신경과흥분은 신경세포의 수지돌기 말단부에 있는 흥분성 수용체에 대한 과도한 자극에 의해서 신경세포가 손상을 받는 현상으로 transcription factor의 발현을 유도하여 통증을 유발하는 자극, 학습, 발작, 흥분, 신경변성, 저산소성 국소빈혈, 뇌신경손상, 신경절제, 약제내성 등의 원인이 된다. 신경과흥분은 정상농도 이상의 NMDA에 의해서도 유발되는데 본 논문에서는 mouse의 복강으로 과량의 NMDA를 투여하여 소뇌에서 RT-PCR 방법으로 Inducible transcription factors (Egr-1, c-jun, JunB, FosB) mRNAs의 상대적 발현량을 비교하였다. NMDA를 투여한 군에서 inducible transcription factors (Egr-1, C-Jun, JunB, FosB)가 투여량과 시간의 경과에 따라 다양한 발현의 변화를 보였으며, NMDA투여 후 일정한 시간에서 투여한 양에 대한 변화는 체중 g 당 5 μg의 NMDA투여한 경우에 현저한 변화가 나타났다. 조사한 transcription factor 중에서 JunB의 발현 변화가 다른 transcription factor보다 두드러지게 나타났다. NMDA 투여량이 일정할 때 투여 후 경과 시간에 따른 발현양상은 투여 후 24시간이 경과한 후에 발현의 변화가 두드러지게 증가하는 경향을 나타내었고 대부분 이 48시간 경과 후 발현이 최고치에 도달하였다. 이러한 결과는 과흥분이 유도된 소뇌에서의 유전자 발현의 변화를 2D-gel 또는 microarray와 같은 방법을 이용하여 세포 내의 전체 단백질 혹은 유전자의 변화를 관찰함으로써 NMDA 수용체의 과흥분에 의한 뇌세포의 사멸에 관련된 기전을 밝힐 수 있는 좋은 자료가 될 수 있을 것으로 기대된다.
MOON, HYUN-SOO;CHANG, IN-SEO;JANG, JAE-KYUNG;KIM, KYUNG-SHIK;LEE, JI-YOUNG;LOVITT, ROBERT W.;KIM, BYUNG-HONG
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제15권1호
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pp.192-196
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2005
Abstract Oligotrophic microbial fuel cells (MFCs) were tested for the continuous monitoring of low biochemical oxygen demand (BOD) by using artificial wastewater, containing glucose and glutamate, as check solution. Ten times diluted trace mineral solution was used to minimize the background current level, which is generated from the oxidation of nitrilotriacetate used as a chelating agent. The feeding rate of 0.53 ml/min could increase the sensitivity from 0.16 to 0.43 ${\mu}$A/(mg BOD/l) at 0.15 ml/min. The dynamic linear range of the calibration curve was between 2.0 and 10.0 mg BOD/l, and the response time to the change of 2 mg BOD/l was about 60 min. The current signal from an oligotroph-type MFCs increased with the increase in salts concentration, and the salt effect could be eliminated by 50 mM phosphate buffer.
This paper, experiment manufactures device of Metal/Poly-${\gamma}$ Benzyl $_D$-GlutamateOrganic Films/Metal structure using PBDG and I-V properties and C-F properties. The I-V characteristic is measured that approve voltage from 0 to +2[V] of device and the distance between electrode is larger, could know that small current flow and thin film could know that had insulation property. C-F characteristic has each other affinity between the polarization amount and frequency. Permittivity of MIM device could know by dipole that is voluntary polarization of LB film that polarization is happened. The capacitor properties of a thin film is better as the distance between electrodes is smaller.
This paper, experiment manufactures device of Metal/Poly-$\gamma-Benzyl\;_D-Glutamate$ Organic Films/Metal structure using PBDG and I-V properties and C-F properties. The I-V characteristic is measured that approve voltage from 0 to +2[V] of device and the distance between electrode is larger, could know that small current flow and thin film could know that had insulation property. C-F characteristic has each other affinity between the polarization amount and frequency. Dielectric constant of MIM device could know by dipole that is voluntary polarization of LB film that polarization is happened. The capacitor properties of a thin film is better as the distance between electrodes is smaller.
Objective : The transverse hippocampal slice is one of the most commonly studied in vitro models of mammalian brain physiology. However, despite its broad usage, there has been no standardization of slice preparation techniques or recording condition. It is well known that variations in recording conditions can result in profound different effects to neuronal responses. Evoked field potentials, recorded extracellularly, were used to investigate the effects of variations in hippocampal slice preparation protocol on hypoxia responses of CA1 neurones. Material & Methods : Before hypoxic injury, hippocampal slices were incubated for 4 hours. During incubation period, the slices were placed in a incubation chamber($21^{\circ}C$) for recovery from preparation injury and then transferred to recording chamber($34^{\circ}C$) for more recovery and baseline electric recording with current stimulation(0.1Hz). Various time periods in incubation chamber and recording chamber were applied to each experimental group(group 1=60min : 180min, group 2=90min : 150min, group 3=180min : 60min, time in incubation chamber : time in recording chamber) before 10 min hypoxia produced by replacing 95% $O_2$+5% $CO_2$ mixed gas to 95% $N_2$+5% $CO_2$ gas. Calcium, Magnesium ions and several drugs effecting on glutamate receptor also were studied. Recoveries from hypoxic injury of hippocampal slices were estimated by percent recovery of population spike(PS). Statistic analysis of study were performed using paired t-test. Results : The percent recovery of PS after 10min hypoxia was considerably enhanced by increasing the period of current stimulation during incubation period before hypoxic injury. Temperature effect on the result of this experiment was also studied(group 4) but the result from this showed no statistic significance. Low magnesium ion concentration of artificial CSF(Mg-free aCSF) during incubation period enhanced the recovery of PS but low calcium (calcium-free) and high magnesium ion concentration(2mM) reduced it after hypoxic injury. L-glutamate($100{\mu}M$) and AP-5($50{\mu}M$) had no effect on the recovery of PS but CNQX($10{\mu}M$) in artificial CSF during incubation period markedly enhanced the recovery of PS. Co-treatment of AP-5($50{\mu}M$), CNQX($10{\mu}M$) and high magnesium concentration(2mM) enhanced recovery of PS in immediate following period of hypoxic injury but the effect of cotreatment after then decayed rapidly and lost statistic significance. Conclusions : Judging from above results, the condition of baseline recording is important in observing the recovery of population spike after hypoxia, and the time and the condition should be controled more strictly to obtain reliable results.
Kim, Jinsung;Moon, Sang Hui;Kim, Taewook;Ko, Juyeon;Jeon, Young Keul;Shin, Young-Cheul;Jeon, Ju-Hong;So, Insuk
The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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제24권1호
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pp.101-110
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2020
Transient receptor potential canonical 4 (TRPC4) channel is a nonselective calcium-permeable cation channels. In intestinal smooth muscle cells, TRPC4 currents contribute more than 80% to muscarinic cationic current (mIcat). With its inward-rectifying current-voltage relationship and high calcium permeability, TRPC4 channels permit calcium influx once the channel is opened by muscarinic receptor stimulation. Polyamines are known to inhibit nonselective cation channels that mediate the generation of mIcat. Moreover, it is reported that TRPC4 channels are blocked by the intracellular spermine through electrostatic interaction with glutamate residues (E728, E729). Here, we investigated the correlation between the magnitude of channel inactivation by spermine and the magnitude of channel conductance. We also found additional spermine binding sites in TRPC4. We evaluated channel activity with electrophysiological recordings and revalidated structural significance based on Cryo-EM structure, which was resolved recently. We found that there is no correlation between magnitude of inhibitory action of spermine and magnitude of maximum current of the channel. In intracellular region, TRPC4 attracts spermine at channel periphery by reducing access resistance, and acidic residues contribute to blocking action of intracellular spermine; channel periphery, E649; cytosolic space, D629, D649, and E687.
An amperometric biosensor based on carbon paste electrodes (CPEs) for the determination of urea was constructed by enzyme (urease/GL-DH)-modified method. Urea was hydrolyzed to ${NH_4}^+$ by catalyzing urease onto the enzyme-modified electrode surface in sample solution. In the presence of ${\alpha}$-ketoglutarate and reduced nicotinamide adenine dinucleotide(NADH), a liberated ${NH_4}^+$ produce to L-glutamate and $NAD^+$ by Lglutamate dehydrogenase (GL-DH). After the chemical reaction was proceeded, the electrochemical reaction was occurred that an excess of the NADH was oxidized to $NAD^+$. The oxidation current of NADH was monitored at +1.10 volt vs. Ag/AgCl. An optimum conditions of biosensor were investigated: The optimum pH range for catalyzed hydrolysis reaction of urea was pH 7.0-7.4. The linear response range and detection limit were $2.0\;{\times}\;10^{-5}{\sim}2.0\;{\times}\;10^{-4}M\;and\;5.0\;{\times}\;10^{-6}M$, respectively. Another physiological species did not interfere, except L-ascorbic acid.
To research the characteristics of ion currents induced by Bujaijung-tang and Bojungikgi-tang, nystatin-perforated patch clamp technique under voltage-c(amp condition was used. Periaqueductal gray neuron was dissociated from Sprauge-Dawley rat, 10-15 days old. Cytotoxicity of Bujaijung-tang and Bojungikgi-tang showed incubation time and concentration dependent manner. Ion current activated by Bujaijung-tang and Bojungikgi-tang were inhibited by bicuculline and strychnine and CNQX. It can be suggested that Bujaijung-tang and Bojungikgi-tang modulate inhibitory and excitatory neurotransmitters-, GABA, glycine and non-NMDA, acticvated ion channels. Modulatory effect of Bujaijung-tang and Bojungikgi-tang was more greater in inhibitory neurotransmitters. Low concentration of Bujaijung-tang which dose not elicit ion current itself, activated GABA and glycine induced chloride currents. In this study, we can found that the activation of Bujaijung-tang and Bojungikgi-tang on non-NMDA subtypes of glutamate receptor is its major action mechanism and can be used as very effective Herb treatment on Myasthenia gravis patient.
1. 들깨는 용도면에서 볼 때 종실은 식용으로, 기름은 식용과 공업용, 깻잎은 채소로 또 깻잎의 정유성분은 향료로 이용될 수 있는 다용도 작물이다. 2. 종실의 단백질 함량은 18-28% 정도이고 단백질의 아미노산조성에 있어 글루타메이트(glutamate)함량은 계란보다 월등히 많다. 3. 종실의 기름 함량은 35~54%로서 기름중에는 리놀렌산(linolenic acid)이 60% 이상 함유되어 있으므로 생리적 기능성 식품으로 우수한 특성을 갖고 있으며 필수지방산의 공급원으로서도 중요하다. 4. 기름의 특성상 들기름은 고도의 불포화 지방산인 리놀렌산이 주성분이기 때문에 들기름을 짜서 상온에서 보관하게 되면 산패(oxidation)되기 쉬우므로 장기간 저장 이용하기 어렵다. 5. 깻잎은 비타민 C와 베타카로틴($\beta$-carotene) 함량이 많고 다른 미량성분도 풍부하게 함유되어 있으므로 들깨잎은 생식용 채소로서의 이용가치가 높다. 6. 깻잎의 정유(essential oil) 성분은 페릴라알데하이드(perilla aldehyde)가 주성분이며 이는 식품이나 식품첨가제로 쓰일 때 광범위한 항균작용(antimicrobial activity)을 나타낸다. 7 들깨나 자소잎의 붉은 색소중에는 안토시아닌(anthocynins)이 다량 함유되어 있으며 이는 식품색소로 널리 쓰인다.
In addition to classical synaptic transmission, information is transmitted between cells via the activation of extrasynaptic receptors that generate persistent tonic current in the brain. While growing evidence supports the presence of tonic NMDA current ($I_{NMDA}$) generated by extrasynaptic NMDA receptors (eNMDARs), the functional significance of tonic $I_{NMDA}$ in various brain regions remains poorly understood. Here, we demonstrate that activation of eNMDARs that generate INMDA facilitates the ${\alpha}$-amino-3-hydroxy-5-methylisoxazole-4-proprionate receptor (AMPAR)-mediated steady-state current in supraoptic nucleus (SON) magnocellular neurosecretory cells (MNCs). In $low-Mg^{2+}$ artificial cerebrospinal fluid (aCSF), glutamate induced an inward shift in $I_{holding}$ ($I_{GLU}$) at a holding potential ($V_{holding}$) of -70 mV which was partly blocked by an AMPAR antagonist, NBQX. NBQX-sensitive $I_{GLU}$ was observed even in normal aCSF at $V_{holding}$ of -40 mV or -20 mV. $I_{GLU}$ was completely abolished by pretreatment with an NMDAR blocker, AP5, under all tested conditions. AMPA induced a reproducible inward shift in $I_{holding}$ ($I_{AMPA}$) in SON MNCs. Pretreatment with AP5 attenuated $I_{AMPA}$ amplitudes to ~60% of the control levels in $low-Mg^{2+}$ aCSF, but not in normal aCSF at $V_{holding}$ of -70 mV. $I_{AMPA}$ attenuation by AP5 was also prominent in normal aCSF at depolarized holding potentials. Memantine, an eNMDAR blocker, mimicked the AP5-induced $I_{AMPA}$ attenuation in SON MNCs. Finally, chronic dehydration did not affect $I_{AMPA}$ attenuation by AP5 in the neurons. These results suggest that tonic $I_{NMDA}$, mediated by eNMDAR, facilitates AMPAR function, changing the postsynaptic response to its agonists in normal and osmotically challenged SON MNCs.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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