• Applied Microscopy
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• 제32권2호
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• pp.131-147
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• 2002

살오징어와 서해낙지의 시엽은 피질부와 수질부로 크게 나눌 수 있었고, 피질부는 3층(외과립세포층, 망상층, 그리고 내과립세포층)으로 구성되어 있었다. 피질부의 두께는 오징어에서 약 $420{\sim}450{\mu}m$ (외과립층, $100{\mu}m$; 망상층, $170{\sim}200{\mu}m$ 그리고 내과립층, $150{\mu}m$) 정도였고 낙지인 경우는 약 $250{\sim}290{\mu}m$ (외과립세포층, $50{\sim}70{\mu}m$; 망상층, $100{\sim}120{\mu}m$; 내과립세포층, $100{\mu}m$) 정도로 관찰되어 오징어가 낙지에 비해 $170{\mu}m$ 정도 더 두터웠다. 살오징어의 외과립세포층에서는 3종류의 신경세포(A형, B형 그리고 C형)와 이들을 감싸거나 인접되어 있는 신경교세포들이 관찰되었고, 서해낙지에서는 2종류의 신경세포(A형과 B형)와 1종류의 신경교세포가 관찰되었다. 망상층에는 전연접자루와 신경말단들이 서로 연접되어 다양한 형태의 연접체를 형성하였는데, 살오징어에서는 전자밀도가 높은 소포, 과립소포, 그리고 투명소포 등이 혼재되어 있거나 한 종류만을 포함하는 경우 등 다양한 반면, 서해낙지에서는 투명소포만을 소지한 경우와 과립소포만을 소지한 경우, 그리고 투명소포와 과립소포들이 혼합된 경우 등 3종류의 연접체가 주로 관찰되었다. 내과립세포층은 구조적으로 두 종에서 거의 비슷한 형태이며 2종류의 신경세포(A형과 B형)와 1종류의 신경교세포로 구성되어 있었다. 살오징어의 수질부에서는 크기가 $7{\times}5{\mu}m$ 정도인 세포들이 일렬로 배열되어 있어 울타리세포층을 형성하였으나 서해낙지에서는 이들이 관찰되지 않았다.

• Applied Microscopy
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• 제32권3호
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• pp.247-255
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• 2002

두족류 Octopus minor와 Todarodes pacificus의 시엽내 신경전달물질을 분비하는 neuron의 특성 및 기능을 확인하기 위해 serotonin 및 somatostatin의 항체를 사용한 면역염색과 면역금표지법을 시행하였다. 면역염색 결과 항-somatostatin은 살오징어인 경우 항-serotonin 면역반응과 유사하게 나타났지만, 서해낙지에서는 외과립세포층의 큰 세포에서만 반응을 보였다. 항-serotonin을 이용한 면역금표지법은 살오징어인 경우 내과립세포층과 수질부의 신경세포에서는 세포질 $0.5{\mu}m^2$당 30개 정도의 금입자가 관찰되어 강한 반응을 보인 반면, 서해낙지에서는 17개 정도의 비교적 약한 반응을 보였다. 항-somatostatin에서는 살오징어의 외과립 및 내과립세포층 그리고 수질부의 반응된 세포의 세포질 $0.5{\mu}m^2$당 30개 정도의 금입자가 관찰되어 강한 반응을 보인 반면, 서해낙지의 외과립세포층의 세포에서는 3개 정도의 금입자만이 관찰되어 역시 약한 반응을 보였다. 이와 같이 시엽의 각 부위별 면역염색과 면역금표지법을 시행한 결과 2종류의 항체에 각각 양성반응을 보인 신경세포들이 두 종에서 다양하게 분포하고 있음을 확인했는데 특히 면역염색과 면역금표지법에 관한 반응외 정도를 비교하면 서해낙지에 비해 살오징어에서 비교적 강하게 나타났다.

• Applied Microscopy
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• 제36권2호
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• pp.83-91
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• 2006

신경연접은 다양한 생리적 또는 병적 상태에 반응하여 구조 및 수적 변화를 보이며, 신경연접의 밀도 변화는 신경세포의 활성 조절에 중요한 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 따라서 특정 생리적 또는 병적 상태에서 신경연접의 밀도 변화를 명확히 이해하기 위해서는 정확한 정량방법을 이용한 밀도 측정이 필수적이다. 본 연구에서는 physical disector법을 이용하여 흰쥐 뇌의 치아이랑에 위치하는 과립신경세포의 신경연접 수를 측정하였으며, 이를 통해 physical disector의 방법적 정확성을 확인하고자 하였다. 성체 흰쥐를 관류고정한 후 치아이랑의 연속 절편을 얻어 통상적인 전자현미경 시료제작법을 통해 Epon 혼합용액에 포매하였다. Physical disector법을 이용한 밀도 분석 시 연속절편의 정렬, 비교 및 disector frame이 필요하므로 Reconstruct 프로그램을 사용하였다. 동물 당 40장의 $1{\mu}m$ 연속절편을 제작하여 과립신경세포체의 밀도를 측정하였으며, 15장의 80nm연속절편으로부터 bidirectional disector법을 이용하여 과립신경세포와 내측 관통로(medial perforant path) 간 신경 연접의 밀도를 분석하였다. 과립신경세포의 세포체와 신경연접은 각각 과립층과 분자층에 위치하기 때문에 하나의 신경세포가 가지는 신경연접의 수를 측정하기 위해서는 각 층의 부피를 고려하는 것이 요구된다. 따라서 과립층에 대한 분자층의 부피비율을 측정하였다. 실험결과, 흰쥐 치아이랑에 위치하는 하나의 과립세포당 약 6,500개의 신경연접의 존재한다는 사실을 확인하였으며, 이는 다른 연구자들의 결과와 유사하였다. 본 연구로부터 physical disector법은 특정 생리적 또는 병적 조건에서 나타나는 신경세포 및 신경연접의 수적 변화를 정확히 측정할 수 있는 유용한 정량방법임을 알 수 있었다. 향후 physical disector법을 이용하여 다양한 실험동물모델의 신경연접 변화를 분석하는 것은 신경연접의 형태적 가소성을 이해하는데 이바지할 것으로 생각된다.

• Natural Product Sciences
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• 제10권6호
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• pp.289-295
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• 2004

Myristica fragrans seed from Myristica fragrans Houtt (Myristicaceae) has various pharmacological activities peripherally and centrally. The present study aims to investigate the effect of the methanol extract of Myristica fragrans seed (MF) on N-methyl-D-aspartate (NMDA)-induced neurotoxicity in primary cultured rat cerebellar granule neuron. MF, over a concentration range of 0.05 to $5\;{\mu}g/ml$, inhibited NMDA (1 mM)- induced neuronal cell death, which was measured by trypan blue exclusion test and 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay. MF $(0.5\;{\mu}g/ml)$ inhibited glutamate release into medium induced by NMDA (1 mM), which was measured by HPLC. Pretreatrnent of MF $(0.5\;{\mu}g/ml)$ inhibited NMDA (1 mM)-induced elevation of cytosolic calcium concentration $([Ca^{2+}]_c)$, which was measured by a fluorescent dye, Fura 2-AM, and generation of reactive oxygen species (ROS). These results suggest that MF prevents NMDA-induced neuronal cell damage in vitro.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제20권1호
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• pp.7-12
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• 1997

Glutamate uptake inhibitor, L-trans-pyrrolidine-2, 4-dicarboxylate (PDC, $20{\mu}M$) elevated basal and N-methyl-D-aspartate (NMDA, $100{\mu}M$)-induced extracellular glutamate accumulation, while it did not augment kainate $100{\mu}M$-induced glutamate accumulation in cultured cerebellar granule neurons. However, pretreatment with PDC for 1 h significantly reduced NMDA-induced glutamate accumulation, but did not affect kainate-induced response. Pretreatment with glutamate $(5{\mu}M)$ for 1 h also reduced NMDA-induced glutamate accumulation, but did not kainate-induced response. Upon a brief application (3-10 min), PDC did neither induce elevation of intracellular calcium concentration $([Ca^{2+}]_i)$ nor modulate NMDA-indLiced $[Ca^{2+}]_1$ elevation. Pretreatment with PDC for 1 h reduced NMDA-induced $[Ca^{2+}]_1$ elevation, but it did not reduce kainate-induced $[Ca^{2+}]_1$ elevation. These results suggest that glutamate concentration in synaptic clefts of neurana cells is increased by prolonged exposure (1 h) of the cells to PDC, and the accumulated glutamate subsequently induces selective desensitization of NMDA receptor.

• 생명과학회지
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• 제15권4호
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• pp.607-612
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• 2005

열충격단백질 70 (HSP70)은 복수유전자족으로서 통상적으로 표현되는 Hsc70와 스트레스에 의하여 유도되는 Hsp70가 있다. 포유동물의 신경계통에서는 상당한 량의 HSP70가 정상조건에서도 표현되는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 흰쥐의 소뇌 세포의 연접에서 Hsp70의 표현에 대한 연구를 하였다. 면역조직화학적으로 소뇌절편을 염색하여 관찰한 결과 Hsp70와 Hsc70 모두 표현되었는데, 소뇌 조롱박세포에서 가장 강하게 표현되었으며, 다음으로 소뇌 과립세포에서 강하게 표현되었다. 또한 깊은소뇌핵의 신경세포들도 강하게 염색되었다. 배양한 P1 소뇌신경 세포를 Hsp70 항체로 염색한 결과 Hsp70는 조롱박세포와 과립 세포에서 모두 표현되었으며, 세포체와 가지돌기를 따라 점박이를 형성하였다. 이들 점 박이들은 PSD95 점박이와 같이 위치하였다. 그리고 PSD 분획을 이용한 면역염색에서도 PSD70이 검출되었다. 본 연구결과는 Hsp70이 정상조건에서도 소뇌신경세포의 연접에 존재함을 의미한다.

• Applied Microscopy
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• 제47권1호
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• pp.8-12
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• 2017

The ultrastructures of the secretory acinar granules of submandibular and parotid salivary gland were examined in the Korean striped field mouse, Apodemus agraius. The acini of the submandibular salivary gland had serous and mucous acinar cells filled with numerous secretory granules. The serous acinar granules had uniformly fine dense contents and were round typed with a definite boundary between the granules. The mucous acinar granules were relatively coarse, with moderate density, and clustered together as a result of the indistinct boundaries between the granules. The acini of the parotid salivary glands contained only serous cells filled with numerous round-typed serous acinar granules. Serous acinar granules had uniformed dense matrix and definite boundaries. The ultrastructures without substructure in a matrix of serous and mucous acinar granules in the submandibular and parotid salivary glands of A. agraius were similar to those of species of Rodentia but different from those of Soricidae in Korea with a characteristic substructure in a matrix. This ultrastructure and charateristics in secretory acinar granules provide fundamental data for molecular comparisions of genetic relationships and are one of the key methods for classifying A. agraius.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제16권3호
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• pp.261-269
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• 2008

This experiment was performed to investigate the anxiolytic-like effects of cyclopeptide fraction alkaloids of Zizyphi Spinosi Semen (CFAZ), by using the experimental paradigms of anxiety, and compared with those of a known anxiolytic, diazepam. CFAZ (8.0 mg/kg, p.o.) increased the percentage of time spent on the open arms and the number of open arms entries in the elevated plus-maze test, increased the number of head dips in the hole-board test, and increased the percentage of center zone ambulatory time in the open-field box. However, CFAZ has no effect on the locomotor activity, while diazepam (2.0 mg/kg, p.o.) significantly reduced locomotor activity. CFAZ did not influence the grip force in the grip strength meter test, either. From the molecular experiments, CFAZ increased chloride influx in cultured cerebellar granule cells. In addition, $GABA_A$ receptors $\gamma$-subunit were over-expressed by CFAZ in cultured cerebellar granule cells. It is concluded that CFAZ may have anxiolytic-like effects, and these effects may be mediated by $GABA_A$ receptors.

• 한국약용작물학회지
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• 제12권5호
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• pp.415-423
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• 2004

Myristica fragrans seed from Myristica fragrans Houtt (Myristicaceae) has various pharmacological activities peripherally and centrally. The present study aims to investigate the effect of the methanol extract of Myristica fragrans seed (MF) on kainic acid (KA)-induced neurotoxicity in primary cultured rat cerebellar granule neuron. MF, over a concentration range of 0.05 to $5\;{\mu}g/ml$ inhibited KA $(500\;{\mu}M)-induced$ neuronal cell death, which was measured by trypan blue exclusion test and 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay. MF $(0.5\;{mu}g/ml)$ inhibited glutamate release into medium induced by KA $(500\;{\mu}M)$, which was measured by HPLC. Pretreatment of MF $(0.5\;{mu}g/ml)$ inhibited KA $(500\;{\mu}M)-induced$ elevation of cytosolic calcium concentration $([Ca^{2+}]_c)$, which was measured by a fluorescent dye, Fura 2-AM, and generation of reactive oxygen species (ROS). These results suggest that MF prevents KA-induced neuronal cell damage in vitro.

• 한국동물학회지
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• 제32권2호
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• pp.120-133
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• 1989

꿀벌부채명나방의 후기유충, 전용, 유충 직후용, 4일용, 성충2일전용, 성체에서 뇌를 적출하여 paraidehyde-fuchsin으로 분비활성 신경분비세포만을 염색하여 이 세포들의 분포, 수, 분비물질의 특성등이 변태시기에 따라 변화하는 것으로 추적하였다. 위의 6변태단계 뇌의 뇌간부, 전뇌측부, 시엽근역부, 중뇌, 후뇌에서 4형의 신경분비세포가 동정되었다. 뇌간부에 있는 medial neurosecretory cell은 6변태시기 뇌에서 3-7개이며, 제I형 신경분비세포는 1개를 가지고 있는 성충2일전용을 제외하고는 전반적으로 3개씩 관찰되었다. 전뇌측부에서 관찰되는 lateral neurosecretory cell은 용기와 성충기에서 1-5개가 관찰되었으며 제IV형 신경분비세포가 가장 많았다. 시엽근역부에 분포하는 Optic-lobe neurosecretory cell은 4일용에서만 1개가 관찰되었고 제I형 신경분비세포로 확인되었다. 중뇌에서 관찰되는 deuto cerebral neurosecretory cell은 성충에서만 1개가 관찰되었으며 이 세포는 제II형 신경분비세포이었다. 뇌에 있는 tritocerebral neurosecretory cell은 후기유충과 성충에서 3개와 1개가 각각 관찰되었으며 이 세포중 제I형 신경분비세포는 관찰되지 않았다.