As basic study for purpose bioremedation in oil-contaminated environment, Primarily, we isolated biosurfactant producer- strains utilized of oil-agar plate, and measured surface tension and emulsifying activity. We investigated in oil-contaminated soil and sea water. In this laboratory, Pseudomonas sp. EL-012S strain isolated from oil-contaminated soil was able to product novel biosurfactant under the optimal culture condition. Its condition was n-hexadecane 2.0%, NH$_4$NO$_3$0.4%, Na$_2$HPO$_4$0.6%, KH$_2$PO$_4$0.4%, MgSO$_4$.7$H_2O$ 0.02%, CaCl$_2$.2$H_2O$ 0.001%, FeSO.7$H_2O$ 0.001%, initial pH 7.0 and aeration at 3$0^{\circ}C$, respectively. This biosurfactant was produced in both late-exponential and early-stationary phase. The biosurfactant from Pseudomonas sp. EL-012S was composed of carbohydrate, lipid and protein. The purified-biosurfactant was examined two (biosurfactant type I, II) with the silica gel G60 column chromatography and the purified biosurfactant confirmed thin layer chromatography, high performed liquid chromatography and gas chromatography. The biosurfactant type I involved in carbohydrate-lipid-protein characteristics lowered surface tension of water to 27dyne/cm and interfacial tension 4.5dyne/cm aginst to n-hexadecane and the biosurfactant type B involved in carbohydrate lipid characteristics lowered surface tension of water to 30dyne/cm and interfacial tension 8dyne/cm against to n-hexadecane. Specially type I had the properties such as strong emulsifying activity, emulsion stability, pH-stability, thermo-stability, high cleaning activity and forming ability.
본 연구에서는 유류로 오염된 환경을 생물학적으로 정화하는 방법의 확립을 위하여 생물계면활성제를 생산하는 세균을 유류오염지역으로부터 분리한 후, 생물계면활성제의 생산에 미치는 각종 환경요인과 분리세균의 hydrocarbon 이용능 등을 조사하였다. 유류로 오염된 해수 및 토양시료로부터 crude oil을 기질로 하여 생물계면활성제를 생산하는 172개의 균주를 순수분리하였다. 이들중에서 표면장력 감소능이 가장 우수한 SW1을 공시균주로 선정한 후, 형태학적, 배양적 및 생화학적 제반 특성을 조사하여 그 분류학적 위치를 검토한 결과 Pseudomonas속으로 판명되어, 편의상 Pseudomonas sp. SW1로 명명하였다. 각종 탄소원을 이용하여 유화활성 및 표면장력 감소능을 조사한 결과, crude oil과 n-hexadecane에서 비슷한 유화활성 및 표면장력 감소능을 나타내었다. 생물계면활성제 생산을 위한 배지 및 배양조건은 n-hexadecane 2.0%, yeast extract 0.04%, $K_{2}HPO_4$ 0.02%$KH_2PO_4$ 0.03%, $MgSO_4$ center dot $7H_2O$ 0.04%, 30^{\circ}C.$ 및 pH 7.0이었다. 상기실험에서 결정된 조건하에서 공시균을 배양한 결과, 배양 2일 후인 정지기 초기에 생물계면활성제가 가장 많이 생산되었으며, 이때 minimum surface tension은 32mN/m이었다. 또한 본 공시균은 Bunker oils, n-alkanes, branched alkanes등을 기질로 하여 생육할 수 있었다.
본 실험을 수행하기 위해 EPS를 생산하지 않는 Lactobacillus paracasei KLB58의 돌연변이주를 NTG mutagenesis 방법을 사용하여 선별하였다. 선별된 돌연변이주의 숙주에 대한 부착능을 연구하기 위해 세포 표면의 소수성의 변화에 관하여 연구가 진행되었다. 정량적인 측정을 위해 hydrocarbon의 한 종류인 hexadecane을 소수성층으로 사용하여 세포와 함께 섞이는 kinetics를 측정하였다. 실험결과 KLB58의 돌연변이주는 야생형에 비해 세포표면이 상대적으로 높은 소수성을 나타내었다.
식물세포인 Lithospermum erythrorhizon을 교반 반응기와 calcium alghinate에 고정화된 상태로 충전층 반응기에서 n-hexadecane으로 동시 추출하면서 shikonin을 생산하여 각각의 생산성을 비교하였다. 교반 반응기에서 shikonin의 비생산과 부피생산성은 각각 1.5mg shikonin/g cell과 400$\mu g$ shikonin/(L.day)였고 충전층 반응기에서는 가각 2.0mg shikonin/g cell과 2857 $\mu g$ shikonin/(L.day)였으며 이는 각각 교반 반응기에 비하여 1.3, 7.1배 높은 것이다. 충전층 반응기에서 shikonin의 생산성이 높은 것은 calcium alginate 입자에 세포가 고농도고 축적되어 단위 반응기 부피당 세로의 부하 능력이 높고 또한 세포가 서로 접촉하기가 쉽고 고정화 입자내의 환경이 세포가 분화하기에 좋은 조건을 형성하기 때문인 것으로 사료된다.
본 연구에서는 Rhodococcus sp. strain IGTS8을 이용한 미생물 탈황공정에 있어서 비이온 계면활성제인 SPAN의 영향을 조사하였다. 탈황 효율 연구에 있어서 모델 오일로는 DBT가 함유된 hexadecane, 수상으로는 배지 용액을 이용하였다. 연구에 있어서 실험 변수로는 오일/물 혼합물에 있어서 오일의 부피 %, SPAN 20의 농도, 용액의 pH로 하였으며 일반적으로 오일의 부피 비율, 계면활성제의 농도가 증가할 수록 탈황 효율이 감소되었다. 이러한 결과는 오일의 부피비가 증가할수록 계면활성제의 농도가 증가할수록 오일상의 OBT와 균주의 효율적인 접촉이 저해되기 때문으로 고려된다.
폐기름 유출지역에서 분리 동정된 미생물 Xl, X2, X3은 폐유나 그 주성분인 난분해성 물질들을 유일 탄소원으로 자랄 수 있었다. Naphthalene과 2-methyl naphthalene은 7일만에 약 80$\%$ 분해되었다. Hexane과 hexadecane은 거의 대부분 분해되며 60$\%$의 분해가 폐유에서 관찰되었다. 합성 계면활성제인 Triton X-100와 Tween 20은 세포의 성장과 분해에 오히려 저해함을 보였다. Xl, X2은 그람 음성을 X3은 그람 양성을 보이며 항생제 ampicillin에 저항성을 가진다. Xl의 30kb plasmid을 E.coli에 transform하여 유전공학적 활용 가능성을 보였다.
유해유기물질의 미생물 분해시 일어나는 총괄반응을 이론적으로 예측하는 방법을 기술하였다. 열역학적 이론을 바탕으로 하는 반쪽반응 방법을 사용하,였고, 최근에 도입된 이론들인 중간체 생성 반응, oxygenation반응, 그룹이론에 의한 표준 자유생성에너지 예측기법 등을 적용하였다. 대표적인 유해유기물질인 phenanthrene과 함께 glucose, hexadecane의 미생물 분해 반응식을 실제로 계산하였다. 예측된 총괄반응식을 이용하여 미생물 수율, 산소 요구량, 질소 요구량, 무기화율 등의 정보를 얻을 수 있었으며, 이는 오염된 지하수/토양의 생물복원 공법 설계 및 자연정화평가 등에 유용하게 적용될 수 있을 것으로 기대한다.
International Journal of Air-Conditioning and Refrigeration
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제6권
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pp.113-123
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1998
The present study is to investigate the effect of experimental parameters on the heat transfer characteristics of a spherical capsule storage system using paraffins. N-Tetradecane and mixture of n-Tetradecane 40% and n-Hexadecane 60% were used as paraffins. Water with inorganic material was also tested for the comparison. The experimental parameters were varied for the Reynolds number from 8 to 16 and for the inlet temperature from -7 to 2$^{\circ}C$. Measured local temperatures of spherical capsules in the storage tank were utilized to calculate charging and discharging times, dimensionless thermal storage amount, and the average heat transfer coefficients in the tank. Local charging and discharging times in the storage tank were significantly different. The effect of inlet temperature on charging time was larger than that on discharging time, but the effect of Reynolds number on charging time was smaller than that on discharging time. Charging time of paraffins was faster by 11~72% than that of water with inorganic material, but little difference of discharging time was found among them. The effect of Reynolds number on the dimensionless thermal storage was less during charging process and more during discharging process than the effect of inlet temperature. The effect of the inlet temperature and the Reynolds number on the average heat transfer coefficient of the storage tank was stronger during discharging process than during charging process. The average heat transfer coefficients of the spherical capsule system using paraffins were larger by 40% than those using water.
토양으로부터 biosurfactant를 생산하는 미생물을 분리하여 Tsukamurella sp. 26A로 동정하였다. Biosurfactant 생산을 위한 최적 배지 조성은 n-hexadecane 7%, $NaNO_{3}$ 0.2%, $K_2HPO_4$ 0.001%, $MgSO_{4}$ center dot $7H_{2}O$ 0.02%, $CaCl_2$ center dot $2H_{2}O$ 0.02%, yeast extract 0.02%(pH 6.8-7.0, 30^{\circ}C.$ )이었으며 배양액의 최저 표면장력과 계면장력은 각각 30mN/m, 1.5mN/m였다. 유화기질로서 hydrocarbon류, edible oil류, 그리고 petroleum oil등에 작용시켰을 경우 비교적 높은 유화활성과 유화 안정도를 나타내었다.
The characteristics of de-emulsification of pertroleum emulsion by Nocardia amarae were investigated. Insoluble medium containing n-hexadecane was more effective than soluble medium in de-emulsification of emulsion containing diesel and bunker C as the organic phase. Emulsion made by the addition of xanthan or bioemulsifier was de-emulsified by N. amarae, and longer culture age was effective. In low viscosity range, organic phase with longer carbon chain was more effective. The contact, angle between bacterial film and water droplet in air increased from 16 degree for 4 day culture age to 26 degree for 15 day. The contact angle between bacterial film and water droplet in kerosene, n-heyxane or n-hexadecane also increased to greater than 100 degree after 3 day culture age. The hydrophobicity of bactgerial film increased according to the culture age.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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