This study was performed to investigate the best staining method for the somatic cell classification of dairy goat milk. Dairy goat milk samples, which were collected randomly from a dairy goat farm in Jeollanam-do, South Korea, were stained and analyzed with direct microscopic method, using 5 different staining methods; Wright's stain, Giemsa stain, Diff-quik stain, Newman's stain and Pyronin Y-Methyl Green stain, respectively. Among them, The Newman's staining was found to be the most rapid and effective method, for it required the shortest time for staining and provided the easiest way to classify somatic cells.
한국산 청서(Sciunis vulgaris corea)와 다람쥐(Tamias sibiricus asiaticu)의 핵형을 일반 Giemsa- stain과 C-banding stain방법으로 분석하였다. 청서의 염색체 수는 2n=40이였으며 이 중 6쌍은 중부, 8쌍은 차중부, 3쌍은 차단부 그리고 2쌍은 단부 염색체이었고 X 염색체는 차중부,Y염색체는 acro또는 차단부 염색체로서 NF(arm number)=72(성염색체 제외)를 나타내었다. 다람쥐의 염색체 수는 2n=38이었으며 이 중 3쌍은 중부, 4쌍은 차중부, 5쌍은 차단부, 그리고 6쌍은 단부 염색체이었고 X염색체는 차중부, Y염색체는 중부염색체로서 NF=60을 나타내었다. C-banding분석결과, 청서의 염색체에서는 각 경우 대부분 동원체 (centromere)부위와 말단부(telomere)에 주로 구조적이질염색질이 분포하였고 다람쥐에서는 몇몇 염색체상(제2,3,9번)을 제외하고는 주로 동원체 부위에 구조적이직염색질이 분포하였다. 이러한 결과들로 보아 핵형상의 분화에 non-Robensonian 재배열과 구조적 이질염색질의 분포가 중요한 작용을 한 것으로 생각된다.
본 연구에서는 배양된 액체종균의 세균 오염 여부를 Giemsa 용액의 단일 염색으로 짧은 시간 안에 정확하게 판정이 가능한지를 조사하였다. Giemsa 용액은 혈액 골수 림프절 말라리아 원충 리케차 세포 등을 염색하는 것으로, 염기성 색소인 methylene azul과 methylene blue, 그리고 산성색소인 eosine을 methyl alcohol-glycerine에 녹여서 제조하였다. 그리고 팽이 액체종균의 폭기 배양액 분취하여 슬라이드에 올리고 Gimesa 용액으로 염색한 후 광학 현미경으로 검사하였다. 이 결과 40~60초 동안의 세균세포를 (팽나무)버섯(류) 균사세포의 부스러기나 잔존 대두박 등과 구별할 수 있었다. 이 Gimesa 용액을 이용한 염색 및 검경방법은 빠르고 간편하며 정확하므로 액체종균을 사용하는 버섯재배 농가에서도 세균 오염을 효과적으로 동정(감지)하는데 이용할 수 있다고 생각한다.
최근 우리나라는 anaplasmosis 유행 지역으로부터 사슴을 비롯한 반추수를 수입하고 있다. 이처럼 리켓치아성 질환을 비롯한 원충성 질병의 국내 유입 기회가 높아지고 있다. 그러나 사슴에서의 anaplasmosis에 대한 연구보고 예는 접할 수 없었다. 1993년 전라북도의 한 사슴 목장에서는 호주 등지로부터 수입한 250 여두의 사슴에서 빈혈을 수반한 심한 쇄약증세를 나타내는 20마리 사슴의 혈액도말 표본을 Giemsa stain 과 acridine orange stain 방법으로 진단하였던 바, 이 중 8 마리에서 Anaplasma spp가 관찰되었기에 anaplasmosis에 의한 경제적 손실을 최소화하는데 일익을 도모하고자 사슴에서의 anaplasmosis 발병을 보고하는 바이다.
The present studies were designed to investigate the morphology and stainability of the chicken spermatozoa. Semen samples were collected by abdominal massage from 10 cocks of Arbor, Acres strain (egg breed) and 10 cocks of white Cornish strain (meat breed). The semen samples were diluted with Sarker's solution and were washed. Some of the semen smear slides were stained with seven differential stain methods and was compared with one another by light microscope. In addition to the staining already compared, the length of heads, middle pieces and tails of 400 spermatozoa of two chicken breed was measured with micrometer. The results obtained from these, studies were as follows: 1. Eosin stain appeared to give good results than hematoxylin, pre-treated protease and eosin or hematoxylin stain, pre-treated protease and hematoxylin-eosin stain, carbol-fuchsin, stain and Giemsa 9 technique in differential staining of spermatozoal three portions and pre-treated protease and eosin stain appeared as good staining methods for middle piece of spermatozoa. 2. The average length of chicken spermatozoa was $90.4{\pm}4.0{\mu}m$, and the average length of the head, middle piece and tail of spermatozoa was $13.0{\pm}0.5{\mu}m$, $3.8{\pm}0.2{\mu}m$ and $73.6{\pm}3.8{\mu}m$ lesoectively. 3. The average length of spermatozoa of Arbor Acres strain was $89.2{\pm}5.0{\mu}m$ and the average length of the head, middle piece and tail of spermatozoa was $12.9{\pm}0.5{\mu}m$, $3.8{\pm}0.2{\mu}m$ and $72.5{\pm}4.7{\mu}m$ respectively. The average length of spermatozoa of with Cornish was $91.6{\pm}3.0{\mu}m$ and the average length of the head, middle piece and tail of spermatozoa was $13.1{\pm}0.5{\mu}m$, $3.8{\pm}0.2{\mu}m$ and $74.7{\pm}2.8{\mu}m$ respectively.
Abdel-Hafeez, Ekhlas H.;Ahmad, Azza K.;Ali, Basma A.;Moslam, Fadia A.
Parasites, Hosts and Diseases
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제50권1호
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pp.57-62
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2012
A total of 450 stool samples were collected from inpatient and outpatient clinics of Pediatric Department, Minia University Hospital, Minia District, Egypt. Two groups of patients were studied, including 200 immunosuppressed and 250 immunocompetent children. Stool samples were subjected to wet saline and iodine mounts. A concentration technique (formol-ether sedimentation method) was carried out for stool samples diagnosed negative by wet saline and iodine mounts. Samples were stained by 2 different methods; acid fast stain (modified Ziehl-Neelsen stain) and Giemsa stain. Total 188 cases (94%) were diagnosed positive for parasitic infections among immunosuppressed children, whereas 150 cases (60%) were positive in immunocompetent children ($P$<0.0001). The most common protozoan infection in immunosuppressed group was $Cryptosporidium$$parvum$ (60.2%), followed by $Blastocystis$$hominis$ (12.1%), $Isospora$$belli$ (9.7%), and $Cyclospora$$caytenensis$ (7.8%). On the other hand, $Entamoeba$$histolytica$ (24.6%) and $Giardia$$lamblia$ (17.6%) were more common than other protozoans in immunocompetent children.
Kimura's disease is a chronic inflammatory disorder of unknown cause and is most prevalent among Asians. The cytologic findings of Kimura's disease are significant numbers of eosinophils in a background of lymphoid cells, occasional fragments of collagenous tissue, proliferation oi vessels, and Warthin-Finkeldey polykaryocytes. Among these features, the most important cytologic feature of Kimura's disease is a significant numbers of eosinophils. We experienced a case of Kimura's disease in the parotid gland which we fatted to recognize on cytology due to the apparent paucity of eosinophils. On careful retrograde reviewing of the cytologic findings, a few scattered leukocytes, previously interpreted as polymorphous leukocytes, had bilobed nuclei and coarse green but granular cytoplasm on Papanicolaou preparation. These leukocytes showed obvious orange-red intracyloplasmic granules as in eosionophils on Giemsa stain. The paucity of eosinophils may be due to the thick fibrosis around lymphoid follicles or any technical error during aspiration. Whereas the Warthin-Finkeldey type giant cell is not a sensitive cytologic marker of Kimura's disease, it may be a helpful cytologic feature. To reach a correct cytologic diagnosis of Kimura's disease, It is important to keep in mind that searching for Warthin-Finkeldey type giant cells and evaluation of Giemsa stain for detection of eosinophils would be helpful.
Low parasitemic condition in malaria remains a diagnostic challenge; as the available diagnostic methods failed to detect. Currently, hemozoin (Hz) pigment is gaining attention in the diagnosis of malaria. The major drawback is ease of detection of Hz in routine practice. A pilot study was conducted to evaluate the role of Hz pigment and to compare the performance of quantitative buffy coat assay (QBC) and PCR in such conditions. Clinically suspected cases of malaria were examined by both Giemsa stain and immunochromatographic test (ICT). Samples positive by ICT and negative by Giemsa stain were further examined by nested PCR targeting 18S rRNA and QBC for the presence of malaria parasites and pigments. Thirty blood samples fulfilled the inclusion criteria out of which 23 were Plasmodium vivax (Pv), 4 Plasmodium falciparum (Pf), and 3 mixed (Pv and Pf) by immunochromatographic test. Twenty-one out of 30 (70%) were positive by nested PCR in comparison to 25/30 (83%) by QBC. Samples containing both malaria parasites and Hz pigment by QBC completely showed concordance with the PCR result. However, 61% of total samples containing only Hz pigment were observed positive by PCR. Hz pigment remains an important tool for malaria diagnosis. Identification of leukocytes containing pigments by QBC not only indicates recent malarial infections but also puts light on severity of the disease. QBC assay is a rapid, highly sensitive, and cost-effective method to detect malaria parasites and Hz pigment especially in low parasitemic conditions.
Theileria sergeni의 진단방법으로 Giemsa 염색에 의한 광학현미경적 관찰이 가장 통상 적으로 이용되고 있으나 감염이 아주 적거나 내과성인 경우 검출하기가 매우 곤란하다. 이에 PCR 진단을 위한 대강유전자로서 p33의 염기서열을 이용하여 4개의 oligonucleotide primers. TS1, TS2 ,TS3,, TS4를 작성하였다. 작성된 primer의 각 조합에 따라 PCR한 결과 TS1과 TS4 조합에서는 499 bps, TS1과 TS3 조합에서는 381 bps, TS2와 TS4 조합에서는 365 bps, TS2 와 TS3 조합에서는 247 bps 크기의 산물을 획득하였다 이 PCR산물은 p33 유전자 염기서열 분석을 통한 제한효소처리 및 Southern blot hybridization 방법을 통하여 그 특이성을 확인하였다. Primer의 특이성을 조사한 결과 미감염 백혈구 및 다른 주혈기생충인 Babesic ouota, Anaplosmn marginate에 대해서는 교차 반응을 나타내지 않았다. 또한 야외시료에 PCR 기법을 적용한 결과 Giemsa 염색에 의한 광학현미경적 관찰에서는 64.8%의 양성률을 보인 반면, PCR 진단에서는 본 실험에서 작성된 TS1과 TS4, TS2와 TS3 조합이 공희 88.7%의 양성률을 나타내었다.
Benzimidazole계 살균제의 세포독성을 평가하기 위하여 CHL(chinese hamster lung) 세포를 이용한 Giemsa stain assay, Lactic dehydrogenase(LDH) activity, MTT assay, DNA synthesis inhibition test 및 Sulforhodamin B(SRB) assay를 수행하여 benzimidazole 계 살균제에 대한 약제별 세포독성을 평가하고 위해도 평가를 위한 자료로 사용하고자 하였다. 시험결과 LDH 활성은 carbendazim 4.0, 16.0 및 $32.0{\mu}g/mL$을 24 시간 처리하였을 때 음성대조군에 비해 농도별로 세포독성이 각각 2.16, 2.94 및 2.64배 강하게 나타났다. DNA 합성시험에서는 carbendazim $2.0{\mu}g/mL$ 농도에서 약 45% DNA 합성을 저해하였으며, Giemsa assay와 MTT assay에서도 세포와 mitochondria에 독성을 일으키는 것으로 나타났다. Giemsa assay의 $IC_{50}$은 thiophanate-methyl, benomyl, carbendazim 및 양성대조 약제인 captafol에서 각각 >125, 1.2, 30.0 및 $0.3{\mu}g/mL$ 이었고, MTT assay의 $IC_{50}$은 thiophanate-methyl, benomyl, carbendazim 및 captafol에서 각각 >125, 18.7, 20.4 및 $2.6{\mu}g/mL$이었다. 그리고 세포 증식에 대한 영향을 조사하기 위하여 수행된 SRB assay 의 $IP_{50}$(반수세포증 식억제농도)에서도 thiophanate-methyl, carbendazim, benomyl 및 captafol이 각각 17.4, 5.3, 1.5, 및 $0.5{\mu}g/mL$으로 관찰되었다. 이상의 결과는 급성독성이 낮은 benzimidazole계 살균제가 유전독성 등 특수독성이 강하게 나타나는 원인일 것으로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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