether the Cu was in soil or water. Overall, Cu removal from soil by C. communis was most effective at 100 mg Cu/kg in soil and 10 mg Cu/L in water. Finally, we identified two peaks of Cu-binding ligands in C. communis. Which is a high molecular weight peak (HMWL) at 60 kDa (Fraction 17 to 25) and a Cu binding peptide peak at <1 kDa (Very low molecular weight ligand: VLMWL). Cu-binding peptide (Cu-BP) was observed to have an amino acid composition typical of phytochelations.
We examined the effects of crude hemicellulose, alcohol-insoluble hemicellulose, high molecular weight soluble polysaccharide (HMS-P : MW>10 kDa) and low molecular weight souble polysaccharide (LMS-P : MW<10 kDa) fraction isolated from buckwheat (raw, roast and steam) on digestive enzyme activity in vitro. The enzyme activities were measured after the polysaccharides-enzyme mixtures were incubated at $37^{\circ}C$ for 5 min. Crude hemicellulose, alcohol-insoluble hemicellulose and residue lowered ${\alpha}-amylase$ activity, whereas HMS-P and LMS-P had no inhibitory effect. All polysaccharides except LMS-P lowered lipase activity. Crude hemicellulose, alcohol-insoluble hemicellulose, residue and HMS-P showed a marked decrease of trypsin and chymotrypsin activity but LMS-P showed a slight decrease of them.
The present study has been undertaken to elucidate whether there are developmentally regulated proteins in chick myogenesis by observing cellular and plasma membrane glycoproteins by use of labelled-Con A staining. At least three classes and five classes of glycoproteins can be identified in terms of their occurrence and their change in levels, respectively. As to the former, there are glycoproteins which are specific to cellular fraction are eight, those which are specific to plasma membrane are four, and those which occur in both fraction are nine. Likewise, as to the latter, there are glycoproteins which are invariant, those which increase in level, those which decrease, those which increase and subsequently decrease, and those which decrease and subsequently increase. The present experiment reveals that the level of fibronectin does decrease after the fusion and that the apparent conflicting results so far reported may be due to the difference in time point setting during fusion and myotube stages. It is thought to be a general tendency that glycoproteins of high-molecular-weight decrease and those of low-molecular-weight increase in relative levels as the fusion proceeds. These results are suggestive of the fact that a major structural reorganization of glycoproteins does occur in association with myoblast fusion.
Ginseng, the root of Panax ginseng, is one of the oldest herbal medicines. It has a variety of physiological and pharmacological effects. Recently, we isolated a subset of glycolipoproteins that we designated gintonin, and demonstrated that it induced transient change in intracellular calcium concentration $([Ca^{2+}]_i)$ in cells via G-protein-coupled receptor signaling pathway(s). The previous method for gintonin isolation included multiple steps using methanol, butanol, and other organic solvents. In the present study, we developed a much simple method for the preparation of gintonin from ginseng root using 80% ethanol extraction. The extracted fraction was designated edible gintonin. This method produced a high yield of gintonin (0.20%). The chemical characteristics of gintonin such as molecular weight and the composition of the extract product were almost identical as the gintonin prepared using the previous extraction regimen involving various organic solvents. We also examined the physiological effects of edible gintonin on endogenous $Ca^{2+}$-activated $Cl^-$ channel activity of Xenopus oocytes. The 50% effective dose was $1.03{\pm}0.3\;{\mu}g$/mL. Finally, since gintonin preparation through ethanol extraction is easily reproducible, gintonin could be commercially applied for ginseng-derived functional health food and/or drug following the confirmations of in vitro and in vivo physiological and pharmacological effects of gintonin.
Shin, Hyun Young;Kim, Hoon;Jeong, Eun-Jin;Kim, Hyun-Gyeong;Son, Seung-U;Suh, Min Geun;Kim, Na Ri;Suh, Hyung Joo;Yu, Kwang-Won
The Korean Journal of Food And Nutrition
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v.34
no.5
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pp.487-497
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2021
To investigate the industrial availability of liquid fermentation (PL-ferment) by Phellinus linteus mycelium as a postbiotics for the inhibition of inflammation, PL-ferment was fractionated into culture supernatant (CS), hot-water extract (HW) from PL-ferment, EtOH-precipitate (CP) fractionated from HW, and the dialysate (DCP) of CP. Compared to the other fractions, DCP which is expected to contain exopolysaccharide (EPS) as the major component, significantly decreased the production of NO, IL-6, and MCP-1 in LPS-induced RAW 264.7 cells, and IL-6 and IL-8 in TNF-α and IFN-γ-induced HaCaT cells. The general component analysis results showed that no significant difference in components was observed between the fractions, whereas sugar composition analysis revealed that DCP had decreased glucose and increased mannose contents compared to the other fractions. This suggests that mannose played an important role in the anti-inflammatory activity of the active fraction, DCP. Molecular weight distribution analysis revealed that DCP was mainly composed of low-molecular-weight material-removed high-molecular-weight polysaccharides of 18-638 kDa, suggesting that EPS originated from P. linteus EPS. In conclusion, our results suggest that the DCP of P. linteus mycelium fermentation using the anti-inflammatory activity could be used industrially as postbiotic material.
For evaluating the suitability of human follicular fluid(HFF) as protein supplement in ART, this preliminary study was performed to examine the maturation promoting activity of HFF on mouse follicular oocytes in vitro. Mouse follicular oocytes were collected from ovaries of 21-28 day old ICR mice by puncturing the antral follicles with fine needle at 48 hours after PMSG injection. The oocytes were rinsed and cultured in modified Whittingham's $T_6$ medium containing purines or dbcAMP to maintain meiotic arrest, and different concentrations of HFF were added into the culture medium to examine the effect of HFF on releasing the oocytes from the suppressive influence of the meiotic inhibitors. As a control for HFF, the maturation promoting activity of human fetal cord serum(HFCS) was investigated and compared with the activity of HFF. While HFF was separated, by molecular weight(M.W), into high M.W. fraction(M.W>30,000) and low M.W. fraction(M.W<30,000) and the effects of the fractions on meiotic resumption were investigated in the presence of the meiotic inhibitors. Also hormone analysis was performed to compare the content of hormones in HFF with that in HFCS. Same concentrations of HFF and HFCS induced similar germinal vesicle break down(GVBD) rates of the oocytes meiotic arrested by purines(4mM hypoxanthine+0.75mM adenosine), but the extrusion rate of 1st polar body(PB) of the oocytes cultured in HFF(65.0%, P<0.05) was significantly higher than that(51.6%) in HFCS. While, in the presence of 200 M dbcAMP, the maturation promoting activity of HFF (GVBD: 70.5%, $p<10^{-6}$; 1st PB extrusion: 67.1%, $p<10^{-3}$) was significantly greater than that of HFCS(GVBD: 35.2%; 1st PB extrusion: 41.1%). The oocytes cultured in the fraction of HFF containing high M.W. components showed higher meiotic maturation rates than the oocytes cultured in the low M.W. fraction of HFF. Gonadotropins and $E_2$ were known to improve the completion of maturation changes, and the levels of these hormones were higher in HFF than in HFCS. Therefore, HFF was more effective than HFCS to use for promoting meiotic resumption of mouse oocytes in vitro.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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