Gold nanoparticles (GNPs) were conjugated with gallic acid (GA) at various concentrations between 30 and $150{\mu}M$ and characterized using transmission electron microscopy (TEM) and UV-Vis spectroscopy (UV-VIS). The anticancer activities of the gallic acid-stabilized gold nanoparticles against well-differentiated (M213) and moderately differentiated (M214) adenocarcinomas were then determined using a neutral red assay. The GA mechanism of action was evaluated using Fourier transform infrared (FTIR) microspectroscopy. Distinctive features of the FTIR spectra between the control and GA-treated cells were confirmed by principal component analysis (PCA). The surface plasmon resonance spectra of the GNPs had a maximum absorption at 520 nm, whereas GNPs-GA shifted the maximum absorption values. In an in vitro study, the complexed GNPs-GA had an increased ability to inhibit the proliferation of cancer cells that was statistically significant (P<0.0001) in both M213 and M214 cells compared to GA alone, indicating that the anticancer activity of GA can be improved by conjugation with GNPs. Moreover, PCA revealed that exposure of the tested cells to GA resulted in significant changes in their cell membrane lipids and fatty acids, which may enhance the efficacy of this anticancer activity regarding apoptosis pathways.
Purpose: The biocompatibility and bio-adhesive property of a dental implant abutment are important for proper soft tissue healing and maintenance of osseointegration of implant. However, studies of soft tissue healing and mucosal attachment of various materials of implant abutment other than titanium are still needed. In this study, cell attachment, proliferation, cytotoxicity of human gingival fibroblast for ceramic, gold alloy, Ni-Cr alloy and, commercially available pure titanium as a control were evaluated, using MTS and scanning electron microscopy. Materials and Methods: Specimen was designed to disc, 4mm diameter and 1mm thickness, made of ceramic, gold alloy, Ni-Cr alloy and commercially available pure titanium. Primary culture of human gingival fibroblasts were grown in Dulbecco's modified Eagle's medium with 10% fetal bovine serum and 1% antibiotics. Cells were inoculated in the multiwell plates placed the specimen disc. Cell Titer 96 AQucous One Solution Cell Proliferation Assay were done after 1hour 3hours, 24hours, 3days, 5days of incubation. The discs were processed for scanning electron micrography to evaluate cell attachment and morphologic change. Results: The results were obtained as fellows. 1. The ceramic showed high cell attachment and proliferation and low cytotoxicity, which is as much bioadhesive and biocompatible as titanium. 2. The gold alloy represented limited proliferation of human gingival fibroblast and the highest cytotoxicity among tested materials (p<0.05). 3. The Ni-Cr alloy limited the proliferaion of the human gingival fibroblast compared to titanium(p<0.05) but cytotoxicity on the bottom of well was not so considerable, compared to titanium. 4. On the scanning electron micrographs , the ceramic showed good attachment and proliferation of human gingival fibroblast, which was similar to titanium. But gold alloy and Ni-Cr alloy showed the shrinkage of gingival fibroblast both after 24 hours and 3 days. On 5th day, small amount of the human gingival fibroblast proliferation was observed on the Ni-Cr alloy, while the shrinkage of gingival fibroblast was still observed on the gold alloy. Conclusions: These results suggest that the ceramic abutment is as biocompatible as titanium to make proper mucosal seal. The gold alloy has a high cytotoxicity to limit proliferation of gingival fibroblast, which suggest limited use on the anterior tooth where soft tissue healing is recommeded.
대우조선해양 S.M.C는 국내에서 가행중인 유일한 금광산으로 현재 160 ton/day의 원광을 처리하여 금을 생산하고 있으며, 150 ton/day 이상의 광미가 발생하고 있다, 광미 중 일부는 탈수 건조 후 갱도 충전재로 사용하고 있으나 대부분 광미댐에 적치하고 있다. 광미의 성분을 분석한 결과 Au 품위 1.5~2.0 g/ton이 함유되어 있어, 하루에 버려지는 금은 225~300 g 이므로 이를 회수하고 재활용할 수 있는 방안의 마련이 시급한 실정이다. 본 연구에서는 광미에 함유된 Au를 회수하기 위한 기술을 개발하기 위해 부유선별법을 이용하여 일련의 실험을 실시하였으며, 포수제 KAX (97.2 g/ton), 기포제 AF 65 (248 ml/ton), 억제제 sodium silicate (4kg/ton)의 조건에서 Au품위 21.31 g/ton, 실수율 62.73% 산물을 얻을 수 있었다. 따라서 폐광미로부터 얻어진 정광을 다시 l차 조선공정에 재급광할 경우 대표적인 귀금속인 금을 회수할 수 있다.
Yoo, Ju Eun;Lee, Cheonghoon;Park, SungJun;Ko, GwangPyo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제27권4호
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pp.816-824
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2017
Human noroviruses are widespread and contagious viruses causing nonbacterial gastroenteritis. Real-time reverse transcription quantitative PCR (real-time RT-qPCR) is currently the gold standard for the sensitive and accurate detection of these pathogens and serves as a critical tool in outbreak prevention and control. Different surveillance teams, however, may use different assays, and variability in specimen conditions may lead to disagreement in results. Furthermore, the norovirus genome is highly variable and continuously evolving. These issues necessitate the re-examination of the real-time RT-qPCR's robustness in the context of accurate detection as well as the investigation of practical strategies to enhance assay performance. Four widely referenced real-time RT-qPCR assays (Assays A-D) were simultaneously performed to evaluate characteristics such as PCR efficiency, detection limit, and sensitivity and specificity with RT-PCR, and to assess the most accurate method for detecting norovirus genogroups I and II. Overall, Assay D was evaluated to be the most precise and accurate assay in this study. A ZEN internal quencher, which decreases nonspecific fluorescence during the PCR, was added to Assay D's probe, which further improved the assay performance. This study compared several detection assays for noroviruses, and an improvement strategy based on such comparisons provided useful characterizations of a highly optimized real-time RT-qPCR assay for norovirus detection.
본 연구에서는 임신진단등의 간편 현장진단(point of care test, POCT)에 주로 사용되고 있는 멤브레인 측면흐름 분석기법을 사용하여 인유두종 바이러스(Human papillomavirus, HPV)의 특정 서열을 검출할 수 있는 DNA array를 개발하였다. HPV type 6, 11, 16, 18, 31, 45에 특이적인 DNA 탐침들을 측면흐름 분석용 멤브레인 표면에 고정하고, biotin이 label된 MY09/11 primer를 사용하여 얻어진 HPV PCR 반응 결과물과 탐침 사이에 hybridization 반응을 유도하였다. 이후 streptavidin이 label된 colloidal gold가 교잡물의 biotin과 반응함으로써 DNA hybridization 결과를 육안으로 확인할 수 있었다. 본 연구를 통해 개발된 HPV DNA lateral flow membrane array는 기존의 HPV DNA chip 기법과 비교하여 경제적이고 편리하게 주요 HPV type을 확인할 수 있음을 보여주었다.
Background: Recently, the pork industry of Thailand faced an epidemic of highly virulent strains of porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), which spread throughout Southeast Asia, including the Lao People's Democratic Republic and Cambodia. Hence, the rapid and on-site screening of infected pigs on a farm is essential. Objectives: To develop the new aptamer as a biosensor for detection PRRSV which are rapid and on-site screening of infected pig. Methods: New aptamers against PRSSV were identified using the combined techniques of capillary electrophoresis, colorimetric assay by gold nanoparticles, and quartz crystal microbalance (QCM). Results: Thirty-six candidate aptamers of the PRRSV were identified from the systematic evolution of ligands by exponential enrichment (SELEX) by capillary electrophoresis. Only 8 out of 36 aptamers could bind to the PRSSV, as shown in a colorimetric assay. Of the 8 aptamers tested, only the 1F aptamer could bind specifically to the PRSSV when presented with the classical swine fever virus and a pseudo rabies virus. The QCM was used to confirm the specificity and sensitivity of the 1F aptamer with a detection limit of 1.87 × 1010 particles. Conclusions: SELEX screening of the aptamer equipped with capillary electrophoresis potentially revealed promising candidates for detecting the PRRSV. The 1F aptamer exhibited the highest specificity and selectivity against the PRRSV. These findings suggest that 1F is a promising aptamer for further developing a novel PRRSV rapid detection kit.
암이나 혈관질환을 진단하기 위하여 영상의학기기들의 사용이 증가되고 있다. 영상의학기기 중 컴퓨터단층촬영(CT)은 가장 널리 이용되는 방법의 하나로서, CT를 하기 위해서는 조영제를 투여하여야 한다. 따라서, 본 연구에서는 리포솜의 표면에 금 입자를 코팅함으로써 조영제로 개발하고자 하였다. 금 입자를 코팅하기 위하여, 양이온성 리포솜을 제조하였고, 양이온성 리포솜의 표면에 음이온을 띄는 $Au^-$가 정전기적으로 코팅이 되게 하였다. 금 코팅 리포솜(GCL)의 크기는 $154.8{\pm}9.2$ nm 이었고, 표면전하는 $27{\pm}3.2$ mV 이었다. 리포솜의 형태는 주사전자현미경과 투과전자현미경으로 확인하였다. 리포솜 표면의 금 코팅 효율은 18% 였으며, MTT 분석을 한 결과, 금 코팅 과정에 대한 세포독성은 없었다. 그리고, 제조된 금 입자 코팅 리포솜을 CT로 촬영했을 경우 우수한 조영 효과를 나타냈다. 따라서 본 연구에서 제조된 GCL은 CT 조영제로서 다양한 혈관질환에 적용이 가능할 것이다.
A label-free DNA detection method was developed for a simple electrochemical DNA sensor with a short assay time. Self-assembled monolayers of peptide nucleic acid were used as a probe on gold electrodes. The formation of the self-assembled monolayers on the gold electrodes was successfully checked by means of cyclic voltammetry. The target DNA, hybridized with peptide nucleic acid, can be detected by the anodic peak current of ferrocene dendrimers, which interact electrostatically with the target DNA. This anodic peak current was measured by square wave voltammetry at 0.3 V to decrease the detection limit on the order of the nanomolar concentrations. As a result, the label-free electrochemical DNA sensor can detect the target DNA in concentrations ranging from 1 nM to $1\;{\mu}M$ with a detection limit of 1 nM.
We developed the one-step strip based on an immunochromatographic (IC) assay for the rapid detection of Listeria spp. Genus-specific monoclonal antibody to flagella of L. monocytogenes was conjugated with 40 nm colloidal gold particles which were prepared in our laboratory. The specificity of the IC strip was tested with pure cultured bacteria. All strains of the genus of Listeria spp. yielded positive reactions and 12 strains of non-Listeria were negative, resulting in a specificity of 100%. L. monocytogenes was artificially inoculated in raw pork macerated with listeria enrichment broth. And then it was 10-fold diluted from $8.7{\times}10^6$ to 8.7 CFU/ml. L. monocytogenes could be detected at a minimum of $8.7{\times}10^5CFU/ml$ before enrichment, $8.7{\times}10^2CFU/ml$ after primary enrichment and 8.7 CFU/ml after secondary enrichment, respectively. These results indicated that the IC strip exhibited high specificity and sensitivity in the detection of Listeria spp.
This study was performed to investigate the activity of antibodies in the tissues of Paragonimus westermani at the different developmental stages. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and Immunelectron microscopy (IEM) were applied, using the dog sera infected with metacercariae isolated from Cambaroides similis. These dog sera were obtained from 3rd to 96th week after infection by bleeding. The supernatants of homogenated worms for worm antigen were used. The worm tissues were embedded in Lowicryl HM 20 medium, treated with infected serum and protein A gold complex (particle size; 12 nm) and observed by electron microscope. In the pattern of antibody levels by ELISA test in all developemental worm antigens, the activity of antibody was very weak in the 3rd week, but strong in the worm antibody from 4th to 20th week after infection. Its activity was maintained even till 96th week. The antibody level of the L2th week worm antigen was higher than those of the 20th and 48th week worm antigens. Generally, many gold particles were observed on the secretory granules and the epithelial lamellae. Thus, it was concluded that the antigenic materials in the developmental worm tissues were especially concentrated on the secretory granules in the parenchymal tissues and the epithelial lamellae in the lumen of the caecum.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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