To elucidate action mechanism of lyophyllan A, an antitumor polysaccharide of Lyophyllum decastes, its immunological activities were examined. Lyophyllan A increased significantly the weights of spleen and liver of mice. Lyophyllan A also restored the decreased thymic weight in tumor-bearing mice. It did not show any direct cytotoxicity against tumor cells, but showed immunopotentiating activities by increasing the number of the plaques in hemolytic plaque assays. Lyophyllan A increased the number of peritoneal exudate cells (PEC) and inhibited the growth of sarcoma 180 mixed with PEC. Moreover the macrophages from lyophyllan A-treated mice exhibited a strong cytotoxic activity towards L5178Y target cells.
Kim, Byong-Kak;Cho, Hye-Youn;Kim, Jin-Sook;Kim, Ha-Won;Choi, Eung-Chil
Korean Journal of Pharmacognosy
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v.24
no.3
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pp.203-212
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1993
To find antitumor components in the hot water extract of the cultured mycelia of Ganoderma lucidum, protein-bound polysaccharides were purified and fractionated (Fr. I-V) by DEAE-cellulose ion exchange column chromatography and Sepbarose CL-4B gel filtration. When a dose of 20 mg/kg/day of each was, i.p., injected into ICR mice, the inhibition ratios against the solid form of sarcoma 180 were $64.2{\sim}75.8%$. The antitumor component was examined for immunological activity. It increased the amount of superoxide anion released by induced macrophages in peritoneal cavity to 1.8 times and the count of hemolytic plaque-forming cells (PFC) was increased to 4.4 times as compared with those of the control group. It contained 68.6% polysaccharide which consisted of mannose, glucose, galactose, fucose and xylose and 5.1% protein consisting of 17 amino acids. The contents of hexosamine were 0.78%. The molecular weight of Fr. V that showed the highest antitumor activity was $5.8{\times}10^4$ dalton by Sepharose CL-4B gel filtration. It was named lucidan.
ABSTRACT: In order to find physiologically active components from higher fungi, hot-water soluble components were extracted from the basidiocarps of Ganoderma lucidum. The extract was purified and separated by DEAE cellulose ion exchange chromatography and Sepharose CL-4B gel filtration method. The separated fractions were designated CR, IN, IA, GL and GH. Fraction GL showed the highest antitumor activity among the fractions and its molecular weight was found to be 47 KD. The tumor inhibition ratio of Fr. GL was 81 % at the dose of peritoneal administration of 20 mg/kg/day for 10 days in mice. Chemical analysis of this fraction showed 82% polysaccharide, 8% protein and 0.9% hexosamine. The polysaccharide moiety consisted of 63% glucose, 27% galactose, 7% mannose and 3% fucose. Fraction IN was found to increase the amount of superoxide anion in activated macrophages to 1.6-fold and the number of plaques in hemolytic plaque assay to 6-fold, respectively. These results indicate that the antitumor activity was exerted through immunopotentiation, but not through direct cytotoxicity against the tumor.
To find antitumor components from higher fungi, the cultured mycelia of Paxillus atrotomentosus were extracted with hot water. The water soluble fraction was purified and separated by DEAE-cellulose ion exchange chromatography and Sepharose CL-4B gel filtration method. The separated fractions(Fr.) were designated CR A, B, C and D. Fr. A showed the highest inhibition ratio of 68.51% among the five tractions at a dose of 20 mg/kg/day. When Fr. A was examined for immunopotentiation activity, it increased the amount of the superoxide anion from activated macrophages to 1.1 fold and the number of plaques in hemolytic plaque assay to 2.3 fold, respectively. Otherwise, it did not show direct cytotoxity in sarcoma 180. Delayed type hypersensitiyity reaction showed that the decreased footpad swelling of tumor-hearing was restored to the normal. These results indicate that antitumor activity was exerted through immunopotentiation. Its chemical analysis showed 86.36% polysaccharide, 1.52% protein and 1.64% hexosamine. The polysaccharide consisted of fucose, galactose, glucose, mannose and xylose. This component was named paxillan.
One of water and/or methanol extracts from 14 herbal deugs which were screened using murine splenocytes showed immunosuppressive activities previously. After water extract from Xanthium strumarium was treated with chloroform. $100 \mu{g/ml}$ of water layer (XS-WCI) has very strong immunosimulating activities tested by $^3H$-thmidine incorporation (control as $100 \mu{g/ml}$, 26345 cpm was 69515 cpm). MLR also appears to be simulated strongly (control vs $100 \mu{g/ml}$, 4962 cpm vs 78688 cpm). When $100 \mu{g/ml}$ of XS-WCI and $0.8 \mu{g/ml}$ of concanavalin a (ConA) were added. more $^3H$-thymidine were incorporated significantly, compared with $0.8 \mu{g/ml}$ of ConA only. In contrast with ConA. results from $5 \mu{/ml}$ of lipopolysaccharide (LPS) and $100 \mu{g/ml}$ of XS-WCI were not different. compared with $5\mu{/ml}$of LPS only. These results indicated the responses of XS-WCI to B cell and T cell may be different. XS-WCI was injected intraperitoneally (10 mg/kg. 50mg/kg/ 100 mg/kg) for 4 days or 10 days and tested secretion of IgM or IgG by direct and indirect hemolytic plaque-forming cell assays, respectively. Numbers of hemolytic plaques for both IgM and IgG were increased significantly. Especially, secretion of IgGs was increased more than 10 times. After administration of XS-WCI for 7 days (50 mg/kg. 100 mg/kg) splenomegaly deu to graft vs host reaction was observed. Human lymhocytes separated from whole blood by Ficoll-Hypaque method were also proliferated after treatment of $10 \mu{g/ml}$ and $50 \mu{g/ml}$ of XS-WCI. As seen in murine lymphocytes, human lymphocyte proliferation was increased synergistically after treatment with both of XS-WCI and phytohemagglutinin (PHA). It appears that XS-WCI may have potential immunosimulating activities and that it remains to be purified further for isolation of active components.
To find antitumor components in the cultured mycelia of Lepiota procera, the proteinpolysaccharide obtained from the mycelia was subjected to DEAE - Sephadex A-50 column chromatography and Sepharose-4B gel filtration. Of the fractions, the purified Fraction C1 was named lepiotan and examined for antitumor activity against the solid form of sarcoma 180 in ICR mice. The inhibition ratio of lepiotan was 64% at the dose of 10 mg/kg/day for 10days. The chemical analysis of lepiotan showed 60% polysaccharide and 21 % protein. The polysaccharide moiety was found to be a heteromannoglucan which consisted of 46.3% glucose, 40.2% mannose and 11.0% fucose. When the antitumor component, Fraction A, was examined for immunopotentiation activity, it was found to increase the number of plaques in hemolytic plaque assay and to restore the immunity in the tumor-bearing mice up to 89.7% of the normal level. Also the antitumor acitivity was suppressed by the treatment with carrageenan, an antimacrophage agent. These results indicate that the antitumor activity was exerted through immunopotentiation, but not through direct cytotoxicity against the tumor.
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