The human polyomavirus JC virus is the etiologic agent of progressive multifocal leukoencephalopathy (PML). The JC virus early promoter directs cell-specific expression of the viral replication factor large T antigen, thus transcriptional regulation constitutes a major mechanism of glial tropism in PML. Here we found that pentanucleotide sequence immediately upstream of the TATA sequence functions as a cell-specific silencer in the JC virus transcription. In vitro binding studies showed that synthetic oligonucleotides spanning a pentanucleotide sequence, designated "oligo 2", interacts with nuclear proteins from non-glial cells in a cell-specific manner. Furthermore, the sequence preferentially repressed the heterologous thymidine kinase promoter activity in non-glial cells. We also tested whether JC virus transcription is controlled by DNA methylation. Transient transfection of in vitro methylated JC virus promoter abolished transcription in both the glial and non-glial cells. The repression fold was much larger in glial cells than in non-glial cells. Taken together, this finding suggests that glial cell-specific expression of the JC virus is controlled by DNA methylation as well as cell-specific silencers.
Objectives : The glial cell, located in between the blood vessel and nerve cell, takes charge of the cell support, nutrition supply, elimination of body waste, and cell action. GagamSohabhwangwon(GGSH), a chinese traditional medicinal prescription has been used orally for the treatment of seizures, infantile, convulsion, stroke and so forth. This paper examines the effect of the GagamSohabhwangwon(GGSH) essential oil on cell activity and anti oxidation. Methods : MTT assay methods were employed to measure the cell activity based on the amount of the GagamSohabhwangwon(GGSH) essential oil by using primarily cultivated glial cell. In addition, this paper measured a viability of the glial cell after a protein active retarder control to confirm the multiplication of the cell and examined the cell extinction by the active oxygen, an extinction shielding effect with different amount of the GagamSohabhwangwon(GGSH) essential oil to observe anti oxidation. Furthermore, this paper measured a viability of the cell and phosphorylation(phosphorylation) of the protein which affects the multiplication of the glial cell. Results : When controlling the amount of the GagamSohabhwangwon(GGSH), there was a multiplication effect of the primary glial cell, the multiplication of the cell was dependent on the density of the GagamSohabhwangwon. The multiplication power of the primary glial cell was suppressed by PKA inhibiter (H89). In compliance with the active oxygen the extinction of the primary glial cell was dependent on the density of the GagamSohabhwangwon, there was a shielding effect of the cell extinction when GagamSohabhwangwon(GGSH) was preprocessed. When inducing the multiplication of the primary glial cell, phosphorylation of the Akt, BDNF, CREB, ERK and ERM were increased. Conclusions: Based on the results, GagamSohabhwangwon essential oil will have the effect which activates the nervous system cell and protects the cell through anti oxidation.
The types of glia in the central nervous system (CNS) of the Drosophila embryo include longitudinal glia (LG), cell body glia (CBG), and peripheral glia (PG). Transcription factors, such as glial cell missing and reverse polarity, are well-established general glial cell markers. Only a few glial cell-specific markers have been identified in the Drosophila embryonic CNS, thus far. In the present study, we employed the glial cell-specific markers for LG (vir-1/CG5453 and CG31235), CBG (fabp/CG6783 and CG11902), and PG (CG2310 and moody/CG4322), and comprehensively analyzed their expression patterns, during the embryonic CNS development. Our study validated the specificity of a set of glial markers, and further revealed their spatio-temporal expression patterns, which will aid in the understanding of the developmental lineage, and investigating their role in the development and homeostasis of the Drosophila CNS in vivo.
Injury to brain transforms resting astrocytes to their reactive form, the hallmark of which is an increase in glial fibrillary acidic protein (GFAP), the major intermediate filament protein of their cell type. The overall glial response after brain injury is referred to as reactive gliosis. Glial-neuronal interaction is important for neuronal migration, neurite outgrowth and axonal guidance during ontogenic development. Although much attention has been given to glial regulation of neuronal development and regeneration, evidences also suggest a neuronal influence on glial cell differentiation, maturation and function. The aim of the present study was to analyze the effects of glial-hippocampal neuronal co-culture on GFAP expression in the co-cultured astrocytes. The following antibodies were used for double immunostaining chemistry; mouse monoclonal antibodies for confirm neuronal cells, rabbit anti GFAP antibodies for confirm astrocytes. Primary cultured astrocytes showed the typical flat polygonal morphology in culture and expressed strong GFAP and vimentin. Co-cultured hippocampal neurons on astrocytes had phase bright cell body and well branched neurites. About half of co-cultured astrocytes expressed negative or weak GFAP and vimentin. After 2 hour glutamate (0.5 mM) exposure of glial-neuronal co-culture, neuronal cells lost their neurites and most of astrocytes expressed strong CFAE and vimentin. In Western blot analysis, total GFAP and vimentin contents in co-cultured astrocytes were lower than those of primary cultured astrocytes. After glutamate exposure of glial-neuronal co-culture, GFAP and vimentin contents in astrocytes were increased to the level of primary cultured astrocytes. These results suggest that neuronal cell decrease GFAP expression in co-cultured astrocytes and hippocampal neuronal-glial co-culture can be used as a reactive gliosis model in vitro for studying GFAP expression of astrocytes.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.26
no.4
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pp.475-482
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2012
This study was designed to elucidate the mechanism of the cytoprotective effect of the Palmul-tang (PMT) on glutamate induced cytotoxicity in rat C6 glial cells. We determined the increase of cell viability by PMT on glutamate-induced death of C6 glial cell. On some experiments, glutamate induced cell death to be an apoptotic phenomena characterized by G1 arrest in cell cycle, chromatin condensation, DNA fragmentation in C6 glial cells. However, pre-treatment of PMT inhibited characteristic apoptotic phenomena. One of the main mediator of glutamate-induced cytotoxicity was known to generation of reactive oxigen species. In this study, PMT attenuated generation of reactive oxigen species by glutamate through down-regulation of NOX1 expression in C6 glial cells. Furthermore, PMT regulated Bcl2 families and caspase proteins, which contribute the cell survival or death. This study suggests that PMT may be candidate for both of therapeutic and protective prescription.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.24
no.6
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pp.1004-1011
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2010
This study was designed to evaluate the protective effects of Dodamtanggami-bang (DDTG) on tunicamycin induced cell death by ER stress in C6 glial cells. Cell viability was measured by MTT assay and LDH release. Apoptosis was determined by caspase activity and flow cytometry in C6 glial cells. Expression of ER stress mediators including, GRP78 and CHOP proteins were measured by Western blot analysis. Tunicamycin induced the apoptosis of C6 glial cells, which was characterized as nucleic acid and caspase-3 activation, PARP cleavage, and sub-G0/G1 fraction of cell cycle increase. However, pretreatment with DDTG protected C6 glial cells from tunicamycin. Treatment with tunicamycin resulted in the increased the expression of GRP78 and CHOP protein and produced ROS generation. However, pretreatment with DDTG inhibited the ER stress pathway, including increase of the expression of GRP78, CHOP proteins in C6 glial cells treated with tunicamycin. Taken together, these data suggest that DDTG is able to protect C6 glial cells from tunicamycin with marked inhibition of ER stress.
Glia have been known for its pivotal roles in physiological and pathological conditions in the nervous system. To study glial biology, multiple approaches have been applied to utilize glial cells for research, including stem cell-based technologies. Human glial cells differentiated from pluripotent stem cells are now available, allowing us to study the structural and functional roles of glia in the nervous system, although the efficiency is still low. Direct conversion is an advanced strategy governing fate conversion of diverse cell types directly into the desired lineage. This novel strategy stands as a promising approach for preliminary research and regenerative medicine. Direct conversion employs genetic and environmental cues to change cell fate to that with the required functional cell properties while retaining maturity-related molecular features. As an alternative method, it is now possible to obtain a variety of mature cell populations that could not be obtained using conventional differentiation methods. This review summarizes current achievements in obtaining glia, particularly oligodendrocytes and Schwann cells.
Parenchyma of the cat pineal body consisted of pinealocytes and glial cells. The pinealocyte, predominant cell type, was characterized by having large mitochondria with pale matrix, abundant polyribosomes, moderately-developed Golgi apparatus, centrioles and occasional cilia. The pinealocyte had one thick and long cytoplasmic process at the one pole of the cell, and slender and shorter processes at the other pole, and in addition occasional short processes from the cell body. These processes contained longitudinally arranged microtubules, and a few mitochondria. Thick processes teminated as bulgings either in the intercellular process-rich area, or in the perivascular border which was formed by glial cell processes. These endings of pinealocyte processes had many small vesicles, mitochondria, and occasional dense bodies. Glial cells with abundant filaments of intermediate type and clear cytoplasmic matrix were fibrous astrocyte. Perikarya of the astrocytes had small and dense mitochondria, moderately developed Golgi apparatus, dense bodies and variable amount of intermediate filaments. Glial cell processes run through the intercellular spaces among the pinealocyte processes. Glial cell of protoplasmic type had no or a few filaments, but it had well-organized rough endoplasmic reticulum, dense mitochondria, well developed Golgi apparatus and many dense granules. Intercellular canaliculi formed by adjacent pinealocytes and glial cell processes were often noted. Within the parenchyma, sympathetic and parasympathetic axons and their endings were noted. These endings were present mostly in the intercellular spaces without having membrane specialization, however, in rare instances, ending with small clear and dense cored vesicles, and large dense cored vesicles formed specialized synapse with a pinealocyte process. Within the perivascular spaces nerve fibers and endings, Schwann cells and pericyte were noted. In rare case pinealocyte process penetrated into the perivascular space through the interuptions of glial border. These results suggest that pinealocyte of the cat has less significance in secretory function and is rather neural type of cell.
Objective : The water extract of Yukgunja-tang(YGJT) has been traditionally used in treatment of qi deficiency and phlegm in Oriental medicine. However, little is known about the mechanism by which YGJT protects neuronal cells from injury damages. Therefore, this study was designed to evaluate the protective effects of YGJT on C6 glial cells by glutamate-induced cell death. Methods : The present study describes glutamate, which is known as an excitatory neurotransmitter, related with oxidative damages, and YGJT, which shows protective effects against glutamate-induced C6 glial cell death. One of the main mediators of glutamate-induced cytotoxicity was known on the generation of reactive oxygen species(ROS) via activation of NADPH oxidase (NOX). The protective effects of antioxidant(NAC) and NOX inhibitor(apocynin) on the glutamate-induced C6 glial cells were determined by a MTT reduction assay. Result : YGJT inhibited glutamate-induced ROS generation via inhibition of NOX expression on glutamate-stimulated C6 glial cells. Furthermore, YGJT attenuated glutamate-induced caspase activation. These results suggest that YGJT could be a new potential candidate against glutamate-induced oxidative stress and cell death. Conclusion : These findings indicate that in C6 glial cells, ROS plays an important role of glutamate-induced cell death and that YGJT may prevent cell death from glutamate-induced cell death by inhibiting the ROS generation.
Objectives : The objective of the current study is to determine the protective effect of Ukyium(Yougui-yin) on the apoptosis induced by zinc. Methods : Zinc is known to generate reactive oxygen species (ROS), including superoxide anion ($O_2$) and hydrogen peroxide ($H_2O_2$), which eventually contribute to cytotoxicity in a variety of cell types. We investigated the viablity of cells, $H_2O_2$ generation, chromatin condensation and nuclear fragmentation in Hoechst dye staining and $IkB-{\alpha}$ degradation in C6 glial cells of $ZnCl_2$ between pretreatment- and not pretreatment-group with Ukyium. The former methods were researched by Time- and Dose-dependent manners. Results : We demonstrated that pretreatment with Ukyium prevented zinc-induced cell death of C6 glial cells and apoptotic characteristics including chromatin condensation and nuclear fragmentation. Ukyium also prevented $H_2O_2-induced$ cell death. We further confirmed that Ukyium decreased zinc-induced generation of $H_2O_2$ and inhibited degradation of $IkB-{\alpha}$ by zinc in C6 glial ceHs. Conclusions : These data indicated that Ukyium (Yougui-yin) prevents zinc-induced apoptotic death of C6 glial cells via inhibition of ROS generation, such as $H_2O_2$ as well as inhibition of $IkB-{\alpha}$ degradation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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