Tea flavonoids and polyphenols are well known for their extraordinary antioxidant activity which is considered important for anti-aging processes in animals. This study evaluated the anti-wrinkle effects of three different kinds of tea (Camellia sinensis) water extracts (CSWEs) including green, white, and black teas using a photoaged hairless mouse model. Data showed that the CSWE-treatment greatly improved skin conditions of mice suffering from UVB-induced photoaging, based on the parameters including the skin erythema index, moisture capacity, and transepidermal water loss. In addition, the wrinkle measurement and image analysis of skin replicas indicated that CSWEs remarkably inhibited wrinkle formation. In histological examination, the CSWE-treated mice exhibited diminished epidermal thickness and increased collagen and elastic fiber content, key signatures for skin restoration. Furthermore, the reduced expression of MMP-3, a collagen-degradative enzyme, was observed in the skin of CSWE-treated animals. Interestingly, comparative data between green, white, and black tea indicated that the anti-wrinkle activity of white tea and black tea is equally greater than that of green tea. Taken together, these data clearly demonstrated that CSWEs could be used as an effective anti-wrinkle agent in photoaged animal skin, implying their extended uses in therapeutics.
To investigate the feasibility of developing a new tenoxicam plaster, the effects of vehicles and penetration enhancers on the in vitro permeation of tenoxicam from a pressure-sensititre adhesive (PSA) matrices across the dorsal hairless mouse skin were studied. Vehicles employed in this study were propylene glycol (PC)-oleyl alcohol (OAI), PG-oleic acid (OA), and diethylene glycol monoethyl ether (DCMI)-propylene glycol monolaurate (PCML) cosolvents with/without fatty acids. In this studys amines such as triethanolamine (TEA) and tromethamine (TM) were additionally used as a solubilized. Among PSAs used, $Duro-Tak^{\circledR}$87-2510 showed much higher release rate than either $Duro-Tak^{\circledR}$ 87-2100 or $Duro-Tak^{\circledR}$87-2196. The relatively high flux rate was obtained with the formulation of DCMI-PCML (40:60, v/v) with 3% OA and 5% TM, and the flux increased as a function of the dose;the initial flux up to 12 h was $4.98{\pm}1.38{\;}{\mu\textrm{g}}/{\textrm{cm}^2}/h$ at the tenoxicam dose of $50{\;} mg/70{\;}{\textrm{cm}^2}$. This flux was much higher than that of a commercial piroxicam patch ($Trast^{\circledR}$) ($1.24{\pm}0.73{\;}{\mu\textrm{g}}/$\textrm{cm}^2/hr$) with almost only one-third that of the commercial patch. Therefore, these observations indicated that these composition of tenoxicam plaster may be practically applicable.
To investigate the feasibility of developing a new quercetin transdermal system, a preformulation study was carried out. Therefore, the effects of vehicles and pressure-sensitive adhesives (PSA) on the in vitro permeation of quercetin across dorsal hairless mouse skin were studied. Among vehicles used, propylene glycol monocaprylate (PGMC) and propylene glycol mono-laurate were found to have relatively high permeation flux from solution formulation (i.e., the permeation fluxes were 17.25$\pm$1.96 and 9.60$\pm$3.87 $\mu\textrm{g}$/$\textrm{cm}^2$/h, respectively). The release rate from PSA formulations followed a matrix-controlled diffusion model and was mainly affected by the amount of PSA and drug loaded. The overall permeation fluxes from PSA formulations were less than 0.30 $\mu\textrm{g}$/$\textrm{cm}^2$/h, which were significantly lower compared to those obtained from solution formulations. The lower permeation fluxes may be due to the decrease of solubility and diffusivity of quercetin in the PSA layer, considering the fact that the highest flux of 0.26 $\mu\textrm{g}$/$\textrm{cm}^2$/h was obtained with the addition of 0.2% butylated hydroxyanisole in PGMC-diethyl-ene glycol monoethyl ether co-solvents (80-85 : 15-20, v/v). Taken together, these observations indicate that improvement in the solubility and diffusivity of quercetin is necessary to realize fully the clinically applicable transdermal delivery system for the drug.
To investigate the feasibility of developing a new ondansetron transdermal system, the effects of vehicles and penetration enhancers on the in vitro permeation of ondansetron hydrochloride (OS) from a pressure-sensitive adhesive (PSA) matrices across dorsal hairless mouse skin were studied. Vehicles employed in this study consisted of various ratios of propylene glycol monocaprylate (PGMC)-diethylene glycol monoethyl ether (DGME) co-solvents and PGMC-propylene glycol (PG) co-solvents with 3% oleic acid. $Duro-Tak^\circledR$ 87-2100 and $Duro-Tak^\circledR$ 87-2196 were used as PSAs. The concentration of DGME in PGMC-DGME co-solvent system affected the release rate; as the concentration of DGME increased, the release rate decreased. The cumulative release amount of OS increased as the ratio of PSA to drug solution decreased. The permeation flux was also primarily affected by the amount of PSAs; as the amount decreased, the permeation flux increased. The overall fluxes from matrix formulations were significantly lower when compared to those obtained from solution formulations. The ratio of PG to PGMC did not affect permeation flux, while the lag time decreased significantly from $5.14\pm3.31 to 0.31\pm0.12$ h as the PG increased from 40% to 60%.
Kojic acid, antimelanogenic agent, has been widely used in cosmetics to lighten the skin color. However, it has skin irritancy and instability against pH, temperature and light. To overcome these problems and optimize the molecular structure of kojic acid (KA), a prodrug, kojic acid monostearate(KMS), has been synthesized to modify the topical drug delivery in the point of sustained release of the parent drug via enzymatic hydrolysis during skin absorption. The prodrug was tested for enzymatic hydrolysis with cytosolic fraction of hairless mouse, skin. From the in vitro skin permeation study through hairless mouse skin, we found that KMS was retained in the skin and generated KA continuously by the skin esterase cleavage. In addition, topical formulations of o/w type creams and polyolprepolymer-containing cream were further tested for whitening effects using in vivo yellow skin guinea pig model.
Kim, J. M.;Y. S. Sohn;K. K. Kang;Lee, E. D.;Lee, M. Y.;B. O. Ahn;Lee, J. H.;J. W. Kwon;Kim, W. B.
대한화장품학회:학술대회논문집
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대한화장품학회 2003년도 IFSCC Conference Proceeding Book I
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pp.698-699
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2003
DA-3711 is a novel, anti wrinkle agent containing growth factors derived from human skin culture. In this study, effect of topical application of DA-3711 on chronic ultraviolet B (UVB)-induced skin damage was evaluated in hairless mice model. Exposure to UVB for 8 weeks induced apparent wrinkles on the back skin of the mice. The dorsal surfaces were exposed to UVB for a further 8 weeks, during which the surfaces where treated daily by topically application of a lotion containing either 35% or 70% of DA-3711. For comparison, lotion base, lotion base containing Cylasphere Retinol(equation omitted) (2500 I.U., Coletica) and NouriCe $l^{(R)}$ (Biozhem) were applied topically once a day for 8 weeks.(omitted))
본 연구를 통하여 피부 미용 소재로 알려져 있는 콜라겐 펩타이드를 섭취한 후 혈중에 나타나는 소화분해산물 중 콜라겐 특유의 아미노산인 hydroxyproline과 이것의 dipeptide 형태인 Pro-Hyp이 피부에 미치는 영향을 알아보고자 하였다. 피부 미용 소재를 경구 섭취하는 사람의 피부는 광노화 및 자연노화가 어느 정도 진행된 상태이므로, 이와 유사한 조건을 조성하기 위해 경구 투여를 시작하기 전에 hairless mouse에 7주간 주 3회 UV를 조사하여 주름을 선유발시켰다. 군 분리를 시킨 후 7주간 경구로 실험물질을 주 5회 반복 투여하면서, 주 3회 UV 조사를 병행하였으며, 시험 기간 중 임상증상, 체중변화를 관찰하였고, 3회 (0,4. 7주차) 피부주형을 채취하여 영상 분석을 실시하였으며, 2회 (0,7 주차)의 피부탄력측정 및 1회(7주차)의 TEWL측정을 병행하였다. 실험종료 후 피부조직의 병리조직학적 검사(H&E, Masson-Trichrome stain) 및 피부두께 측정을 실시하였다. 실험기간 중 이상 임상증상을 보이거나 사망한 개체는 없었으며, 체중에 대한 통계적으로 유의한 변화는 관찰할 수 없었다. 피부 육안관찰 시 NC군에 비해 UC군의 피부 주름 증가가 뚜렷하였으며, 시험군들은 UC군에 비해 주름 증가가 적었다. 경구 투여 0, 4, 7주차에 제작된 replica의 주름 지표를 통계 처리한 결과, UV/H군과 UV/P군은 DC군에 비해 감소경향은 보였으나 유의적인 차이는 없었다. 탄력측정검사 결과 UV를 쬐지 않은 NC군은 UC군에 비해 UA/UF, Ur/Ue, Ur/Uf 지표에서 유의적인 증가를 보였다. UV/H군과 UV/P군은 모두 0, 7주차 모두 유의적인 차이를 보이지 않았다. 피부 보습력 측정 결과 NC군 및 모든 실험군에서 UC군에 비해 유의적인 TEWL 감소를 관찰할 수 있었다. 피부 두께의 경우 NC군, UV/H군, UV/P군은 UC군에 비해 피부 두께가 유의적으로 감소하였다. 진피층에서의 교원질 확인을 위해 실시한 Masson-Trichrome stain의 경우 UC군에서는 상부 진피층에서의 염색상 소실이 관찰되었으나, 모든 실험군에서 진피층 손상이 거의 관찰되지 않아 실험물질에 의한 회복을 확인 할 수 있었다. 이상의 실험 결과 hydroxyproline, Pro-Hyp의 경구반복투여시 자외선에 의해 광노화가 유발된 피부에 보습 효과, 피부 두께 감소 효과, 진피층 손상 회복 효과를 유의적으로 확인할 수 있었으며, 단, 피부 주름 개선 정도는 통계적 유의성은 없이 경향성만을 확인할 수 있었다. Hydroxyproline과 이를 함유하는 dipeptide 형태의 Pro-Hyp를 경구 투여한 시험으로부터 확인한 피부 보습 및 진피층 회복 효과는 이 물질들이 유래된 콜라겐을 도포 또는 섭취했을 때 피부에 나타날 수 있는 작용들과 상통하며, 단독 미용 소재로도 활용될 수 있는 가능성을 보여주었다. 본 연구에서는 콜라겐 펩타이드를 섭취 시 체내에 흡수되어 혈액을 통해 각 조직에 운반되는 분해 산물이 피부에 미치는 영향을 동물 시험을 통해 살펴보았는데, 향후 연구에서는 관절, 혈관과 같은 다른 생체 조직들에 미치는 영향에 대해서도 검증해 볼 필요가 있다.
무모쥐의 등에 애엽 추출물과 아스코르브산 함유 스킨로션을 도포하고 자외선을 조사하여 애엽 추출물과 아스코르브산의 주름 개선 효과를 알아보았다. 애엽 추출물 도포군의 피부조직 두께는 대조군에 비해 $12.5{\sim}21.4%$의 유의적인 감소 효과를 보였다. 표면 거칠기 측정기에 의한 피부 주름의 형성 정도를 측정하는 지표인 Ra값은 ME-1.0, ME-2.0과 ME-5.0 도포군에서 $23.7{\sim}31.1%$로 유의적으로 감소하였고 (p<0.01), Rq치는 ME-1.0, ME-2.0와 ME-5.0에서 $11.2{\sim}21.2%$, Rz의 측정치에서는 ME-1.0(19.8%), ME-2.0(22.1%), ME-5.0(24.5%) 그룹에서 대조군에 비해 크게 감소하였다. Rt치는 ME-1.0, ME-2.0와 ME-5.0 그룹에서 농도 증가에 따라 14.2%에서 22.7%의 유의적인 감소효과가 있었다. 아스코르브산 도포그룹은 애엽과 비슷한 감소효과를 보여주었지만, 애엽의 주름 개선효과에는 미치지 못하였다. MMP-1 활성은 애엽 메탄올 추출물 그룹에서 $19.3%{\sim}22.6%$까지 감소하였고, 콜라겐의 생성은 ME-2.0과 ME-5.0그룹에서 10% 정도의 유의적인 증가 효과가 있었다. 이처럼 애엽 메탄올 추출물은 피부의 광손상에 대한 피부 보호 및 피부의 주름 개선효과가 탁월하고, 또한 강력한 항산화제인 아스코르브산보다 그 효과가 우수하여 피부노화 현상과 주름 개선을 위한 기능성 화장품 소재로 이용가치가 있을 것으로 여겨진다.
최근 연구에서 잠재적 피부 색소침착 경감제로서 파라-쿠마린산(PCA)의 주목되는 특성이 발견되었다. 본 연구의 목적은 이 물질의 자외선 차단 효과를 탐구하는 것이다. 자외선에 노출된 HaCaT 세포의 생존율에 대한 PCA의 영향을 in vitro에서 조사하고, 자외선 흡수 스펙트럼이 유사한 방향성 아미노산 대사물들의 작용과 비교하였다. In vivo시험으로는 PCA 크림(1.5 %)과 크림 베이스를 SKH-1 무모 쥐의 등 피부에 도포하고 UVB에 의한 염증 반응으로 나타나는 피부색(홍반) 및 두께 변화(부종)를 측정하였다. 크림 도포-자외선 조사는 2일 간격으로 총 12회 반복하였다. HaCaT 세포를 UVB에 노출시켰을 때 광량 의존적으로 세포 생존율이 감소하였다. 자외선 노출(10 mJ $cm^{-2}$)에 의한 세포 생존율감소는 100 ${\mu}M$의 PCA, cinnamic acid, urocanic acid, 그리고 indole acrylic acid에 의해 각각 39, 27, 39, 31 %가 억제되었다. 무모 쥐의 등 부위에 도포된 PCA크림(10 ${\mu}g\;cm^{-2}$)은 자외선(150 mJ $cm^{-2}$)-노출 피부의 색 지수, 즉 $L^*$, $a^*$ 및 $b^*$ 값, 그리고 두께의 변화를 각각 59, 50, 58, 53 %씩 억제하였다. 본 연구의 결과는 PCA의 멜라닌 생성 억제 작용을 밝힌 선행 연구와 함께 PCA가 자외선에 노출된 피부의 색소 이상 침착과 염증 반응을 막아줄 수 있음을 시사하였다.
녹차의 주요 성분인 catechin은 항돌연변이, 항종양, 항균, 항바이러스 활성 및 콜레스테를 저하, 혈압 상승 억제, 해독, 방사선 차단 작용 등과 같은 다양한 생물학적 작용들이 보고되고 있다. 최근 환경 오염의 급증으로 인한 오존층의 파괴로 지표에 도달하는 자외선이 증가됨에 따라 피부노출 위험이 증가하고 있다. 따라서 피부암의 발생이 증가하는 추세이며 역학적 및 실험실적 연구에서 자외선 조사가 가장 큰 원인이라고 보고되고 있다. 이에 본 연구는 catechin이 UVB에 의해서 손상된 피부조직에 미치는 영향을 연구하였고 광발암과정에서 catechin의 억제효과가 apoptosis에 어떤 영향을 주어 작용하는지를 in vivo hairless mouse skin에서 연구하였다. 녹차잎에서 추출한 catechin을 hairless mouse를 대조군, catechin을 처리한 군, 자외선을 처리한 군, catechin과 자외선을 처리한 군으로 나누었으며 catechin의 농도는 3mg/mouse로 피부에 도포한 후 자외선을 100 mJ/$ extrm{cm}^2$ 조사하였다. 자외선에 의한 피부조직에 미치는 catechin의 영향을 H&E stain을 실시하여 확인하였고, apoptosis에 미치는 catechin의 보호효과를 알아보기 위해 DNA laddering 형성 여부와 TUNEL assay로 확인하였으며 western blot을 이용하여 apoptoic activity와 관련된 단백질인 p53연구하였다. 또한 자외선에 의한 세포증식에 미치는 catechin을 영향을 bromodeoxyuridine(BrdU) 면역염색방법을 이용하여 살펴보았다. 본 연구결과 자외선에 의하여 피부는 진피층의 교원섬유의 증가가 정상피부보다 2~3배 비후되었고, 염증세포의 침윤과 섬유화세포 등이 관탈되었으며 표피층은 두꺼워졌으나 상피세포가 소실되어 1~2층으로 되었다. UVB조사와 catechin을 2주간 처리한 후의 mouse의 피부는 표피층이 9~12층으로 이루어져 있었고, 세포의 핵은 과염색성을 보이며 커져있어 손상된 표피층 상피세포가 재생되고 있음을 확인하였다. Apoptosis에 미치는 결과에서 UVB 조사군은 apoptosis의 대표적 특징인 DNA fragmentation이 관찰되었고, UVB와 catechin을 처리한 군에서는 생성되지 않아 뚜렷한 보호효과를 나타내었다. TUNEL assay를 실시한 결과 UVB군과 catechin 군을 비교하였을 때 UVB+catechin군에서 apoptotic cells이 유의성 있는 차이(p<0.05)를 보였다. Apoptosis 관련 단백질인 p53발현을 살펴본 결과 대조군과 비교해볼 때 UVB군과 UVB와 catechin을 처리한 군간에서는 차이가 없었다. 자외선에 의한 세포증식에 미치는 catechin의 영향을 살펴본 결과 BrdU에서는 UVB군과 UVB+catechin군을 비교하였을 때 UVB+catechin군에서 BrdU 세포수가 유의성 있는(p<0.05) 감소를 보였다. 본 연구 결과에 의해 녹차의 주요성분인 catechin은 자외선에 의해 유도되는 세포증식 및 apoptosis를 억제하고, 세포손상, 세포증식 및 apoptosis를 억제시킴을 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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