A number of health benefits have been claimed for probiotic bacteria such as Bifidobacterium (B) spp. Lactobacillus(L) acidophilus, and Lactococcus(Lc) cremoris. Viability of probiotic bacteria is important in order to provide health benefits. Only a limited culture media for the test purpose of probiotic bacteria are commercially available (MRS broth), but the media for large-scale propagation of viable cells which are able to be used as food additive are not available. The manufacture of a low priced and preferred novel medium for probiotic bacteria was therefore, attempted using whey protein concentrate(WPC) and Makgeolli sludge as a starting material. The effect of WPC and Makgeolli sludge on the growth of four strains (B. bifidum 15696, B. longum 15707, L. acidophilus CH-2, and Lc. cremoris 20076) was investigated. Medium prepared such as WPC, Makgeolli sludge, and WPC+Makgeolli sludge(WPCMs). It was observed that the growth of 4 strains (B. bifidum 15696, B. longum 15707, L. acidophilus CH-2, and Lc. cremoris 20076) was stimulated by Makgeolli sludge, WPC, WPCMs. Especially, Viable cell number of 4 strains in the WPCMs were higher than that of the single media. These result suggest the possibility that Makgeolli and WPC, acts as a growth factor for the growth of probiotic bacteria.
Effects of dietary nutrient content on the biological index and serum chemistry of olive flounder Paralichthys olivaceus achieving compensatory growth were investigated. Six treatments were prepared in triplicate. Fish were hand-fed with the control (C) diet twice daily for 8 weeks (8W-C) or fish were starved for 2 weeks and then hand-fed with the C, high protein (HP), high carbohydrate (HC), high lipid (HL), or intermediate protein, carbohydrate and lipid (IPCL) diets for 6 weeks, referred to as 6W-C, 6W-HP, 6W-HC, 6W-HL, and 6W-IPCL, respectively. Weight gain of fish in the 8W-C, 6W-HP, and 6W-IPCL treatments was higher than that of fish in the 6W-C treatment. Condition factor (CF) of the fish in the 6W-HP, 6W-HC and 6W-IPCL treatments was higher than that of fish in the 8W-C and 6W-C treatments. The hepatosomatic index (HSI) of fish in the 6W-HC, 6W-HL and 6W-IPCL treatments was higher than that of the fish in the 8W-C, 6W-C and 6W-HP treatments. Serum chemistry except triiodothyronine ($T_3$) was not significantly different among the treatments. In conclusion, CF and HSI of the fish could be indices reflecting compensatory growth, whereas $T_3$ seemed to play a partial role in achieving compensatory growth.
Insulin-like growth factor-binding protein-5 (IGFBP-5) is one of the six members of IGFBP family, important for cell growth, apoptosis and other IGF-stimulated signaling pathways. In order to explore the significance of IGFBP-5 in cells of the Inner Mongolian Cashmere goat (Capra hircus), IGFBP-5 gene complementary DNA (cDNA) was amplified by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) from the animal's fetal fibroblasts and tissue-specific expression analysis was performed by semi-quantitative RT-PCR. The gene is 816 base pairs (bp) in length and includes the complete open reading frame, encoding 271 amino acids (GenBank accession number JF720883). The full cDNA nucleotide sequence has a 99% identity with sheep, 98% with cattle and 95% with human. The amino acids sequence shares identity with 99%, 99% and 99%, respectively. The bioinformatics analysis showed that IGFBP-5 has an insulin growth factor-binding protein homologues (IB) domain and a thyroglobulin type-1 (TY) domain, four protein kinase C phosphorylation sites, five casein kinase II phosphorylation sites, three prenyl group binding sites (CaaX box). The IGFBP-5 gene was expressed in all the tested tissues including testis, brain, liver, lung, mammary gland, spleen, and kidney, suggesting that IGFBP-5 plays an important role in goat cells.
Yim, Hyung Eun;Yoo, Kee Hwan;Bae, Eun Soo;Hong, Young Sook;Lee, Joo Won
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.59
no.1
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pp.8-15
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2016
Purpose: Nephrogenesis is normally accompanied by a tightly regulated and efficient vascularization. We investigated the effect of angiotensin II inhibition on angiogenesis in the developing rat kidney. Methods: Newborn rat pups were treated with enalapril (30 mg/kg/day) or vehicle (control) for 7 days after birth. Renal histological changes were checked using Hematoxylin & Eosin staining. We also investigated the intrarenal expression of vascular endothelial growth factor (VEGF)-A, VEGF receptor 1 (VEGFR1), VEGFR2, platelet-derived growth factor (PDGF)-B, and PDGF receptor-${\beta}$ with Western blotting and immunohistochemical staining at postnatal day 8. Expression of the endothelial cell marker CD31 was examined to determine glomerular and peritubular capillary density. Results: Enalapril-treated rat kidneys showed disrupted tubules and vessels when compared with the control rat kidneys. In the enalapril-treated group, intrarenal VEGF-A protein expression was significantly higher, whereas VEGFR1 protein expression was lower than that in the control group (P<0.05). The expression of VEGFR2, PDGF-B, and PDGF receptor-${\beta}$ was not different between the 2 groups. The increased capillary CD31 expression on the western blots of enalapril-treated rat kidneys indicated that the total endothelial cell protein level was increased, while the cortical capillary density, assessed using CD31 immunohistochemical staining, was decreased. Conclusion: Impaired VEGF-VEGFR signaling and altered capillary repair may play a role in the deterioration of the kidney vasculature after blocking of angiotensin II during renal development.
Park, Beyoung Yun;Choi, Jong Woo;Kwark, Hyug Jun;Lee, Won Jai;Rah, Dong Kyun
Archives of Plastic Surgery
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v.32
no.3
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pp.347-356
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2005
The wound healing process in fetus is quite different form that of adult. Regeneration plays an important role and scarless wound healing is possible in early gestational fetal period. Recently, the various effects of the hypoxia and reoxygenation in the wound healing process have been investigated by many researchers. The hypoxic state is known to alter protein synthesis and gene expression of TGF-${\beta}$, VEGF. The authors hypothesize there may be differences between fetal and adult fibroblast and this difference may play a possible role in the mechanism of scarless fetal wound healing. In this study, we investigated the growth of fibroblast, the amount of collagen deposition, the amount of protein synthesis and gene expression in TGF-${\beta}$(transforming growth factor-${\beta}$), VEGF(vascular endothelial growth factor) under the various hypoxic and reoxygenation conditions. Through these processes, we tried to determine the relationships between scarless fetal wound healing and hypoxic condition. In control group, fetal and adult fibroblasts were cultured under normoxic condition. The experimental groups were allocated into four different groups. The differences in TGF-beta, VEGF under 24, 48, 72 hours were statistically investigated. Compared to adult fibroblast group, there was a statistically significant increase (p<0.01) in the rates of protein synthesis in TGF-beta and VEGF of fetal fibroblast. In this study, these results may reflect the possibility that fetal fibroblast are more susceptible to change in oxygen and has a superior rate of angiogenesis through increased VEGF expression. The possible superiority of angiogenesis in fetal fibroblast may play an important role in scarless wound healing.
The imprinted tumour suppressor NOEY2 is downregulated in various cancer types, including ovarian cancers. Recent data suggest that NOEY2 plays an essential role in regulating the cell cycle, angiogenesis and autophagy in tumorigenesis. However, its detailed molecular function and mechanisms in ovarian tumours remain unclear. In this report, we initially demonstrated the inhibitory effect of NOEY2 on tumour growth by utilising a xenograft tumour model. NOEY2 attenuated the cell growth approximately fourfold and significantly reduced tumour vascularity. NOEY2 inhibited the phosphorylation of the signalling components downstream of phosphatidylinositol-3'-kinase (PI3K), including phosphoinositide-dependent protein kinase 1 (PDK-1), tuberous sclerosis complex 2 (TSC-2) and p70 ribosomal protein S6 kinase (p70S6K), during ovarian tumour progression via direct binding to vascular endothelial growth factor receptor-2 (VEGFR-2). Particularly, the N-terminal domain of NOEY2 (NOEY2-N) had a potent anti-angiogenic activity and dramatically downregulated VEGF and hypoxia-inducible factor-1α (HIF-1α), key regulators of angiogenesis. Since no X-ray or nuclear magnetic resonance structures is available for NOEY2, we constructed the three-dimensional structure of this protein via molecular modelling methods, such as homology modelling and molecular dynamic simulations. Thereby, Lys15 and Arg16 appeared as key residues in the N-terminal domain. We also found that NOEY2-N acts as a potent inhibitor of tumorigenesis and angiogenesis. These findings provide convincing evidence that NOEY2-N regulates endothelial cell function and angiogenesis by interrupting the VEGFR-2/PDK-1/GSK-3β signal transduction and thus strongly suggest that NOEY2-N might serve as a novel anti-tumour and anti-angiogenic agent against many diseases, including ovarian cancer.
Current acceptable methods For promotin gperiodontal regeneration are base on removal of diseased soft tissue, root treatment, guided tissue regeneration, inteoduction of new graft materials and biological mediators. Platelet-derived growth factor(PDGF) is one of polypeptide growth factor. PDGF has been reported as a biological mediator which regulates activities of wound healing process including the cell proliferation, migration and metabolism. The purposes of this study is to evaluate the effects of PDGF-AA, BB on the periodontal ligament cells to use as a regeneration promoting agent of periodontal tissue. Human periodontal ligament cells were prepared from the first premolar tooth extracted for the orthodontic treatment and were cultured in DMEM/10% FBS at the $37^{\circ}C$, 5% $CO_2$ incubator. Author measured the DNA synthesis, total protein, collagen and noncollagenous protein synthesis and alkaline phosphatase activity according to the concentration of PDGF-AA and BB(0, 0.1, 1, 10, 100ng/ml). The results were as follows : The DNA synthetic activity was increased dose dependently by PDGF-AA and BB. The maximum mitogenic effect was at the 100ng/ml of PDGF-AA and 10ng/ml of PDGF-BB. The total protein, collagen and noncollagen systhesis was increased dose dependently by PDGF-AA and BB. The % of collagen was slightly decresed according to the concentration of PDGF-AA and BB. The effect of PDGF-AA and BB were not specific for collagen synthesis since it also increased noncollagenous protein synthesis. The effect of PDGF-AA and BB on alkaline phosphatase activity did not show any significant, meanwhile the alkaline phosphatase activity of 14 days group showed significnat increase. In conclusion, PDGF-AA and BB may have important roles in stimulation of DNA synthesis in human periodontal ligament cells, which means an increase in collagen-synthesizing cells, and may be useful for clinical application in periodontal regenerative procedures.
Kim, Chung-hui;Kim, Jong-shu;Cuong, Dang Van;Kim, Na-ri;Kim, Eui-yong;Han, Jin
Korean Journal of Veterinary Research
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v.43
no.2
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pp.211-218
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2003
Human ovarian cancerous cells survive in a way that they trigger the nucleotide excision repair (NER) or double-strand DNA repair (dsDNA) repair mechanism to show resistance to anticancer drugs and activate many kinds of repair protein, thus removing damaged DNAs. Two experiments on the PA-1 human ovarian teratocareinoma cell line that hardly has any expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) were conducted in the study; first, EGF-R was transfected and its receptor was obtained. The receptor was investigated in terms of its mutual relations with many kinds of protein concerning NER or dsDNA repair. Second, it was examined what kind impact cisplatin and adriamycin had on the effects of EGF-R over the PA-1 cell line lacking EGF-R. When being administered with cisplatin and adriamycin, Hey and Hey C2 cell lines showed a high level of resistance while PA-1 cell line a high level of sensitivity. Hey and Hey C2 cell lines that are resistant against anticancer drugs exhibited a high level of EGF-R expression while PA-1 cell line that is sensitive to them did a much lower level of the expression. When PA-1 cell line was transfected for the expression of DNA adduct and EGF-R, it showed a higher level of resistance compared to the control group. There was no difference in the expression of DNA repair proteins (DNA- dependent protein kinase, Ku70, and Ku80) between Hey and the PA-1 cell lines. The results indicate that the Hey cell line that is resistant against cisplatin and adriamycin works along the signaling system responding to the changes of EGF-R while the PA-1 cell line that is sensitive to both of them does to the lack of EGF-R.
Acid-labile subunit(ALS) is a 85-kDa glycosylated plasma protein which forms a 150-kDa ternary complex with 7.5-kDa insulin-like growth factor(IGF) and 40~45-kDa IGF-binding protein-3. In a previous study, the present authors prepared a porcine ALS(pALS) expression construct by inserting a pALS coding sequence into a plasmid vector following synthesis of the sequence by reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR). The expression construct, however, was subsequently found to have a mis-sense mutation at two bases of the pALS coding sequence which is presumed to have occurred through a PCR error. In the present study, the correct coding sequence was synthesized by the site-directed mutagenesis and inserted into the pET-28a(+) plasmid expression vector containing the His-tag sequence flanking the last codon of the insert DNA. After induction of the expression construct in E. coli BL21(DE3) cells, the resulting presumptive recombinant peptide was purified by the Ni-affinity chromatography. Upon SDS- PAGE, the affinity-purified peptide was resolved as a single band at a 66-kDa position which is consistent with the expected molecular mass of the presumptive recombinant pALS. Collectively, results indicate that a recombinant pALS peptide was successfully expressed and purified in the present study.
Objective : Angelica Gigas Nakai is a popular oriental medicine used for the treatment of vascular diseases. The aim of this study is to investigate neuroprotective effect of the water extract of Anelicae Gigantis Radix Palva (AG) in transient middle cerebral artery occlusion (tMCAO)-induced ischemic rats via the regulation of angiogenesis-related molecules. Methods : Sprague-Dawley rats were intraperitoneally administrated with AG water extract at doses of 10, 25, 50 mg/kg body weight after tMCAO (90 min occlusion). reperfusion for 24 hr infarction volumes were measured by 2,3,5-tetrazolium chloride (TTC) staining. Brain tissues were observed neuronal cell injuries by nissl staining, and also brain-blood barrier (BBB) permeability change by evans blue. Expression of vascular endothelial growth factor (VEGF), angiopoietin-1 (Ang-1) and Tie-2 receptor protein in brain tissues was determined by western blot. Results : AG water extract significantly reduced infarction volume in ischemic brains of rats, degradation of neuronal cell, BBB permeability and expression of VEGF protein dose-dependently. Ang-1 protein was increased dose-dependantly, not significantly. Conclusion : This study suggests that AG water extract shows neuroprotective effect by preventing BBB breakdown, with regulating angiogenesis factor VEGF and Ang-1.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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