• 한국미생물·생명공학회지
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• 제21권5호
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• pp.435-439
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• 1993

For the overproduction of glutathione, Candida sp. mutant was isolated by the treatment with U.V. light. The highest glutathione production of Candida sp. mutant was obtained after shaking culture for 48 hours in the cullture medium containing glucose 1.5%(w/v), yeast extract 4.0% (w/v), KH2PO4 0.04%(w/v), biotin 5 ng/ml, and L-cysteine 0.04%(w/v). The optimal pH and temperature for the glutathione production were pH 6.0 and 25C, respectively.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제26권3호
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• pp.213-220
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• 1998

글루타치온 생산에 필요한 ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase와 glutathione synthetase 효소의 활성을 위한 ATP 재생산계에 대하여 연구하였다. 글루타치온 합성용 효소를 생산하는 E. coli TG1/pDR7${\alpha}$의 최적 배양하였으며 이때 글루타치온의 생산농도는31 mg/g wet cell이었다. 빵효모를 이용한 글루타치온의 생산수율은 acetate kinase보다 낮았으나, 경제성의 면에서는 더 우수할 것으로 판단된다. ATP 재생산계로 빵효모가 Saccharomyces cerevrsiae ATCC24858보다 더 우수함을 보였다. ATP농도 5mM에서 cysteine에 대한 글루타치온의 생산 수율은 36%이었다. Cysteine의 소모에 의한 글루타치온 생산 제약을 피하기 위하여 cysteine을 반응 2시간에 추가 공급함으로써 글루타치온 생산수율을 1.91배 증가시켰다. 다양한 기질 추가 실험 결과에 의해 빵효모에 의한 ATP재생산계가 유효하고, 14mM이상의 글루타치온 농도에서는 산물저해 현상이 있는 것으로 나타났다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제21권1호
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• pp.1-5
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• 1993

춘천시 근교의 토양으로부터 glutathione 생산균주를 분리, 동정하고 glutathione 생산 최적조건을 검토하였다. 분리된 균주는 동정을 행한 결과 Candida sp.로 판단되었다. Glutathione 생산을 위한 Candida sp의 배지조성은 fructose 1.0, yeast extract 4.0, NaCl 0.04, thiamine-HCl5{\mu}g/ml$ 및 L-cysteine 0.04 이었으며 온도는 $25^{\circ}C$, pH 6.0에서 36시간 배양하였을 때 glutathione 생산이 가장 좋았다. Glutathion 생산을 위한 최적배지에서 Candida sp. 균주에의한 glutathione 생산량은 $92{\mu}g/ml$로 YM 배지보다 약 2.5배 정도 증가하였다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제1권3호
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• pp.157-162
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• 1991

Conditions for glutathione production in E. coli cells which possess pGH501 (2 gshI+gshII) were studied. In terms of ATP supply for the glutathione synthesis, two different systems have been constructed and compared. When the acetate kinase reaction of E. coli was used for ATP generation, 20 mM of L-cysteine was completely converted to glutathione by toluene-treated E. coli cells (100 mg/ml) harboring pGH501 within 2 h at $37^{\circ}C$. However, considering the economical aspects, the glycolytic pathway of yeast was chosen as a better system for ATP generation. The optimal concentrations of reactants for glutathione production were determined to be as follows; 80 mM L-glutamate, 20 mM L-cysteine, 20 mM glycine, 20 mM $MgCl_2$, 50 mM potassium phosphate buffer (pH 7.5), 400 mM glucose, polyoxyethylene stearylamine ($5\;\mul/ml$), toluene-treated E. coli HB101/pGH501 (100 mg/ml), and dried yeast cells (400 mg/ml). The conversion ratio of L-cysteine to glutathione was 80% (about 5 mg/ml) under optimal condition within 6 h at $37^{\circ}C$.

• Journal of Microbiology
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• 제42권1호
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• pp.51-55
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• 2004

The influence of feedstock amino acids, salt, carbon and nitrogen sources on glutathione production by Saccharomyces cerevisiae FF -8 was investigated. Glucose, yeast extract, KH$_2$PO$_4$, and L-cysteine were found to be suitable feedstock. Highest glutathione production was obtained after cultivation with shaking for 72 h in a medium containing glucose 3.0% (w/v), yeast extract 3.0%, KH$_2$PO$_4$ 0.06% and L-cysteine 0.06%. The glutathione concentration achieved using this medium increased 2.27-fold to 204 mg/l compared to YM basal medium.

• 한국식품과학회지
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• 제45권6호
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• pp.801-804
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• 2013

Glutathione 생성능이 우수한 효모균주의 획득을 목적으로 Saccharomyces cerevisiae 균주를 변이처리 하였다. 선발된 변이주들의 전체적인 glutathione 함유량은 6.1-15.8 mg/g이었으며, glutathione 함유량과 항산화활성은 비교적 양호한 양의 상관관계($R^2$=0.488)를 보였다. 특히, 변이주 S. cerevisiae Sa59의 glutathione 함유량이 wild type에 비해 약 38% 증가되었으며, 환원력 또한 0.40으로 가장 높아 glutathione 생성을 위한 변이주로 선발하였다. 배양방법에 따른 gluthathione의 부피당 생산성은 진탕배양이 정치배양에 비해 약 70% 증가하였으며, 단위균체량당 glutathione 함유량 또한 진탕배양 했을 때 약 19% 증가하였다. Glucose 농도가 증가함에 따라 건조균체량과 발효에 의한 에탄올 함량은 증가하였으나, glutathione 함유량과 환원력은 감소하는 경향을 나타냈다. Glutamate, cysteine 및 glycine을 각각 0.04% 첨가하였을 때 단위부피 및 단위균체량당 glutathione 함유량이 각각 16%, 66% 증가하였으며, 환원력 또한 0.52로 가장 우수하였다.

• 생명과학회지
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• 제7권4호
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• pp.253-261
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• 1997

E. coli에서 글루타치온 생산 증가를 위해서 E. coli에서 분리한 gehI과 gshII유전자를 함유하고 있는 여러 재조합 플라스미드를 구성하여 도입하였다.pBR325 벡터에 gehI 유전자를 각각 1-3개를 포함한 재조합 플라스미드 및 gehI과 gehII 유전자를 동시에 갖는 재조합 플라스미드를 구성하였다. 계속적으로 반복된 gehI 유전자가 증폭된 E. colidml $\gamma $-gluramylcysteine synthetase의 효소활성은 삽입된 gehI 유전자의 부에 따라 증가하였다. 구성된 재조합 플라스미드를 함유한 E.coli의 글루타치온 생산능을 accetate kinase반응을 ATP재생계로 사용하여 조사한 결과 반복된 gehI 유전자를 함유한 E.coli의 글루타치온 생산능력은 삽입된 gehI 유전자의 수에 비례한여 증가하였으며, gehI 유전자의 추가적인 도입에 의해 글루타치온 생산능력은 2배 증가하였다. E.coli에서 글루타치온의 효소적 생산은 주로 \gamma $-gluramylcysteine synthetase의 효소활성에 의해 영향을 받았다. 가장 높은 글루타치온 생산능은 pGH501 (pUC8-gsh.I.II.III) 플라스미드를 갖는 균주에서 관찰되었다.

• 대한한의학회지
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• 제18권2호
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• pp.355-365
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• 1997

This study was undertaken to examine the effect of Cheongahwan(CAH), being known to reinforce Kidney-yang, on the activities of endogenous antioxidant enzymes and the production of oxygen free radicals in the kidney tissues. Alterations in enzyme activities were observed after in vivo treatment in rats. CAH caused a significant increase in the activities of superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase and glutathione S-transferase. But catalase activity was not significantly altered by CAH. Treatment in vitro of CAH decreased the production of oxygen free radicals in a dose-dependent fashion. These results suggest that CAH stimulate the activities of antioxidant enzymes and inhibit directly the production of oxygen free radicals. These effects of CAH may contribute to prevent the oxygen free radical-induced impairment of cell function.

• Applied Biological Chemistry
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• 제46권4호
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• pp.348-352
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• 2003

본 연구에서는 $glutathione({\gamma}$-L-glutamyl-cysteinyl-glycine)을 다량으로 함유하는 효모 균주를 전통 발효주로부터 분리하여 glutathione 생산 조건을 검토하였다. 분리된 균주는 형태학적, 생리학적 및 생화학적 특성을 검토한 결과 Saccharomyces cerevisiae로 동정되어 FF-8로 명명하였다. Saccharomyces cerevisiae FF-8의 glutathione 생산 조건은 YM(glucose 1.0%, acid peptone 0.5%, yeast extract 0.3%, malt extract 0.3%) 배지를 기본으로 하여 최적 온도, 교반속도 및 초기 pH의 조건을 검토하였다. Glutathione 생산은 온도 $30^{\circ}C$, 교반속도 100 rpm 및 pH 6.0에서 72시간 동안 진탕 배양하였을 때 가장 높았으며, 이때 glutathione 생산량은 72.0 mg/l이였으며, 건조 균체량은 5.2 g/l이였다.

• 한국미생물학회:학술대회논문집
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• 한국미생물학회 1991년도 춘계학술발표대회 논문집
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• pp.237-242
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• 1991

In order to increase the production of glutathione by maximizing the expression of recombinant gsh plasmids, two genes responsible for the biosynthesis of glutathione were cloned. A gshI gene was cloned onto pBR322 plasmid as 3.6Kb PstI DNA fragment from E. coli K-12 chromosomal DNA. Also gshII gene was cloned onto pUC13 plasmid as 2.2Kb PstI-BamHI DNA fragment. In order to improve the glutathione producing activity more efficiently, various recombinant plasmids containing tandem repeated gshI genes or both genes in various copy number onto the same vector were constructed. E. coli cells harboring pGH501 plasmid (pUC8-gshI$\cdot$I$\cdot$II) showed the highest glutathione synthesizing activity. The conditions for glutathione production with an ATP-generating system such as acetate kinase reaction of E. coli cells or glycolytic pathway of yeast cells were examined using the E. coli cells harboring the pGH501 plasmid. When the acetate kinase reaction of E. coli cells was used as an ATP generating system, 20mM of L-csteine was converted into glutathione with a yield of $100\%$.