Helicobacter pylori is a spiral-shaped, microaerophilic human gastric pathogen causing chronic-active gastritis in association with duodenal ulcer and gastric cancer. To investigate the possibility of H. pylori outer membrane proteins (OMPS) as the oral vaccine antigens, sarcosine-insoluble outer membrane fraction has been prepared from H. pylori NCTC 11637. The major OMPs having apparent molecular masses of 62 kDa, 54 kDa and 33 kDa were detected by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), which were identified as urease B subunit (UreB), heat shock protein (Hsp54 kDa) and urease A subunit (UreA), respectively. Minor protein bands of 57 kDa, 52 kDa, 40 kDa, 36 kDa and 31 kDa were also observed. The antigenicity of H. pylori OMPs and antigenic cross-reactivity among the strains were determined by immunoblot analysis using anti-H. pylori OMPs antisera or intestinal lavage solutions. The results showed that UreB, Hsp54 kDa, UreA and 40 kDa proteins vigorously stimulated mucosal immune response rather than systemic immunity. From this results, these proteins seemed to be useful as the antigen candidates for the oral vaccine. The immunoblotting results with surface proteins from eight isolated H. pylori strains were similar to that of H. pylori NCTC 11637. The IgA which had been arised from oral administration of H. pylori OMPs, was able to bind H. pylori whole-cells.
Kim, Jin Yeong;Lee, Su Ji;Ha, Tae Joung;Park, Ki Do;Lee, Byung Won;Kim, Sang Gon;Kim, Yong Chul;Choi, In Soo;Kim, Sun Tae
Korean Journal of Environmental Agriculture
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v.32
no.1
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pp.48-54
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2013
BACKGROUND: Sorghum (Sorghum bicolor (L.) Moench) ranks as the 6th most planted crop in the world behind wheat, rice, maize, soybean, and barley. The objective of this study was to identify bio-marker among sorghum cultivars using proteomics approach such as two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis (2-DE) coupled with mass spectrometry (MS). METHODS AND RESULTS: Proteins were extracted from sorghum seed, and separated by 2-DE. Total 652 spots were detected from 4 different sorghum seed after staining of 2-DE with colloidal Coomassie brilliant blue (CBB). Among them, 8 spots were differentially expressed and were identified using MALDI-TOF/TOF mass spectrometry. They were involved in RNA metabolism (spot1, spot 4), heat shock proteins (HSPs, spot 2), storage proteins (spot 3, spot 5, and spot 6), and redox related proteins (spot 8). Eight of these proteins were highly up-regulated in Whinchalsusu (WCS). The HSPs, Cupin family protein, and Globulin were specifically accumulated in WCS. The DEAD-box helicase was expressed in 3 cultivars except for WCS. Ribonuclease T2 and aldo-keto reductase were only expressed in 3 cultivars except for Daepung-susu (DPS). CONCLUSION(S): Functions of identified proteins were mainly involved in RNA metabolism, heat shock protein (HSP), and redox related protein. Thus, they may provide new insight into a better understanding of the charactreization between the cultivars of sorghum.
Zhou, Jia;Yue, Shuangming;Xue, Benchu;Wang, Zhisheng;Wang, Lizhi;Peng, Quanhui;Hu, Rui;Xue, Bai
Journal of Animal Science and Technology
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v.64
no.1
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pp.110-122
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2022
The reduction of milk yield caused by heat stress in summer is the main condition restricting the economic benefits of dairy farms. To examine the impact of hyperthermia on bovine mammary epithelial (MAC-T) cells, we incubated the MAC-T cells at thermal-neutral (37℃, CON group) and hyperthermic (42℃, HS group) temperatures for 6 h. Subsequently, the cell viability and apoptotic rate of MAC-T cells, apoptosis-related genes expression, casein and amino acid transporter genes, and the expression of the apoptosis-related proteins were examined. Compared with the CON group, hyperthermia significantly decreased the cell viability (p < 0.05) and elevated the apoptotic rate (p < 0.05) of MAC-T cells. Moreover, the expression of heat shock protein (HSP)70, HSP90B1, Bcl-2-associated X protein (BAX), Caspase-9, and Caspase-3 genes was upregulated (p < 0.05). The expression of HSP70 and BAX (pro-apoptotic) proteins was upregulated (p < 0.05) while that of B-cell lymphoma (BCL)2 (antiapoptotic) protein was downregulated (p < 0.05) by hyperthermia. Decreased mRNA expression of mechanistic target of rapamycin (mTOR) signaling pathway-related genes, amino acid transporter genes (SLC7A5, SLC38A3, SLC38A2, and SLC38A9), and casein genes (CSNS1, CSN2, and CSN3) was found in the heat stress (HS) group (p < 0.05) in contrast with the CON group. These findings illustrated that hyperthermia promoted cell apoptosis and reduced the transport of amino acids into cells, which inhibited the milk proteins synthesis in MAC-T cells.
Luis Felipe Guzman;Guillermo Martinez-Velazquez;Fernando Villasenor-Gonzalez;Vicente Eliezer Vega-Murillo;Jose Antonio Palacios-Franquez;Angel Rios-Utrera;Moises Montano-Bermudez
Animal Bioscience
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v.36
no.5
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pp.704-709
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2023
Objective: In tropical, subtropical and arid zones, heat stress is the main cause of productivity reduction in cattle. When climate stressors occur, animals become thermal adapted through differential expression of some genes, including heat shock proteins (HSP) family. The aim of this study was to determine levels of expression of HSP60, HSP70, and HSP90 genes in Simmental cattle raised in tropical environments of Mexico. Methods: In this study, expression of HSP60, HSP70, and HSP90 genes was analyzed in 116 Simmental cattle from three farms with tropical climate located in western Mexico. Animals were sampled twice a day, in the morning and noon. Gene expression was evaluated by quantitative polymerase chain reaction using probes marked with fluorescence. The MIXED procedure of SAS with repeated measures was used for all statistical analysis. Results: HSP60 gene expression differences were found for sex (p = 0.0349). HSP70 gene differences were detected for sampling hour (p = 0.0042), farm (p<0.0001), sex (p = 0.0476), and the interaction sampling hour×farm (p = 0.0002). Gene expression differences for HSP90 were observed for farm (p<0.0001) and year (p = 0.0521). HSP70 gene showed to be a better marker of heat stress than HSP60 and HSP90 genes. Conclusion: Expression of HSP70 gene in Simmental herds of the tropical region of western México was different during early morning and noon, but the expression of the HSP60 and HSP90 genes was similar. Identification of resilient animals to heat stress will be useful in the genetic improvement of the Simmental breed.
Lee Geun-Soo;Kim Jin-Wha;Lee Chun-Il;Pyo Hyeong-Bae;Lee Kong-Joo
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.30
no.4
s.48
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pp.471-477
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2004
Exposure to elevated temperatures, chemical (active oxigen), or physical stress (UV light) induces immediate physiological response, the expression of heat shock proteins in cells. Thus, cells with elevated Heat Shock Protein levels become more tolerant to stress conditions that are otherwise lethal. First, we studied on the new function of glucuronic acid (GA) as preventive material of skin aging. The application of the GA shows significant induction of Heat Shock Protein 70 kDa (HSP 70 kDa) in contrast to cells without it. GA at the concentration which can induce HSP 70 kDa, protects the cell death induced by second stress (heat shock and hydrogen peroxide) in NIH3T3 cells. Second, we studied on in vitro transdermal permeation characteristic of GA through the excised mouse skin. In this study, we compared the skin permeability of GA in water with O/W emulsion. As a result, skin permeation parameters of GA shows lag time 1.2 h, partition coefficient 0.114, permeation flult rate $0.83114 mg/cm^2/h.$ In case of lag time, O/W emulsion containing GA increase 2.48 h. Also, the total accumulation permeation content decreased in contrast to GA solution after 24 h. But it has long-term permeability of glucuronic acid. These results suggest that glucuronic acid could be a good cosmetic active ingredient.
Park, Y.J;S.J Song;J.T Do;B.S Yoon;Kim, A.J;K.S Chung;Lee, H.T
Proceedings of the Korean Society of Embryo Transfer Conference
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2002.11a
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pp.78-78
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2002
The role of heat shock proteins in shielding organism from environmental stress is illustrated by the large-scale synthesis of these protein by the organism studied to date. However, recent evidence also suggests an important role for heat shock protein in fertilization and early development of mammalian embryos. Effects of elevated in vitro temperature on in vitro produced bovine embryos were analysed in order to determine its impact on the expression of heat shock protein 70 (HSP70) by control and frozen-thawed after in vitro fertilization (IVF) or nuclear transfer (NT). The objective of this study was to assess the developmental potential in vitro produced embryos with using of the various containers and examined expression and localization of heat shock protein 70 after it's frozen -thawed. For the vitrification, in vitro produced embryos at 2 cell, 8 cell and blastocysts stage after IVF and NT were exposed the ethylene glycol 5.5 M freezing solution (EG 5.5) for 30 sec, loaded on each containers such EM grid, straw and cryo-loop and then immediately plunged into liquid nitrogen. Thawed embryos were serially diluted in sucrose solution, each for 1 min, and cultured in CRI-aa medium. Survival rates of the vitrification production were assessed by re-expanded, hatched blastocysts. There were no differences in the survival rates of IVF using EM grid, cryo-loop. However, survival rates by straw were relatively lower than other containers. Only, nuclear transferred embryos survived by using cryo-loop. After IVF or NT, in vitro matured bovine embryos 2 cell, 8 cell and blastocysts subjected to control and thawed conditions were analysed by semiquantitive reverse transcription polymerase chain reaction methods for hsp 70 mRNA expression. Results revealed the expression of hsp 70 mRNA were higher thawed embryos than control embryos. Immunocytochemistry used to localization the hsp70 protein in embryos. Two, 8-cell embryos derived under control condition was evenly distributed in the cytoplasm but appeared as aggregates in some embryos exposed frozen-thawed. However, under control condition, blastocysts displayed aggregate signal while Hsp70 in frozen-thawed blastocysts appeared to be more uniform in distribution.
Kim, Sang-Seop;Ku, Kyung-Hyung;Jeong, Moon-Cheol;Hong, Joo-Heon;Chung, Shin-Kyo
Food Science and Preservation
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v.21
no.6
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pp.776-783
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2014
Kimchi cabbages were cut ($3{\times}3cm$), and were pre-heat treated at $40^{\circ}C$, and their physicochemical qualities and browning degrees were investigated during 8 weeks storage at $5^{\circ}C$. The Cut kimchi cabbages were treated at $40^{\circ}C$ (1~8 hrs) and their protein bands profiles were determined by sodium dodecyl sulfate polyacrylamide electrophoresis (SDS-PAGE). The 60, 39, 33, and 12 kDa bands considered heat shock proteins (HSPs) were expressed in the cut kimchi cabbage, and the 4-hr pre-heat treatment (HS 4) exhibited the strongest band ratio. The weight ratios and titratable acidities of the pre-heat treated cut kimchi cabbages were not changed so much after 8 weeks storage at $5^{\circ}C$, and the soluble solid contents of HS 4 decreased less than that of any other treatments. The browning degree of HS 4 after 8 week storage was also shown to be the least among the treatments. The polyphenol oxidase (PPO) activities of all treatments slightly rose during the over all storage period, in contrast with the decrease of total phenolic contents. The expression of HSPs was identified in the pre-heat treated cut kimchi cabbages, and HS 4 exhibited the best quality and appearance after 8 weeks storage at $5^{\circ}C$.
Choi, Dong Wook;Lim, Man Sup;Lee, Jae Won;Chun, Wanjoo;Lee, Sang Hyuk;Nam, Yang Hoon;Park, Jin Myung;Choi, Dae Hee;Kang, Chang Don;Lee, Sung Joon;Park, Sung Chul
Biomolecules & Therapeutics
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v.23
no.2
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pp.128-133
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2015
Although coffee is known to have antioxidant, anti-inflammatory, and antitumor properties, there have been few reports about the effect and mechanism of coffee compounds in colorectal cancer. Heat shock proteins (HSPs) are molecular chaperones that prevent cell death. Their expression is significantly elevated in many tumors and is accompanied by increased cell proliferation, metastasis and poor response to chemotherapy. In this study, we investigated the cytotoxicity of four bioactive compounds in coffee, namely, caffeine, caffeic acid, chlorogenic acid, and kahweol, in HT-29 human colon adenocarcinoma cells. Only kahweol showed significant cytotoxicity. Specifically, kahweol increased the expression of caspase-3, a pro-apoptotic factor, and decreased the expression of anti-apoptotic factors, such as Bcl-2 and phosphorylated Akt. In addition, kahweol significantly attenuated the expression of HSP70. Inhibition of HSP70 activity with triptolide increased kahweol-induced cytotoxicity. In contrast, overexpression of HSP70 significantly reduced kahweol-induced cell death. Taken together, these results demonstrate that kahweol inhibits colorectal tumor cell growth by promoting apoptosis and suppressing HSP70 expression.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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