• 제목/요약/키워드: glucose-1 oxidase

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여러가지 탄소원에 의한 Hansenula polymoypha의 Alcohol-oxidase합성 (Synthesis lit Alcohol-oxidase in Hansenula polymoypha on Various Carbon Sources)

  • 이명숙;장동석;최위경
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제17권5호
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    • pp.461-467
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    • 1989
  • Hansenula polymoypha의 배양조건과 배지의 탄소원에 따른 alcohol-oxidase의 생성능을 비교하기 위하여 H. polymorpha CBS 4732, H. polymorpha CBM 11, 그리고 H. polymorpha Cooney의 3균주에 대하여 실험하였다. 배양조건에 따른 효소생성은 glucose를 탄소원으로 첨가한 mineral salt medium에서 균체를 정상기까지 배양하여 methanol이 함유된 배지에서 재배양하는 2단계 배양법의 경우가 균체를 직접 methanol 배지에 배양한 경우보다 효율적이었으며 생성된 총효소량은 전자의 경우가 후자에 비해 1.9배정도 많았다. 다음 탄소원에 따른 효소생성능을 비교하였다. 먼저 직쇄 alcohol을 탄소원으로 사용한 경우 mothanol을 제외한 ethanol, propanol, butanoL, 그리고 pentanol에서는 효소가 생성되지 않았고 또한 이 직쇄 alcohol을 methanol과 혼합한 경우에도 극미량의 생성에 그쳤다. 여러 가지 탄소화합물 (glucose, xylose, lactose, glycerol, galactose, saccharose, sorbose, tactic acid acetic acid)을 탄소원으로 사용하면 methanol에 의해 생성된 효소량의 1/10 정도 생성되었고 이들을 methanol과 혼합사용하면 효소생성량은 급격히 증가하였고, 특히 lactose와 tactic acid의 경 우는 methanol 단독사용시 보다 오히려 다량 생성되었다. 시험 3균주 중에서는 어떤 경우에서든지 H. polymorpha CBS 4732가 alcohol-oxldase 생성능이 가장 좋은 것으로 나타났다.

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유기용매 첨가에 따른 Polypyrrole-Glucose Oxidase 효소전극의 효소고정화 향상 II. 전기화학적 분석 및 포도당 감지 (Improvement on Enzyme Immobilization in Polypyrrole-Glucose Oxidase Enzyme Electrode using Organic Solvent Additive II. Electrochemical Analyses and Glucose Sensing)

  • 김현철;구할본
    • 한국전기전자재료학회논문지
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    • 제15권7호
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    • pp.621-626
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    • 2002
  • In the case of immobilizing of glucose oxidase (GOx) in polypyrrole (PPy) conducting polymer using electrosynthesis, the GOx obstructs charge transfer and mass transport during the film growth. This may lead to short chained polymer and/or make charge-coupling weak between the GOx and the backbone of the PPy. That is mainly due to insulating property and net chain of the GOx. Since being the case, it is useless to increase in amount of GOx mere than reasonable in the synthetic solution. We improved the amount of immobilized GOx into the PPy by adding a little ethanol in the synthetic solution without any more amount of GOx in the solution. We electrochemically analyzed an improvement in the immobilizing event. For the glucose sensing, when ethanol was added by 0.1 mol $dm^{-3}$ in the synthetic solution, the Michaelis constant of the resulting enzyme electrode was about 32 mmol $dm^{-3}$ and maximum current was about $146\mu A$.

효소 및 미생물의 고정화에 관한 연구 제1보. 방사선조사에 의한 Glucose Oxidase의 고정화법 (Studies on the Immobilization of Enzymes and Microoganism Part 1. Immobilizing Method of Glucose Oxidase by Gamma Radiation)

  • Kim, Sung-Kih
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제7권1호
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    • pp.1-8
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    • 1979
  • 혈액 및 생체반응물질등에 함유된 미량의 glucose를 효소적으로 간편하게 측량하기 위하여 먼저 고가의 glucose oxidase를 고정화 시켰다. 전리 방사선조사에 의하여 이 효소를 쉽게 고정화 시킬수 있는 방법과 그 알맞는 조건 및 높은 잔여 활성에 관한 결과는 다음과 같다. 1) 여러가지 monomer 및 polymer의 combination 중에서 AA-Bis, NK ester 23G, 물 (1:1:2)에 가용성 효소 1ml를 고정화 시켰을 경우를 비롯하여 GOD의 잔여활성이 50%이상인 여러 monomer Combination 찾았다 2) Carrier의 방사선중합에 필요한 선량은 100 krad 이상 이였으나, 400~500krad가 적당하였고, solvent는 toluene, n-haxane, petoleum ether chloroform 등을 이용할 때 고정화된 GOD의 잔여 활성 및 이화학적 성장이 좋았다. 3) GOD 고정화에 이용될 수 있는 완충 용액은 tris-glycerol buffer (pH 7.0)가 phosphate (pH 7.0) 보다 높은 활성을 보여 주었다. 4) 고정화된 GOD의 최적 pH는 6.0~6.5 또 온도는 30~4$0^{\circ}C$로서 가용성 효소보다 작용범위가 넓었고, pH 및 온도의 변화도 완만하였다. The author acknowledges with gratitude financial assistance from International Atomic Energy Agency, Vienna, Austria and also sincerely thanks Dr. K. Kawashima and his colleagues, National Food Research Institute, Tokyo, Iapan for encouragement and assistance.

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태음조위탕(太陰調胃湯)이 Glucose Oxidase에 의해 손상된 대뇌피질(大腦皮質) 신경세포(神經細胞)에 미치는 영향(影響) (Effects of Taeyeumjoweetang against Glucose Oxidase-induced Neurotoxicity in the Cultured Mouse Cerebral Cortical Neurons)

  • 김종관;유도곤;김경요
    • 사상체질의학회지
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    • 제11권2호
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    • pp.267-281
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    • 1999
  • 1. 연구목적 본 실험은 태음조위탕이 대뇌신경세포의 산화적 손상에 대한 효능을 밝히기 위한 것이다. 2. 연구방법 신생생쥐에서 순수 분리한 대뇌신경세포(大腦神經細胞)를 배양(培養)하여 glucose oxidase (GO)에 노출시킨 후 이의 독성효과(毒性效果)를 측정(測定)하였으며, 또한 GO에 의하여 유도(誘導)된 독성(毒性)에 대한 태음조위탕(太陰調胃湯)의 효과(效果)를 조사(調査)하였다. 3. 결과 및 결론 산소자유기(酸素自由基)인 GO는 MTTassay에 의한 세포생존율(細胞生存率)의 유의한 감소(減少)를 보였다. 산소자유기(酸素自由基)인 GO는 NR assay에 의한 세포생존율(細胞生存率)의 유의한 감소(減少)를 보였다. GO의 산화적(酸化的) 손상(損傷)에 의한 신경독성(神經毒性)에 대하여 태음조위탕(太陰調胃湯) 투여로 총단백질양의 유의한 증가(增加)를 보였다. GO의 산화적(酸化的) 손상(損傷)에 의한 신경독성(神經毒性)에 대하여 태음조위탕(太陰調胃湯) 투여로 lipid peroxidation의 유의한 감소(減少)를 보였다. 이상(以上)의 실험결과(實驗結果)는 태음조위탕(太陰調胃湯)이 대뇌신경세포(大腦神經細胞)의 산화적손상(酸化的損傷)에 대하여 유의성(有意性) 있는 방어적(防禦的) 작용(作用)을 나타낸 것으로, 이와 관련된 노화억제(老化抑制)나 뇌허혈(腦虛血), 다발성경화증(多發性硬化症), 치매 등 뇌기능손상(腦機能損傷)이나 저하(低下)로 유발되는 질환(疾患)에 대한 임상응용(臨床應用)에 대해서도 지속적(持續的)인 연구(硏究)가 필요(必要)하다고 사료(思料)된다.

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양파 착즙액과 포도당 산화효소의 반응 특성 (Characteristics of Glucose Oxidase Reaction of Onion Juice)

  • 최봉영;이은미;김영란;김현종;정봉우
    • 한국식품과학회지
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    • 제35권3호
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    • pp.417-422
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    • 2003
  • 양파가공기술의 일환으로 양파에 포함된 풍부한 포도당을 포도당산화효소(glucose oxidase)를 이용하여 글루콘산(gluconic acid)이 함유된 건강기능성 양파음료를 개발하기 위한 기초연구를 수행하였다. $Novozym^{\circledR}$ 771의 포도당 소모속도에 대한 kinetic parameter를 알아본 결과 Mechaelis Menten equation의 특성치들은 $V_{max}=26.1{\times}10^{-2}\;g/L{\cdot}min$이고 $K_m=5.84\;g/L$이었다. 양파즙에서의 포도당 산화효소의 반응특성을 알아보기 위해 2.5L jar fermentor에서 조업부피 1L로 각 조건에서 실험 하였다. 온도의 영향을 검토한 결과 $25^{\circ}C$일 경우 초기반응속도가 $3.18{\times}10^{-2}\;g/L{\cdot}min$이며 $30^{\circ}C$일 때보다 1.1배 증가된 값을 보임으로서 온도가 $30^{\circ}C$로 증가시 반응속도는 다소 감소하는 것을 확인할 수 있었다. 통기속도의 영향을 살펴본 결과 반응속도는 통기량이 증가할수록 증가하는 경향을 보였다. 0 vvm일 때는 반응이 거의 진행되지 않았으며 4 vvm일 때 초기반응속도 $9.18{\times}10^{-2}\;g/L{\cdot}min$, 91.5%로 만족할 만한 높은 값을 보였으며 용존산소농도의 값을 측정함으로서 4 vvm일 때 산소가 포함됨을 확인할 수 있었다. 교반속도는 측정되었던 반응 조건 중 반응속도에 큰 영향을 주는 중요한 조건이었다. 450rpm일 때 $16.2{\times}10^{-2}\;g/L{\cdot}min$, 99.2%으로서 최대값을 보였다. 교반속도의 증가는 산소전달과 물질전달을 용이하게 해줘 결국 반응속도가 증가되는 것으로 판단된다. 2.5 L jar fermentor에서의 결과를 바탕으로 20L bench 규모의 효소 반응기를 제작, 20L 효소 반응기에서 조업부피 10L로 $25^{\circ}C$, 2 vvm, 350rpm에서 양파즙의 포도당 산화반응을 살펴본 결과 전체적인 반응속도가 크게 변하지 않는 것으로 판단되어 본 효소 반응은 매우 용이하게 scale-up 될 수 있는 것으로 판단되었다.

Enzyme Sensors Modified with Avidin/Biotin Systembased Protein Multilayers

  • Anzai, Jun-Ichi;Du, Xiao-Yan;Hoshi, Tomonori;Suzuki, Yasuhiro;Takeshita, Hiroki;Osa, Tetsuo
    • 분석과학
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    • 제8권4호
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    • pp.591-596
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    • 1995
  • Enzyme multilayers composed of avidin and biotin-labeled enzymes were prepared on the surface of electrode, through a strong affinity between avidin and biotin (binding constant: ca $10^{15} M^{-1}$). The enzyme multilayers were useful for the improvement of the performance characteristies of enzyme sensors. The output current of the enzyme sensors depended linearly on the number of enzyme layers deposited. Thus, lactate oxidase (LOx) and alcohol oxidase (AlOx) were deposited after being modified with biotin for constructing enzyme sensors sensitive to L-lactate and ethanol respectively. It was also possible to deposit two different kinds of enzymes successively in a single multilayer. The glucose oxidase (GOx) and ascorbate oxidase (AsOx) were built into a multilayer structure on a Platinum electrode. The GOx, AsOx multilayer-modified electrode was useful for the elimination of ascorbic acid interference of the glucose sensor.

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Aspergillus niger KUF-04에 의한 Glucose Oxidase 생산조건에 관한 연구 (Studies on the Conditions of Glucose Oxidase Production by Aspergillus niger KUF-04)

  • 최남희;양호석;최용진;양한철
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제10권2호
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    • pp.145-154
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    • 1982
  • 토양에서 분리 동정된 Aspergillus niger KU K-04에 의한 glucose oxidase 생산을 최대화하기 위하여 효소생산에 미치는 배양조건 및 영양원에 대하여 연구하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 효소생성을 위한 최적배양온도, 배지pH 및 배양시간은 각각 28~34$^{\circ}C$, 7.0~8.0 및 40 시간이었다. 2. 탄소원으로서는 포도당이 가장 양호하였으며 최적농도는 15% (w/v)이었다. 3. (NH$_4$)$_4$SO$_4$가 질색원으로서 가장 좋은 효소활성을 나타냈으며 효소생산을 위한 최적농도는 0.02%이었다. 4. 무기염으로서는 MgSO$_4$. 7$H_2O$ 및 KH$_2$PO$_4$를 각각 0.05%와 0.02%를 첨가했을 때 효소생산이 증가되었다.

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Glucose Oxidase에 의해서 손상된 혈관내피세포에 대한 단삼의 영향 (Effect of Salviae Multiorrhizae Radix on the Vasculotoxicity induced by glucose oxidase in cultured Pumonary Endotherial cells)

  • 박상면;이종화;양현웅;이강창
    • 동의생리병리학회지
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    • 제17권1호
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    • pp.136-139
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    • 2003
  • Cytotoxicity of glucose oxidase(GO) and cardioprotective effect of Salviae Multiorrhizae Radix(SMR) against GO-induced cardiotoxicity were measured for evaluation of cardiotoxicity on cultured mouse pulmonary endotherial cells(PEC) by MTT assay after PEC were cultured for 8 hours at various concentrations of GO. GO was toxic in a time and dose-dependent manner on cultured PEC after PEC were grown for 8 hours in media containing 1~60mU/ml GO. While, cultures were pretreated with 60 μg/ml SMR for 2 hours increased remarkably cell viability. From the above results, it is suggested that GO is toxic on cultured PEC by the decrease of cell viability, and herb medicine such as SMR is very effective in the prevention of vascular toxicity induced by GO.

폴리이온복합체를 이용하여 글루코스 산화효소를 고정화한 바이오전지용 효소전극 제조 (Preparation of Enzyme Electrodes for Biofuel Cells Based on the Immobilization of Glucose Oxidase in Polyion Complex)

  • 린 타이 미 그웬;이남;윤현희
    • 공업화학
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    • 제24권1호
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    • pp.99-103
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    • 2013
  • 유리화탄소전극 위에 탄소나노튜브(CNT), 전하전달체(CTC), 글루코스 산화효소(GOx), 폴리이온복합체(PIC, poly-L-lysine hydrobromiderhk과 poly(sodium 4-styrenesulfonate) 혼합물)를 순차적으로 도포하여 글루코스/산소 바이오전지용 효소전극을 제조하였다. 또한, CNT, bilirubin oxidase (BOD), 2,2'-Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS), 그리고 PIC 등의 층으로 제조한 전극을 바이오캐쏘드로 사용하여 바이오전지를 제조하였다. CNT와 CTC가 전극의 성능에 미치는 영향을 조사하였으며, 글루코스농도 5, 20, 200 mM에서 각각 3.6, 10.1, $46.5{\mu}W/cm^2$의 최대전력밀도를 나타내었으며, 본 연구에서 제시한 전극이 바이오전지 및 바이오센서의 개발에 활용될 수 있다는 것을 보여주었다.

한지자숙폐액을 이용한 Saccharomyces cerevisiae의 배양에서 온-라인 FIA시스템에 의한 Glucose의 자동분석 및 첨가에 의한 증균 (Increase of Cell Concentration by the Automatic Analysis and Addition of glucose with an On-line Flow Injection Analysis System int he Cultivation of Saccharomyces cerevisiae Using a Korean Paper Digestion Wastewater)

  • 이형춘
    • KSBB Journal
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    • 제15권4호
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    • pp.388-392
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    • 2000
  • 한지자숙폐액을 이용한 Saccharomyces cerevisiae의 배양에 서 glucose의 자동분석 및 첨가에 의해 균농도를 증가시킴으로써 폐액의 재이용성을 향상시키파 하였다 배양액의 glucose를 자동분석하고 자동첨가하기 위하여 ceramic sampler, sampling, ralve, injection valve, glucose oxidase column, debubbler, flow cell과 백금전극, potentiostat, computer와 interface card, 및 tubing pump블로 구성된 glucose 자동분석 및 첨가시스템을 제작하였으며, glucose의 자동분석에는 glucose oxidase를 이용한 on-line FIA법을 채택하였다. 효모의 배양중 glucose자 동분석 및 첨가시스템을 사용하여 glucose를 자동첨가한 결과 배양액의 포도당농도가 $176{\pm}31 mg/L$ 의 낮은 농도로 제어 되었으며, glucose와 $>(NH_4)_2S0_4$의 첨가에 의해 총균수가 3.1 배 증가하였다.

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